气相色谱法同时测定人血清中角鲨烯和5种非胆固醇类固醇的报告

目的:建立气相色谱-氢火焰离子化检测器同时测定人血清中角鲨烯及2,4-脱氢胆甾烷醇、7-烯胆甾烷醇、菜油固醇、豆固醇和β-谷固醇等5种非胆固醇类固醇的分析方法,为了解患者胆固醇代谢个体差异提供检测手段。方法:通过碱性醇溶液皂化、正己烷提取、硅烷化试剂衍生等步骤对血清样品进行前处理。选用以下条件检测:HP-5石英毛细管柱(30 m×0.32 mm×0.25μm);初始柱温150℃,保持3 min,程序升温速率30℃/min至250℃,再以5℃/min升至280℃,保持30 min;氢火焰离子化检测器(FID)温度290℃;进样口温度290℃;进样口压力:15 psi;不分流模式;进样1μL。结果:角鲨烯、2,4-脱氢胆甾烷醇、7-烯胆甾烷醇、菜油固醇、豆固醇和β-谷固醇的检出限分别为0.011 mg/dL,0.0058 mg/dL,0.018 mg/dL,0.0089 mg/dL,0.047 mg/dL,0.018 mg/dL;加标回收率分别为在95～102%之间,日内变异系数为0.98%～2.71%(n=5),日间变异系数为1.26%～5.83%(n=5)。结论:气相色谱-氢火焰离子化检测法可同时测定人血清中角鲨烯和5种非胆固醇类固醇,并具有良好的准确度和精密性,12h内的稳定性好,可用于患者胆固醇代谢个体差异分析。

气质联用法同时测定人血浆中4种非胆固醇类固醇含量

目的建立同时测定人血浆中植物固醇和胆固醇合成前体物质的气相色谱-质谱(GC-MS)定量分析方法,为研究患者胆固醇代谢提供检测手段。方法色谱柱为HP-5MS石英毛细管柱(30 m×0.25μm×0.25 mm),初始柱温200℃,保持2 min,程序升温15℃.min-1至280℃,保持30 min,不分流进样。血浆经碱性醇溶液皂化后用正己烷萃取,再用衍生化试剂(BSTFA+1%TMCS)衍生后进样,采用全扫描(Scan)定性,选择离子监测(SIM)内标法定量。结果胆固醇、2,4-脱氢胆固醇、7-烯胆固醇、菜油固醇、β-谷固醇线性关系良好,日内日间精密度均分别小于7.9%与9.8%,加样回收率分别在89.5%～106.3%之间。应用本方法分别测定20名高血脂患者中非胆固醇类固醇的含量,其中2,4-脱氢胆固醇的含量为(0.39±0.08)mg.L-1,7-烯胆固醇的含量为(3.41±0.83)mg.L-1,菜油固醇的含量为(3.12±0.53)mg.L-1,β谷固醇的含量为(4.22±0.67)mg.L-1。结论 GC-MS法可同时测定人血浆中4种非胆固醇类固醇含量,并具有良好的准确度与精密性,适用于患者胆固醇代谢个体差异的分析。