浙江省2004～2007年急性驰缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒分析

目的：对浙江省2004～2007年急性弛缓性麻痹病例（AFP）粪便标本中分离到的非脊髓灰质炎肠道病毒（NPEV）进行监测结果分析。方法：按照WHO规定的方法,用RDa和L2OB细胞对AFP患者的粪便标本进行病毒分离,对分离到的NPEV毒株进行型别鉴定。结果：4年共分离到44株NPEV,分别为柯萨奇A组病毒1株（COXA4）,埃可病毒（ECHO）28株,不能定型15株。结论：浙江省2004年～2007年分离到的NPEV中主要为ECHO病毒,未分离到COXB组株病毒,且NPEV感染有明显的夏秋季高峰,主要集中在小年龄组儿童。

2013年贵州省急性弛缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒的鉴定分析

目的研究2013年贵州省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例中非脊髓灰质炎肠道病毒(nonpolio enterovirus,NPEV)的基因型别,并对分离的柯萨奇病毒A4型(coxsackievirus,CVA4)进行基因特征分析。方法 2013年贵州省共报告15岁以下AFP病例235例,采用RD细胞和L20B细胞对235例AFP病例粪便标本进行病毒分离,对分离到的NPEV进行VP1基因序列测定分型。通过MEGA7.0软件采用邻位相接法(neighbor joining method)构建遗传进化树进行基因特征分析,可靠性通过1 000bootstrap值评估。结果 235例AFP病例中共检测到24株NPEV(10.2%),有2株无法定型,另外22株共包括12个血清型,其中人类肠道病毒(human enterovirus,HEV)A组包括4个血清型6株,其中3株为CVA4,均属于C2基因亚型;HEV-B组包括7个血清型15株,1株为HEV-C组,未分离到HEV-D组病毒。结论 2013年贵州省AFP病例病原谱包括多种型别的NPEV,其中CVA4基因特征分析表明2013年贵州地区流行的CVA4毒株为C2基因亚型。

海南省儿童非脊髓灰质炎肠道病毒感染的研究

目的 为了解海南省儿童非脊髓灰质炎肠道病毒 (NPEV)的感染状况 ,为我省今后进一步研究肠道病毒对人类健康的影响提供本底资料。方法 采集不同组群儿童粪便标本 ,采用WHO提供的RD、HEP -2、L2 0B细胞进行病毒分离和鉴定 ,并对结果进行比较分析。结果 对 1994～ 2 0 0 1年采集的 10 2 6例儿童的粪便标本进行病毒分离和鉴定 ,NPEV分离率为 19.79% ,其中急性弛缓性麻痹 (AFP)病例组NPEV分离率最高 ,为 2 6.5 8% ,密切接触者和健康儿童中粪便标本的NPEV分离率分别为 17.37%和 2 0 .41% ,AFP病例与接触者NPEV分离率有显著性差异 (x2 =9.468,P <0 .0 1)。不同组群儿童感染的NPEV型别差异较大。不同型别NPEV毒株在海南省AFP病例、AFP接触者和健康儿童中感染的机率有所差别。有些型别的NPEV在三组儿童中都有循环 ,但有些型别的NPEV毒株仅从AFP病例或其接触者中分离到。结论 在我国实现消灭脊髓灰质炎的目标后 ,开展儿童NPEV感染状况的研究能为进一步证实和巩固消灭脊灰成果提供科学依据 。

广西急性弛缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒感染分析

目的了解广西2003～2009年非脊髓灰质炎(脊灰)肠道病毒(NPEV)病例流行病学情况,为控制NPEV感染提供科学依据。方法按照WHO要求对AFP病例进行病毒分离与鉴定并对其流行病学特征进行分析。结果从1 851例AFP病例中检出NPEV 206株,分离率为11.13%。NPEV感染病例分布于全区各市县,无地区聚集性,有明显季节性,3岁以下儿童占78.8%,男性高于女性,临床诊断以短暂性肢体麻痹为主。结论 NPEV在广西AFP病例中具有较高的感染率,加强对其基因型别的研究,为AFP病例的诊断、治疗、预防措施提供依据。

2002～2005年河北省非脊髓灰质炎肠道病毒感染的急性弛缓性麻痹病例分析

[目的]了解急性弛缓性麻痹(AFP)病例中非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV)感染情况,为有效控制NPEV感染所致麻痹提供科学依据。[方法]对河北省2002～2005年NPEV感染的AFP病例的流行病学、病毒学及临床特征进行分析。[结果]2002～2005年15岁以下儿童AFP病例监测系统合计报告病例1645例,其中1629例采集了粪便标本,169例分离到NPEV,年平均分离率为10.4%。169例病人主要分布在河北省中南部地区,5～10月发病者占76.3%,<5岁儿童占80.5%;诊断为格林-巴利综合征(GBS)的占32.5%,NPEV感染的占36.1%。已定型的54株NPEV毒株中型别较多的有CoxB5、CoxB3、CoxA9、ECHO14和ECHO25。[结论]应加强对NPEV感染导致麻痹的控制工作。

贵州省2012年急性弛缓性麻痹病例非脊髓灰质炎肠道病毒分型鉴定分析

目的运用分子生物学检测方法对从贵州省2012年AFP(Acute Flaccid Paralysis)病例中分离到的30株非脊灰肠道病毒进行分型鉴定。方法采用简并引物RT-PCR对分离株进行VPl区基因扩增和序列测定,测序结果进行BLAST比较和基因进化分析。结果序列分析结果表明,30株NPEV中,有4株无法扩增VP1基因,另外26株共包括11个血清型。包括EV71、ECHO6、COXA4、EV96、ECHO14、COXA10、ECHO25、ECHO13、ECHO11、COXB5、COXB4。其中EV71有6株,所占比例最高。ECHO6、COXA4各3株,EV96、ECHO14、COXA10、ECHO25、ECHO13、ECHO11各2株,COXB5、COXB4各1株。结论贵州省2012年AFP病例的病原谱可能包括多型别的NPEV。

1993～1996年美国非脊髓灰质炎肠道病毒感染的监测

在美国,每年约有3千万非脊髓灰质类（非脊灰）肠道病毒感染引起的无菌性脑膜炎、手足口病和非特异性上呼吸道感染等疾病。从93年1月～96年12月,国家公共卫生实验室向CDC报告了3209株非脊灰肠道病毒的分析结果,报告脑水、咽拭子、粪便三阳性的病毒分离结果,从93年的25个降至96年的12个。在93～96年间报告的3209株非脊灰肠道病毒中,埃可病毒（ECHO）9是最常见的血清型（12.7%）,其余依次为柯萨奇病毒（Cox）B5（11.5％）、ECHO30（9.5％）、COXA9（6.6%）、COXB2（6.2％）、ECHO6（5.1％）和ECHO11（4.5%）;另有67株（3.8％）已知的血清型未列出。分离到病毒最多的标本分别为CSF（25.3%）、鼻咽拭子（17.6％）和粪便（14.1%）。对分离到肠道病毒的患者而言,初步的临床诊断包括无菌性脑膜炎（12.9％）、脑炎（3.7％）。

非脊髓灰质炎肠道病毒

非脊髓灰质炎肠道病毒普遍分布在世界各地。虽然感染后通常无症状而被忽略,但是这些病毒偶然也会引起暴发,导致数量比平常更多的病人发展为临床病例,甚至死亡。1 临床综合征 非脊髓灰质炎肠道病毒首先在肠道或呼吸道里复制,当它一旦进入到血液,感染就可累及全身各个组织和器官,导致多种疾病。大多数的感染为无症状或表现轻微。

非—脊髓灰质炎肠道病毒

非-脊髓灰质炎肠道病毒是在全世界范围内普遍存在的。受感染的病人通常没有什么后遗症。然而，这些病毒偶然也能引起可以鉴别的爆发，高于平常数字的病人发生临床上可以辨别的疾病，其中一些病例可造成死亡。

新疆维吾尔自治区2013-2022年环境污水脊髓灰质炎病毒监测

目的了解新疆环境污水中脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Poliovirus,PV)和维持无脊灰状态。方法选取新疆3个城市污水处理厂,2013年4月-2022年12月每月各采集1份污水标本,采用RD和L20B细胞分离PV,采用rRT-PCR对PV分离株进行型内鉴定和VP_(1)区核苷酸序列测定。结果2013-2022年共采集环境污水327份,肠道病毒分离阳性305份(93.3%);共分离到PV 2461株、非脊灰肠道病毒950株。在PV分离株中,Ⅰ型666株、Ⅱ型450株、Ⅲ型1345株;除2018年1株为Ⅱ型疫苗衍生脊灰病毒(Vaccine derived poliovirus,VDPV)、2020年1株为Ⅰ型VDPV外,其余分离株均为疫苗株。结论新疆环境污水中PV分离株主要为疫苗株,未发现脊灰野病毒;环境PV监测为新疆继续维持无脊灰状态提供了实验室依据。

2018-2021年广州市环境污水脊髓灰质炎病毒和其他肠道病毒监测

目的 了解广州市环境污水中脊髓灰质炎病毒(Poliovirus, PV)和非脊髓灰质炎肠道病毒(Non-polio enterovirus, NPEV)现状。方法 选择广州市某污水处理厂于2018-2021年每月采集环境污水样本,进行PV和NPEV分离和血清型鉴定,分析血清型构成。结果 在2018-2021年192份环境污水样本中共分离到299株PV和505株NPEV。在PV分离株中,PV1、PV2、PV3血清型分别为80株(26.76%)、0株(0.00%)、219株(73.24%);1株PV3为疫苗衍生PV(Vaccine-derived poliovirus, VDPV),其他均为疫苗株,其中3株PV3和1株PV1为疫苗高变异PV(Vaccine hypervariable poliovirus, VHPV)。在NPEV分离株中,E11、CVB5和CVB3血清型分别为210株(41.58%)、88株(17.43%)和88株(17.43%)。结论 2018-2021年广州市环境污水中未发现野生型PV和PV2血清型,NPEV优势血清型为E11、CVB5和CVB3。

2015年云南省急性弛缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒的鉴定分析

目的：了解2015年云南省急性弛缓性麻痹（ acute flaccid paralysis, AFP）病例中非脊髓灰质炎肠道病毒（ non-polio enterovirus, NPEV）的携带情况,并对分离的肠道病毒71型（ enterovirus 71, EV71）作基因特征分析。方法2015年云南省疾病预防控制中心共报告213例15岁以下AFP病例,对213例AFP标本进行病毒分离,分离到的NPEV进行VP1区基因分型。用SPSS22.0软件对云南省近5年AFP病例的NPEV分离率进行比较,并应用MEGA6.06软件对分离到的EV71与其基因库代表株进行进化树分析和作图。进化树用临位相接法（ neighbor joining method）做成,所用模式为Kimura二参数置换法（ Kimura 2-parameter substitution model）。用1000个pseudo replicate datasets进行进化树bootstrap统计学分析。结果213例AFP病例中共检测到23株NPEV,其中7株为人肠道病毒A组（2个血清型,其中6株为EV71,均属于C4亚型）,14株为人肠道病毒B组（8个血清型）,2株为人肠道病毒C组,未分离到人肠道病毒D组病毒。云南省近5年AFP病例中NPEV分离率比较的统计检验结果为P=0.101,差异无统计学意义。结论2015年云南省AFP病例中NPEV携带率与往年持平,EV71基因特征分析表明云南省流行的EV71仍然是C4亚型。

云南省1997-2000年及2004年非脊髓灰质炎肠道病毒分子生物学及流行特征分析

目的描述云南省1997-2000年及2004年5年的肠道病毒（EV）分离状况及型别特征。方法5年在急性迟缓性麻痹病例中共检测到210株非脊髓灰质炎（脊灰）肠道病毒（NPEVs）,其中12株经血清学鉴定为腺病毒。剩余198株经基因测序定型,即病毒VP1区基因序列转变为氨基酸序列后与标准株进行比较。结果经分子生物学定型：人类EV-A组5株（5个血清型）、EV-B组158株（34个血清型）、EV-C组32株（6个血清型）、未分离到EV-D组病毒。在急性迟缓性麻痹病例监测中,210个分离株,EV-B组病毒占75．2%,为主要型别;EV-C组占12．2%,腺病毒占5．7%,EV-A组占2．4%。结论云南省EV的流行中,以EV-B组较多。

2011-2012年河北省急性弛缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒血清型的分布

为了解2011～2012年河北省急性弛缓性麻痹（Acute flaccid paralysis，AFP）病例中非脊髓灰质炎肠道病毒（Non-polio enterovirus，NPEV）的血清型分布，探讨这些病毒与AFP的关系，本研究按照世界卫生组织要求，对河北省AFP病例粪便标本利用人横纹肌肉瘤（Human rhabdomyosarcoma，RD）细胞和转人脊髓灰质炎病毒受体的小鼠肺（Mouse cell line expressing the gene for the human cellular receptor for poliovirus，L20B）细胞进行病毒分离。筛检出NPEV毒株后，进行VP1区核苷酸序列测定，使用分子定型方法对NPEV进行血清型别鉴定。结果显示，在2011-2012年AFP病例中分离到的82株NPEV中共鉴定出A组人肠道病毒（HEV-A）42株（55．3％），包含4个血清型；B组人肠道病毒（HEV-B）34株（44．7％），包含13个血清型别，未鉴定出c组和D组人肠道病毒。另外还有2株腺病毒，4株未定型NPEV。HEV—A组中又以肠道病毒71型（EV-A71）为主要型别，在HEV-A中比例高达85．7％。2011-2012年河北省AFP病例中分离到的NPEV以HEV-A居多，尤其是EV-A71，为AFP病例中的优势毒株。

2015-2018年上海市环境污水中非脊髓灰质炎肠道病毒的分布及柯萨奇病毒B5的分子特征

目的分析2015-2018年上海市闵行区和嘉定区环境污水监测中非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV)的分布特征,探讨环境污水、健康儿童和急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测中柯萨奇病毒B组5型(Cox B5)分离株之间的关系和变迁规律。方法选择上海市闵行区和嘉定区污水处理厂作为长期固定监测点,每月采集监测点的污水进行浓缩富集,取上清液并接种于人横纹肌肉瘤细胞(RD)和人喉癌上皮细胞(Hep-2)进行病毒分离。通过反转录–聚合酶链式反应(RT-PCR)获得VP1区序列并进行分析。结果 2015-2018年共采集污水样本84份,共分离242株NPEV,包含19个基因型,Cox B5为比例较高的基因型,占18.18%(44/242)。2015-2018年,环境污水、健康儿童和AFP病例监测中的Cox B5分离株形成2个基因型和3个传播链,即C3、C4和D3基因亚型。C3基因亚型在上海市属于优势基因亚型,而D3基因亚型是2016-2018年新出现的传播链。结论 2015-2018年上海市2个区环境污水中常见的优势基因型为ECHO11、Cox B5、Cox B3和ECHO6。Cox B5在环境污水、健康儿童和AFP病例中存在共循环现象。我国尚未建立完善的NPEV相关疾病监测系统,环境污水监测可作为病例监测的重要补充方法。

河北省1997～2002年急性弛缓性麻痹病例非脊髓灰质炎肠道病毒监测分析

河北省 1 997～ 2 0 0 2年急性弛缓性麻痹 (AFP)病例病毒学监测中 ,共有 2 0 2例分离到非脊髓灰质炎肠道病毒(NPEV) ,年均NPEV分离率 1 0 1 %。对分离到的NPEV毒株进行了型别鉴定 ,在明确定型的 1 0 3株NPEV中 ,包括柯萨奇病毒 (Coxsackievirus ,Cox )A组 1个型 ;Cox B组 5个型 ;埃可病毒 (ECHO) 1 4个型。RD细胞对ECHO和Cox A9敏感 ,HEp 2细胞对Cox B敏感。取消HEp 2细胞的使用 ,会造成多数Cox B和一些未能定型的NPEV漏检 ,使NPEV分离率明显降低。NPEV感染有明显的夏秋季高峰 ,主要集中在小年龄组儿童 ,以 1岁和 2岁为多。

浙江省1996～1999年急性弛缓性麻痹病例中非脊髓灰质炎肠道病毒分析

浙江省 1996～ 1999年急性弛缓性麻痹 (AFP)病例粪便标本中非脊髓灰质炎 (脊灰 )肠道病毒 (NPEV)的平均分离率为 11 2 %。在 6 7株NPEV中 ,柯萨奇病毒 (Coxsackievirus ,Cox )B组 2 1株 ,占 31 3% ;埃可病毒 (EntricCy topothicHumanOrphanviruses ,ECHO) 2 5株 ,占 37 4% ;不能确定型别 2 1株 ,占 31 3%。NPEV按月分布显示 ,Cox B病毒高峰期在 5～ 7月 ,在 1～ 3、10、12月未分离到 ;ECHO病毒全年均有 ,高峰期在 8～ 11月。Cox B病毒在Hep - 2、RD细胞上平均滴度分别为 10 7 2 和 10 4 6TCID50 /ml,ECHO病毒则分别为 10 3 1和 10 6 9TCID50 /ml。部分不能确定型别的病毒除了能在RD、Hep - 2细胞生长外 ,还能在L2 0B细胞上生长 ,其细胞病变与“腺病毒”相类似 ,但与脊灰病毒在L2 0B细胞上的细胞病变效应明显不同。

2001-2006年河北省急性弛缓性麻痹病例中非脊灰肠道病毒感染病例流行病学分析

目的了解河北省近几年非脊髓灰质炎(脊灰)肠道病毒(NPEV)病例流行病学特征,为有效控制NPEV感染提供有价值的基础资料。方法结合省脊灰实验室病原学监测结果,分析全省急性弛缓性麻痹(AFP)病例监测系统上报的个案调查表、随访表。结果2001-2006年AFP病例监测系统共报告病例2515例,其中2491例至少采集了1份粪便标本,从273例AFP病例中检出NPEV,平均分离率为11.0%。273例NPEV感染的AFP病例覆盖全省11个市,67.0%分布在该省中南部,有明显季节性高峰,5岁以下儿童占79.5%,男性高于女性,脊灰减毒活疫苗(OPV)全程免疫占89.0%,临床诊断为格林巴利(GBS)80例(29.3%);NPEV感染79例(28.9%)。结论从AFP病例中能检出一定量的NPEV,NPEV监测应逐渐整合到AFP病例监测系统中,加强NPEV感染导致儿童麻痹的控制工作。