急性驰缓性麻痹病例中非脊灰肠道病毒感染者的流行病学与临床特征研究

[目的 ]探讨急性弛缓性麻痹 (AFP)病例中非脊髓灰质炎病毒 (NPEV)感染者的流行病学和临床特征。 [方法 ]采集 1993～ 1998年河北省发生的AFP病例的粪便标本 ,以常规方法进行病毒分离 ,对其中NPEN感染者进行流行病学调查和临床观察。 [结果 ]在 14 77例AFP病例中分离到NPEV 2 0 8株 ,年平均分离率 14 0 8%。在 2 0 4例NPEV感染者中 ,5岁以下儿童占 82 35 % (16 8/ 2 0 4) ,发生在 6、7、8、9月分别为 2 5、45、35、2 5例。主要临床表现为麻痹开始时发热 42 16 % (86 / 2 0 4) ,肌肉疼 2 5 0 0 % (5 1/ 2 0 4) ,麻痹发展到高峰时间 <4d者 71 0 8% (14 5 / 2 0 4) ,残留麻痹者 13 73 % (2 8/ 2 0 4)。 [结论 ]NPEV感染在河北省分布广泛。AFP病例中NPEV感染集中在夏秋季 ,主要发生在小年龄组人群。临床表现一般不会与脊灰混淆 。

山东省急性弛缓性麻痹病例非脊髓灰质炎肠道病毒感染监测分析

[目的 ]了解山东省急性弛缓性麻痹 (AFP)病例非脊灰肠道病毒 (NPEV)的感染情况。 [方法 ]按照WHO规定的方法 ,对山东省 1 998～2 0 0 1年所有AFP病例的大便标本均采用RD、Hep 2和L2 0B细胞进行病毒分离鉴定。 [结果 ]共分离出 1 4 6株NPEV ,其中艾柯 (Echo)病毒占 56 1 6 % ,病毒型别分布广泛 ,夏秋季为NPEV流行高峰 ;5岁以下儿童分离率最高 ;多数NPEV感染者麻痹前均伴有发热、腹泻、颈项强直和肌肉疼痛 ,麻痹部位以单下肢、双下肢、四肢麻痹为主 ,发病60d后随访 2 7 40 %的病例仍残留麻痹 ;1 4 6例NPEV阳性的AFP病例中 ,疫苗相关病例 (VAPP) 1例 ,格林巴利综合征(GBS) 60例 ,脑脊髓炎 1 0例 ,其他非脊灰病例 75例 ;RD细胞对NPEV的分离率高于Hep 2细胞的分离率。 [结论 ]NPEV在山东省AFP病例中具有较高的感染率 。

贵州省急性弛缓性麻痹病例非脊髓灰质炎肠道病毒感染监测分析

目的了解贵州省急性弛缓性麻痹(AFP)病例非脊灰肠道病毒(NPEV)的感染情况。方法按照WHO规定的方法,对贵州省2004-2005年所有AFP病例的大便标本均采用RD、Hep-2和L20B细胞进行病毒分离鉴定。结果共分离出55株NPEV,其中艾柯(Echo)病毒占45.5%,病毒型别分布广泛,夏秋季为NPEV流行高峰;≤5岁儿童分离率最高。发病60d后随访23.6%的病例仍残留麻痹;55例NPEV阳性的AFP病例中,临床诊断以格林巴利综合征(GBS)13例,创伤性神经炎13例,不明原因瘫痪11例,单神经炎7例所占比例较高;RD细胞对Echo病毒敏感,Hep-2细胞对CoxB病毒敏感。结论 NPEV在贵州省AFP病例中具有较高的感染率,在无脊灰证实以后应加强NPEV感染与AFP病因学的研究。

1993～1996年美国非脊髓灰质炎肠道病毒感染的监测

在美国,每年约有3千万非脊髓灰质类（非脊灰）肠道病毒感染引起的无菌性脑膜炎、手足口病和非特异性上呼吸道感染等疾病。从93年1月～96年12月,国家公共卫生实验室向CDC报告了3209株非脊灰肠道病毒的分析结果,报告脑水、咽拭子、粪便三阳性的病毒分离结果,从93年的25个降至96年的12个。在93～96年间报告的3209株非脊灰肠道病毒中,埃可病毒（ECHO）9是最常见的血清型（12.7%）,其余依次为柯萨奇病毒（Cox）B5（11.5％）、ECHO30（9.5％）、COXA9（6.6%）、COXB2（6.2％）、ECHO6（5.1％）和ECHO11（4.5%）;另有67株（3.8％）已知的血清型未列出。分离到病毒最多的标本分别为CSF（25.3%）、鼻咽拭子（17.6％）和粪便（14.1%）。对分离到肠道病毒的患者而言,初步的临床诊断包括无菌性脑膜炎（12.9％）、脑炎（3.7％）。

2017-2021年宁夏急性驰缓性麻痹病例监测系统非脊灰肠道病毒病原鉴定分析

为了解宁夏急性驰缓性麻痹病例中(acute flaccid paralysis,AFP)非脊灰肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)的流行,本研究对宁夏2017-2021年急性驰缓性麻痹病例监测中分离到的NPEV进行型别鉴定和基因进化分析。按照监测方案要求采用RD细胞和L20B细胞分离病毒,分离到的病毒进行VP1区的全部核苷酸序列测定、基因型别鉴定分析、系统发生学分析。2017-2021年共收到969份粪便标本,其中AFP病例标本290份,密接者标本679份。从969份标本中共分离到55株NPEV,AFP病例中分离率6.16%(9/146,以例计),密接者人群分离率6.7%(46/679)。其中53株鉴定成功,分别属于人肠道病毒HEV-A、HEV-B、HEV-C组,包含16个血清型别,其中HEV-A组24株(45.2%),5个血清型,以EV-A71、CVA10、coxsackieviruses (CV)CVA4、为主;HEV-B组28株(54.7%),10个血清型,以echoviruses(ECHO)30、CVB5、CVB3为主,HEV-C组1株为CVA24,未分离到D组人肠道病毒。宁夏地区非脊灰肠道病毒存在A组和B组肠道病毒共同循环,肠道C组较少见,每年流行的优势血清型不同。

肠道病毒感染的急性弛缓性麻痹病例流行病学特征分析

目的 分析河北省 1997～ 1999年AFP病例中肠道病毒监测结果。方法 组织培养病毒分离法。结果 河北省1997～ 1999年AFP病例中分离到的 47株脊灰病毒 ,经型内特征鉴定 ,均为疫苗病毒 ;分离到NPEV 80株 ,占AFP病例病毒分离数的 6 3% ,在明确型别的毒株中 ,有coxsackieA组 1个型别 ;coxsackieB的 5个型 ,以coxsackieB1常见 ,有ECHO的 10个型别 ,ECHO15型在 3个年度中都有分离。NPEV有明显的夏秋季高峰 ,主要发生在小年龄组人群 ;在年龄构成上以小年龄人群为主 ,5岁以下儿童的感染占 77 5 % ,2岁以内的占5 6 %。各种病毒感染均男性多于女性。有 13 3%的coxsackieB以及 2 2 2 %的ECHO感染者还在发病后 6 0天残留麻痹。结论 肠道病毒感染较普遍 ,并能引起麻痹 ,但与脊灰不易混淆。

云南省2006～2010年非脊灰肠道病毒分子流行病学特征分析

为了解云南省非脊髓灰质炎(脊灰)肠道病毒(NPEV)的基因型分布及分子进化特征,对2006～2010年间从急性迟缓性麻痹(AFP)病例中分离到的105株NPEVs进行VP1区部分核苷酸扩增和序列测定。所获得的云南地方株基因序列与各基因型原型株进行核苷酸与氨基酸同源性比较,并与GenBank中选取的代表株构建基因进化关系树。结果分析显示:105株NPEVs分别属于HEV-A、HEV-B、HEV-C,其中HEV-A 18株(7个血清型)所占比例为17.1%;HEV-B 77株(22个血清型)所占比例为73.3%,表明云南省AFP病例中流行的NPEV还是以HEV-B为主;HEV-C 10株(4个血清型)所占比例为9.5%;没有分离到HEV-D组肠道病毒;基因进化树中各种血清型病毒与对应原型株及代表株聚集一起,除CA2、EV90和EV76外,云南地方株与原型株位于不同分支。相同型别的毒株在5年的流行过程中变异程度亦不同,亲缘关系远近不一,表明这些病毒在云南省存在不同的传播链。

2012～2016年宁夏急性驰缓性麻痹病例监测系统中非脊灰肠道病毒病原鉴定分析

对宁夏2012～2016年急性驰缓性麻痹(Acute flaccid paralysis,AFP)病例监测中分离到的非脊灰肠道病毒(Non-polio enterovirus,NPEV)进行血清型别鉴定和基因特征分析。采用RD和L20B两种细胞对采集自AFP病例及其接触者的粪便标本进行病毒分离,分离获得的毒株使用肠道病毒简并引物进行全长VP1区基因扩增、核苷酸序列测定、基因型别鉴定和基因系统发生学分析。2012～2016年共收集959份粪便标本,其中采自AFP病例粪便标本426份,密接者粪便标本533份,分离到67株NPEV,除4株未鉴定出型别外,共鉴定出23个肠道病毒血清型,其中A组肠道病毒(EV-A)23株(36.51%),包括7个血清型,以CV-A4(12.69%)、CV-A8(6.35%)和EV-A71(6.35%)为主;B组人肠道病毒(EV-B)40株(63.5%),包括17个血清型,以CV-B组4、2和3为主,分别占11.11%、9.52%和7.93.%,未鉴定出C组和D组人肠道病毒。宁夏2012～2016年从AFP病例及密接者标本中分离到的NPEV以EV-B组为主要型别,占63.49%,随着时间的推移一些主要流行的血清型别发生了变化。

云南省2007-2010年急性迟缓性麻痹病例和健康儿童中非脊灰肠道病毒的比较研究

目的对2007-2010年云南省急性迟缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例和健康儿童中非脊灰肠道病毒(non-polio enterovirus,NPEV)的分离情况进行比较,分析引起AFP的主要病原并对分离到的病毒基因特征进行分析。方法对云南省2007-2010年AFP病例粪便样本和<15岁健康儿童粪便样本进行病毒分离和基因测序定型,对两类人群中的病毒分离状况进行比较。结果 2007-2010年共从931例AFP病例粪便样本中检测到NPEV 63株,分离率为6.8%(63/931),其中肠道病毒A组(enterovirus A,EV-A)12株,占19.1%(12/63),肠道病毒B组(EV-B)46株,占73.0%(46/63),肠道病毒C组(EV-C)5株,占7.9%(5/63);从1 256份健康人群粪便样本中分离到NPEV 115株,分离率为9.2%(115/1256),其中EV-A 5株,占4.4%(5/115),EV-B 101株,占87.8%(101/115),EV-C 9株,占7.8%(9/115);在两组人群中均未分离到肠道病毒D组(EV-D)病毒。对两组人群中常见病毒的基因进化分析表明,这些病毒具有基因多样性特点。结论云南省2007-2010年连续4年的监测表明,AFP病例中EV-A组病毒和EV-C的分离率(19.1%和7.9%)均高于健康人群(4.3%和7.8%),而健康人群中EV-B组病毒阳性率(87.8%)高于AFP病人(73.0%),EV-A组病毒和EV-C组病毒可能是引起AFP的主要病原。基因进化分析表明,云南省EV-B组病毒中的某些病毒可分为2~5个不同的进化分支(Cluster),具有基因多样性特点。

2013-2020年重庆市急性弛缓性麻痹病例非脊灰肠道病毒分离株分型鉴定分析

目的对2013—2020年期间从重庆市急性弛缓性麻痹病例(acute flaccid paralysis,AFP)中分离到的53株(non-polio enterovirus,NPEV)进行分型鉴定,了解NPEV型别分布特点。方法使用商品化荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,real-time PCR)试剂对NPEV快速鉴定,结合VP1区和VP4区核苷酸序列特征进行分型。结果鉴定出50株肠道病毒,A组33株(66.00%),B组17株(34.00%),不包含C、D组肠道病毒,3株不能分型。EV-A71为优势型别,11株(22.00%),2016年及以后未分离到EV-A71。研究中,VP4区和VP1区序列在NPEV分组上完全一致。结论使用商品化荧光定量PCR试剂对肠道病毒分型时,高CT值的鉴定结果有可能不准确。NPEV分型中,先使用VP4区序列进行分组,然后在使用VP1区进行基因分型,可简化实验流程。重庆市AFP病例NPEV分离株的型别多样性较差,为丰富和完善重庆市肠道病毒基因数据库,有必要开展呼吸道传播的肠道病毒相关研究。

青海省1996～1999年脊髓灰质炎病毒学监测

目的 掌握消灭脊灰工作进展情况和不同人群中脊灰野病毒的消亡状态 ,为制定有效免疫策略提供依据。方法 在 1996～ 1999年所有AFP病例和AFP病例密切接触者、重点地区 5岁以下健康儿童中 ,采集粪便标本 776份检测脊灰病毒 ,应用 2种以上敏感传代细胞培养 ,用基因序列分析方法判断病毒型别。结果 共检测脊灰病毒 2 4株 ,非脊灰肠道病毒 81株 ,分离率分别为 3 0 9%与 13 5 3% ,经国家脊灰实验室和美国CDC最终鉴定 :脊灰野病毒Ⅰ型 2株 ,与印度 1998年Ⅰ型野病毒符合率 >98% ,判定为由印度传入野病毒 ,其它脊灰病毒均为疫苗病毒。结论 1994年以来全省无本土脊灰野病毒流行 ,各项监测指标达到和接近国家要求 ,证实我省已阻断本土脊灰野病毒传播 ,达到无脊灰标准。传入野病毒的及时发现 ,反映出AFP病例监测系统敏感性和及时性较高 。

浙江省急性驰缓性麻痹相关肠道病毒鉴定分析

目的对浙江省2006-2008年急性弛缓性麻痹病例(AFP)中的非脊灰肠道病毒(NPEV)分离株进行分子生物学分型鉴定。方法采用简并引物和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),对31株非脊灰肠道病毒分离株进行目的基因片段扩增,然后测定序列,将测定的结果与GenBank进行BLAST比较分析,运用DNAMAN软件进行同源性分析,并构建基因树。结果31株非脊灰肠道病毒分离株经分子生物学分型,其中人类肠道病毒(HEV)-A组5株,有2个血清型;HEV-B组24株,有13个血清型;HEV-C组2株,有1个血清型。结论浙江省2006-2008年分离到的非脊灰肠道病毒以HEV-B组为主。

2004-2007年重庆市急性弛缓性麻痹病例监测结果分析

目的评价重庆市2004-2007年急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测运转情况。方法按照脊髓灰质炎实验室手册操作规程进行病毒分离与鉴定,由国家脊灰实验室用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法和ELISA法对分离到的脊灰病毒株进行型内鉴定。结果从395例AFP病例粪便标本中分离到脊灰病毒(PV)12株,其中脊灰Ⅰ型1株,Ⅱ型4株,Ⅲ型4株,PV混合1株,PV+NPEV(非脊灰肠道病毒)混合2株,所有PV经国家脊灰实验室进行型内鉴定,均为疫苗相关株,未发现疫苗衍生脊灰病毒株(VDPV)。分离非脊灰肠道病毒(NPEV)27株。结论重庆市2004-2007年急性驰缓性麻痹病例中未发现脊灰野病毒和疫苗衍生脊灰病毒(VDPV)株存在,且AFP病例监测系统的各项监测指标都达到控制标准,表明重庆市脊灰实验室监测质量稳定,今后更要继续加强实验室的监测,保持整个监测过程的高度敏感性。

江西省2013年至2015年急性弛缓性麻痹病例病原学监测分析

目的通过对江西省2013年至2015年急性弛缓性麻痹病例病原学监测,为证实江西省消灭脊髓灰质炎提供准确的、可靠的科学依据。方法采用L20B、RD细胞继续脊髓灰质炎病毒分离,脊髓灰质炎毒株通过ITD方法进行型内鉴定,若为复合型毒株再经过血清中和实验分单型后,送至国家脊髓灰质炎实验室进行序列测定。结果 2013年至2015年共接收1058份AFP病例粪便标本,其中有28份分离出脊髓灰质炎病毒,83份分离出非脊髓灰质炎肠道病毒,分离率分别为2.65%,7.84%;接收AFP病例接触者粪便标本57份,分离出脊灰病毒2份和非脊灰肠道病毒7份,平均分离率分别为3.51%,12.28%;在2013年分离出一例疫苗衍生株病例,未发现脊灰野病毒。结论江西省脊髓灰质炎病毒学监测处于较高的水平,江西省2013年至2015年急性弛缓性麻痹病例病中未发现脊灰野病毒,但检出VDPV,提示我们要警惕疫苗株的变异,应继续加强监测。

重庆市2003年急性弛缓性麻痹病例监测分析

目的 评价重庆市2 0 0 3年急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测系统运转情况。方法 用细胞培养法对2 0 0 3年报告的98例AFP病例粪便标本进行脊灰和非脊灰肠道病毒的分离鉴定。结果 重庆市2 0 0 3年急性弛缓性麻痹病例监测系统共报告AFP病例98例。合格粪便标本采集率为85 .39% ,粪便标本7d内送脊灰实验室的及时率为94 .38%。粪便标本2 8d内完成病毒分离鉴定的及时率为10 0 %。分离出脊灰病毒(PV) 5株,其中Ⅰ型2株,Ⅱ型1株,混合型(Ⅰ+Ⅲ) 2株,非脊灰肠道病毒(NPEV) 5株。所有PV阳性毒株经中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所国家脊灰实验室鉴定,均为疫苗株。结论 AFP病例监测系统的各项监测指标均达要求。今后应继续加强AFP病例监测和外来流动人口管理工作,直至在全世界范围内消灭脊灰。

江苏省急性弛缓性麻痹病例病原学监测

目的掌握江苏省脊灰和非脊灰肠道病毒血清型别以及脊灰病毒的基因型别,确认其是否野毒株,为维持无脊灰状态提供病毒学依据。方法对2005-2013年江苏省急性弛缓性麻痹病例(AFP)监测数据进行分析,由国家脊灰实验室对脊灰病毒株进行型内鉴定。结果 2005-2013年江苏省脊灰实验室共收到AFP病例粪便标本2 413份,AFP病例接触者粪便标本252份。AFP病例中分离到脊灰病毒86株,年均分离率3.56%,分离到非脊灰肠道病毒163例,年均分离率6.76%;AFP病例接触者中分离出脊灰病毒12例,年均分离率4.76%,分离出非脊灰肠道病毒22例,年均分离率8.73%。未发现脊灰野病毒和疫苗衍生脊灰病毒。结论江苏省脊灰实验室为WHO和国家脊灰实验室盲样标本能力验证和现场认证评估合格实验室,细胞系敏感性均达到WHO要求,本监测数据可为继续保持无脊灰状态提供病毒学依据。

贵州省2006-2010年脊髓灰质炎实验室监测与评价

目的分析贵州省脊髓灰质炎(脊灰)实验室监测数据,评估运转情况,为贵州省继续维持无脊灰状态提供实验室数据。方法采用病毒分离、鉴定与核苷酸序列分析的方法,对贵州省2006-2010年报告的急性弛缓性麻痹(AFP)病例、接触者及其他人群粪便标本进行病毒学检测和结果分析。结果 2006-2010年贵州省脊灰实验室共收到2 204份AFP病例粪便标本,332份AFP病例接触者粪便标本,310份其他人群粪便标本。从AFP病例中分离到非脊灰其他肠道病毒(NPEV)209株,脊灰病毒(PV)54株;从AFP病例接触者中分离到NPEV33株,PV6株;其他人群中分离到NPEV27株,PV9株。所有PV阳性分离物均送到国家脊灰实验室进行型内鉴定,全部为疫苗相关株。贵州省脊灰实验室每次均通过WHO和国家脊灰实验室的能力验证和现场认证评估。结论 2006-2010年贵州省脊灰实验室监测系统运转正常,未发现脊灰野病毒(WPV)或疫苗衍生脊灰病毒(VDPV)。贵州省继续保持无脊灰状态。