非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病的研究进展

非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病(MYH9-RD)是一组罕见的人类常染色体显性遗传的巨大血小板减少症,其发病机制、基因型与表型之间的相互关系等目前还不甚明确,本文作者对近年来MYH9相关疾病方面的研究做一综述。

1例非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病家系并文献复习

目的鉴定1例非肌性肌球蛋白重链9(MYH9)基因相关疾病家系的致病突变。方法调查收集先证者和家系成员病史资料,观察其临床特征和实验室检查指标。采用芯片捕获高通量测序方法检测先证者MYH9基因,确定突变位点后,对先证者和家系成员进行Sanger验证。结果该家系三代4名患者均有鼻衄、瘀斑紫癜、外伤血肿或月经量增多病史,长期存在镜下血尿和蛋白尿。血涂片镜检均有血小板减少、巨大血小板和粒细胞异常包涵体“三联征”。所有患者MYH9基因第40内含子供体剪接位点存在错义突变c.5765+2T>A(p.R1922Rfs*43),且该基因突变与疾病表型共分离。结论该家系存在MYH9基因c.5765+2T>A(p.R1922Rfs*43)剪接突变,是MYH9基因相关疾病的致病突变,为国内首次报道。

非肌球蛋白重链9相关疾病大家系患者中性粒细胞包含体特点分析

目的分析一非肌球蛋白重链9相关疾病(MYH9-RD)大家系患者中性粒细胞包涵体的形态和结构特点,阐明MYH9-RD中性粒细胞包涵体形成的特点,以探讨MYH9-RD中性粒细胞包涵体的致病机制。方法应用光学显微镜(瑞姬染色)和电子显微镜观察中性粒细胞包涵体形态和超微结构特点;应用间接免疫荧光复染技术观察MYH9-RD患者与正常对照者之间非肌性肌球蛋白IIA(NMMHC-IIA)在胞浆中的分布情况。结果光学显微镜和电子显微镜下可见中性粒细胞中明显的包涵体,形态多样,大多位于细胞边缘;间接免疫荧光复染技术显示患者和正常人之间NMMHC-IIA在中性粒细胞中的分布有差异,中性粒细胞胞浆中存在明显绿色荧光的包涵体,其形态和轮廓与瑞一姬氏染色显示的包涵体形状、大小基本一致,但更为清晰;正常对照的粒细胞胞浆中未见包涵体。结论光学显微镜和电子显微镜进一步确认了家系患者包涵体的存在。免疫荧光技术显示患者和正常人之间NMMHC-IIA在中性粒细胞中的分布有差异;MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的主要构成成份是NMMHC-IIA;包涵体的形态结构复杂多样可能与本家系临床表型复杂多样有关,该家系对进一步揭示MYH9-RD的致病机制具有重要的意义。

非肌性肌球蛋白重链9基因突变相关疾病

非肌性肌球蛋白重链9基因是May-Hegglin异常、Fechtner综合征、Epstein综合征和 Sebastian综合征等此类以巨大血小板和血小板减少为共同特征的常染色体显性遗传病的致病基因。此类疾病临床上易误诊为特发性血小板减少性紫癜,因误诊而采取的错误治疗带来的副作用远远大于疾病本身所带来的危害。

非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病2例报告并文献复习

目的探讨非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病(MYH9-RD)的基因突变及临床特征.方法回顾分析同一家系2例MYH9-RD患者的临床资料,并复习相关文献.结果先证者(男,1岁5个月)及其父亲(30岁)均有巨大血小板、血小板减少和粒细胞内包涵体,先证者之父还存在神经性耳聋,均曾误诊免疫性血小板减少症,接受激素治疗无效.先证者及其父亲存在MYH9基因c.4270G>A杂合突变,导致氨基酸改变p.D1424N,为错义突变.国内已报道48个家系MYH9-RD,38个有基因测序结果,其中c.4270G>A(p.D1424N)为国内报道最多的MYH9基因突变类型.结论结合细胞形态学及基因检测有利于MYH9-RD的早期诊断,c.4270G>A(p.D1424N)为国内最为常见的MYH9基因突变类型.

非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病的研究进展

非肌性肌球蛋白重链9(MYH9)基因相关疾病是由MYH9基因突变所引起的一组罕见的常染色体显性遗传性疾病,临床表现以巨大血小板、血小板减少和中性粒细胞包涵体为主,部分患者还可出现感音神经性耳聋、先天性白内障或间质性肾炎等症状。近年来国内外关于MYH9基因相关疾病的报道较多,但其发病机制、基因型与表型之间的关系等尚未明确。本文就MYH9基因相关疾病的研究进展进行综述。

一非肌球蛋白重链9基因相关疾病家系患者的临床及分子生物学特点

目的:探讨一非肌球蛋白重链9基因相关疾病(MYH9-RD)家系的临床表型和分子生物学特性,以阐明MYH9-RD形成的分子机制。方法:通过临床评估和实验室检测对家系进行筛查,应用光学显微镜和自动血细胞计数仪对家系成员进行血小板计数及外周血细胞形态观察,应用聚合酶链反应和直接测序方法分析家系患者MYH9基因突变情况。结果:家系内MYH9-RD患者15例,所有患者均具有典型的"血小板减少、巨大血小板和粒细胞包涵体"三联症,而且都有轻至中度的出血倾向;临床表现具高度复杂性,并伴有严重的白血病、青光眼、心功能不全、转氨酶升高、血脂升高、哮喘、鼻炎及白内障等多种疾病;家系患者MYH9基因的所有外显子与侧翼区均未检测到致病性突变。结论:临床表现和实验室检测表明该家系MYH9-RD诊断成立,其临床表型复杂多样可能与家系患者MYH9基因的所有外显子与侧翼区未检测到致病性突变有关。

非肌性肌球蛋白重链9、信号转导和转录激活因子4、尿激酶型纤溶酶原激活物单核苷酸多态性与新疆维吾尔族特发性膜性肾病相关性

目的探讨非肌性肌球蛋白重链9(MYH9)(rs12107)、信号转导和转录激活因子4(STAT4)(rs3024912)、尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)(rs4065)位点单核苷酸多态性与特发性膜性肾病相关性。方法对2012年12月-2016年12月在新疆维吾尔自治区人民医院肾活检确诊的90例维吾尔族特发性膜性肾病(IMN)患者为病例组,90例维吾尔族健康对照,采用基因测序方法分析rs12107、rs3024912、rs4065位点单核苷酸多态性(SNP),分析其基因型与IMN易感性及IMN肾功能相关性。结果病例组rs12107位点CC基因型、C等位基因频率(46.67%,63.33%)高于对照组(28.89%,48.33%),差异有统计学意义(P=0.013,P=0.004);C等位基因携带者患IMN的风险是T等位基因的2倍(OR=1.85,95%CI=1.21-2.81);rs12107位点CC基因型较non-CC基因型的患者发生肾功能衰竭的风险高(OR=4.38,95%CI=1.80-2.92,P=0.002);病例组rs3024912位点GG基因型、G等位基因频率(50.00%,61.11%)高于对照组(28.89%,45.00%),差异有统计学意义(P=0.013,P=0.002);G等位基因携带者患IMN的风险是T等位基因的2倍(OR=1.92,95%CI=1.26-2.92);rs3024912位点GG基因型的患者是非GG基因型的患者发生肾功能衰竭风险的3倍(OR=3.20,95%CI=1.28-8.01,P=0.012);rs4065位点只有TT一种基因型,未见到TC、CC基因型。结论新疆维吾尔族MYH9基因rs12107位点存在C/T多态性,CC基因型在IMN患者中的频率高于正常对照组,且与IMN肾功能进展相关。STAT4基因rs3024912位点GG基因型既是IMN的功能基因,亦是其易感基因。uPA rs 4065位点未发现T/C多态性。

慢性肾脏病与非肌性肌球蛋白重链9基因多态性的相关性

目的：探讨我国慢性肾脏病（CKD）患者与非肌性肌球蛋白重链9（MYH9）基因多态性的相关性。方法：选取301例CKD患者作为观察组，294例体检健康者作为对照组。采用PCR法检测MYH9基因rs3752462、rs4821480两位点基因多态性，分析MYH9不同基因型与CKD患者的发病年龄、性别、血压、24h尿蛋白定量、血清肌酐、肾小球滤过率、原发病及服用降压药频率的相关性。结果：单因素分析结果显示，CT基因型患者的收缩压高于CC基因型（147．94±27．40mmHg，136．43±19．09mmHg，P〈0．05）；CC基因型患者的肾小球滤过率（32．00±29．98）显著高于CT基因型（21．62±23．67，P〈0．05）及TT基因型（21．99±24．18，P〈0．05）。校正年龄因素后，多因素Logistic回归分析结果显示：rs3752462位点CC基因型是CKD患者收缩压增高的保护因素，CT基因型CKD患者患高血压的概率是CC基因型的0．175倍（95％C10．071～0．431）；rs3752462位点CC基因型是CKD进展至终末期肾病（ESRD）的独立保护因素，CC基因型肾小球滤过率是TT基因型的0．410倍（95％C10．183～0．922）。结论：携带MYH9基因rs3752462位点CC基因型的CKD患者不易患高血压，且肾损害进展慢，CC基因型是CKD患者的保护因素。等位基因C突变为T可导致收缩压升高甚至ESRD的发牛。

新生儿非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病1例

本文报道1例非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病新生儿,患儿母亲孕前即发现血小板减少,治疗效果不佳,产前血小板波动于(9~71)×10^(9)/L,检测血小板功能正常,患儿生后血小板64×10^(9)/L,全外显子组测序发现母婴均存在MYH9基因第41号外显子c.5797C>T(p.Arg1933Ter)杂合变异,诊断明确,患儿无出血表现,未予治疗。

多物种中非肌肉肌球蛋白ⅡA相关功能的研究进展

非肌肉肌球蛋白ⅡA(non-muscle myosin ⅡA, NM ⅡA)由非肌肉肌球蛋白重链9(Non-muscle myosin heavy chain 9,MYH9)基因编码,是非肌肉肌球蛋白Ⅱ的家族成员,在多种细胞中表达,参与调控细胞收缩、细胞迁移和细胞形状维持等细胞生理过程。NM ⅡA对脑、肾、血管等发育至关重要,其基因突变导致MYH9相关疾病(MYH9-related disease,MYH9-RD)。此外,近年来有研究表明NM ⅡA还参与其他生理和病理过程的调节,如血管新生和肿瘤进展等。本文将对人、小鼠和斑马鱼中NM ⅡA相关功能的研究进展进行综述。

儿童非肌性肌球蛋白重链9基因相关血小板减少性疾病诊断与治疗

非肌性肌球蛋白重链9基因相关疾病（nonmuscle myosin heavy chain 9 related disease，MYH9-RD）是MYH9基因突变引起的遗传性血小板减少性疾病，为常染色体显性遗传。患儿自出生起即表现为巨大血小板减少症，症状常伴随终生。通常表现为轻微出血症状，但因临床对该病认识不足，患儿常被漏诊或误诊为慢性免疫性血小板减少性紫癜（ITP），给予不必要甚至有害的治疗，造成不良预后。为避免这种情况发生，本文就儿童MYH9-RD诊断治疗进展做一阐述。

儿童散发性MYH9相关疾病1例报告

非肌性肌球蛋白重链9相关疾病(MYH9-RD)是遗传性血小板减少症的病因之一,常伴有肾脏损害、感觉神经性耳聋、白内障等血液系统以外的表现。患儿,女,13岁,血小板减少12年余,血尿、蛋白尿4年余。外周血涂片镜检存在血小板数量下降(10~30)×10^(9)/L,血小板体积增大。尿常规示蛋白+++,红细胞(15~17)/HP,24小时尿蛋白定量4.34 g[相当于76 mg/(kg·d)]。纯音阈测定提示高频听力受损,眼科检查提示存在早发性白内障。基因检测证实患儿存在MYH9基因c.2104C>T(p.R702C)位点杂合突变,为已见文献报道的致病性变异,家系验证患儿父母、哥哥均为野生型。明确诊断为MYH9-RD。先后予缬沙坦、环孢素治疗,患儿肾脏损害持续性进展,并进展至CKD2期。白内障及听力损害亦进行性加重。对于难治性血小板减少的患儿需警惕MYH9-RD可能,基因检测有助于早期明确断。

MYH9相关疾病基因型与表型相关性及治疗策略的研究进展

MYH9相关疾病(MYH9-RD)是由编码非肌性肌球蛋白重链ⅡA的MYH9基因突变引起的一种罕见的遗传性巨大血小板减少性疾病,典型表型为血小板减少、巨大血小板及中性粒细胞包涵体三联征,部分患者还可伴发肾炎、感音性耳聋、白内障及慢性肝酶异常等非血液系统症状。MYH9相关疾病的突变型多达137种,并与表型具有一定相关性:当突变位于非肌性肌球蛋白重链ⅡA的头部动力区,患者的出血倾向较严重,伴发非血液系统症状风险更高且进展更快;而携带非肌性肌球蛋白重链ⅡA杆、尾部结构域突变的患者,出血表现相对较轻,伴发非血液系统症状的风险相对较低。这种基因型与表型的相关性为临床早期诊断、风险预测及早期干预奠定了理论基础。文章对近年来MYH9-RD基因型与表型的相关性及治疗策略的研究进展做一综述。

MYH9、STAT4、uPA基因多态性与特发性膜性肾病的相关性

目的：探讨MYH9（rs12107）、STAT4（rs3024912）、uPA（rs4065）单核苷酸多态性与特发性膜性相关性。方法：2011年6月至2015年5月在新疆维吾尔自治区人民医院确诊的45例特发性膜性肾病（IMN）患者为病例组（IMN组），45例IgA肾病（IgAN）患者为疾病对照组（IgAN组），45例健康体检者为健康对照组，选取直接测序方法检测rs12107、rs3024912、rs4065位点单核苷酸多态性（SNP），分析3个位点基因型及等位基因频率与IMN相关性。结果：A组rs12107位点CC基因型、C等位基因频率（48．9％、65．6％）高于B组（13.3％、33．3％）和C组（20．0％、46．7％），差异有统计学意义（P〈0．05）：C等位基因携带者患IMN的风险是T等位基因的2．18倍（95％CI1．19～3．97）：单因素Logistic回归分析rs12107位点CC基因型较非CC基因型的患者发生肾功能衰竭的风险高（OR=5．56，95％CI 1．27～24．29，P=0．023）；rs3024912基因型和等位基因频率在3组之间差异均无统计学意义；rs3024912位点GG基因型的患者是非GG基因型的患者发生肾功能衰竭风险的6．30倍（95％CI1．48～26．83，P=0．013）；rs4065位点只有TT一种基因型，未见到TC、CC基因型。结论：MYH9基因m12107位点CC基因型和C等位基因是新疆维吾尔族IMN的易感因素，且CC基因型与肾功能相关：STAT4基因rs3024912位点GG基因型与新疆维吾尔族IMN易感性无关．但与肾功能相关。

MYH9相关疾病的新进展

MYH9相关疾病(MYH9-RD)是遗传性血小板减少症最常见的类型之一,是非肌性肌球蛋白重链ⅡA基因,即MYH9变异所致的常染色体显性遗传疾病。患者表现为先天性轻度出血倾向的大血小板性血小板减少症,并可能出现进展性的肾功能异常、耳聋或者白内障。MYH9-RD包括4种之前分别认识的常染色体显性遗传性疾病:May-Hegglin畸形、Sebastian综合征、Fechtner综合征和Epstein综合征。其血小板减少的程度多不严重,诊断比较容易,通过外周血涂片见巨大的血小板即可疑似为该病,进而进行血涂片免疫荧光的方法即可确诊。目前认识到其基因型和临床表现型之间有相关性。临床研究表明促血小板生成素拟似物对该类疾病患者的血小板减少及出血倾向均可能有效。

我国部分汉族人群MYH9多态性与终末期肾病的关联研究

目的:探索我国部分汉族人群非肌性肌球蛋白9(MYH9)基因第22号外显子与24号外显子间基因序列多态性与终末期肾病(ESRD)的关系。方法:采用以医院为基础的病例对照研究设计,纳入180例ESRD患者,并选择同期体检118例作为对照人群。采用PCR后测序策略检测MYH-9基因多态性,运用Phase2.0软件计算多态性位点连锁关系,转录因子结合位点分析采用网络AliBaba2软件完成。结果:采用双向测序共发现8个基因片段多态性位点,其中5个为新发多态性位点,3个为以前报道的多态性位点。新发多态性位点中,有2个多态性位点(G489A和A616C)位于MYH9基因第23内含子中。关联研究发现,G489A仅存在于ESRD患者中,与对照组比较有显著差别(P=0.013),该结果提示该基因转换可能是危险因素。以前文献报道的Rs4821480(MYH9-92)、Rs2032487(MYH9-273)及Rs4821481(MYH9-787)未见与ESRD相关。连锁分析结果显示TCTCGGAT为最常见连锁形式,但ESRD人群该连锁基因型频率稍低于对照组,而TCTCGGCT和TCTCAGAT在ESRD人群出现频率较对照人群高。转录因子结合位点分析,MYH9基因第23内含子的野生型转录因子结合位点数量少于基因突变后的数量。结论:我国汉族人群MYH9基因23内含子附近基因序列的多态性及其连锁关系可能与ESRD发生、进展相关,该基因可能通过基因突变造成该区域转录因子结合位点数量改变来影响疾病的进程。

MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的定位和本质鉴定

目的检测和分析非肌性肌球蛋白重链ⅡA(NMMHC-ⅡA)在MYH9-RD患者中性粒细胞胞浆中的定位及表达,以确定包涵体的构成本质。方法应用间接免疫荧光技术,观察MYH9-RD患者及正常对照者NMMHC-ⅡA在胞浆中的定位和分布情况;应用Western blot技术检测和分析中性粒细胞中NMMHC-ⅡA在患者和正常对照者之间蛋白表达水平的差异。结果免疫荧光技术清楚地显示了患者中性粒细胞胞浆中呈绿色荧光的"梭形"包涵体的形态和轮廓,与瑞特姬姆萨染色显示的包涵体形状、大小基本一致,但更为清晰;而正常对照者除有散点状的荧光斑点外,无包涵体形成;Western blot结果显示患者NMMHC-ⅡA表达量较正常对照者降低。结论 MYH9-RD患者中性粒细胞包涵体的主要成份是NMMHC-ⅡA,NMMHC-ⅡA的显阴性作用导致了包涵体的形成。

食管癌细胞线粒体中MYH9蛋白的分布及与SLP-2结合的研究

目的研究非肌性肌球蛋白重链9(myosin,heavy chain 9,non-muscle,MYH9)蛋白在食管鳞癌细胞线粒体内的分布,及MYH9蛋白与线粒体相关蛋白SLP-2的结合情况。方法使用抗stomatinlike protein 2(SLP-2)抗体,在食管鳞癌细胞系KYSE150细胞的裂解液里进行免疫共沉淀,共沉淀物使用MALDI-TOF-MS蛋白质质谱进行分析,以分析与线粒体相关蛋白SLP-2结合的分子。对分析结果再继续使用免疫共沉淀及GST pull down法进行验证。使用蔗糖密度梯度离心纯化分离细胞线粒体,利用Western blot明确MYH9在食管癌细胞线粒体内的分布。结果在食管鳞癌细胞系KYSE150细胞的裂解液内,MYH9蛋白可与SLP-2蛋白共沉淀,并且MYH9蛋白也能与GST-SLP-2结合。MYH9蛋白既存在于KYSE150细胞分离纯化后的细胞质中,也存在于分离出的线粒体中。结论 MYH9在食管癌细胞内部分分布于线粒体中,并与线粒体相关蛋白SLP-2相互结合。MYH9可能影响食管癌细胞线粒体的功能。

MYH9在肝细胞癌中的临床意义及生物学功能研究

目的:检测非肌性肌球蛋白重链9(non-muscle myosin heavy chain 9,MYH9)在人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及对HCC细胞迁移侵袭能力的影响。方法:收集2013年1月1日至2014年1月1日间于我院肝胆外科行手术切除的65例HCC及对应癌旁组织,q RT-PCR检测MYH9的m RNA水平,免疫组织化学染色检测组织中MYH9的蛋白表达水平,分析MYH9蛋白表达与肿瘤临床特征间的相关性。采用si RNA敲低MHCC-97H细胞中MYH9的表达分别采用划痕愈合试验及Transwell侵袭小室检测沉默MYH9之后MHCC-97H细胞迁移及侵袭能力的变化。结果:MYH9在HCC组织中表达水平均明显高于对应癌旁组织;HCC组织中MYH9高表达与肿瘤数量(≥2个)及高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期)显著相关;si RNA可明显降低MHCC-97H细胞中MYH9的表达水平;下调MYH9表达能够明显抑制MHCC-97H细胞的迁移及侵袭能力。结论:MYH9在肝细胞癌组织中表达上调并与肿瘤恶性临床病理特征有关,下调MYH9能够通过抑制肝癌细胞的迁移及侵袭而实现抗肿瘤效应。