非致病性尖镰孢FO47的原生质体融合改良研究

【目的】改良非致病性尖镰孢FO47的综合性状,获得具有较好防效的生防菌株。【方法】利用原生质体融合技术,将非致病性尖镰孢FO47和生防放线菌153进行融合,通过形态特征和菌落直径生长情况对融合菌株进行初筛,并采用西瓜苗期生长发育、防病效果和抗药性试验对所获得的初筛菌株进行复筛。【结果】筛选出14株菌落直径较FO47生长快的再生菌株,其中菌株F1-35、F1-38、F1-1和F1-41能够促进幼苗生长,菌株F1-35处理西瓜幼苗后单株鲜质量较FO47提高了36.93%,根长较FO47增加了19.07%。菌株F1-35、F1-38和F1-4对西瓜枯萎病的防治效果超过50%,其中菌株F1-35的防治效果最好,达到59.04%。菌株F1-4对多菌灵表现出较高的抗性,说明菌株F1-4可以与低质量浓度多菌灵混合使用防治西瓜枯萎病。【结论】筛选出3株综合性状得到提高的再生菌株,说明原生质体融合是改良生防菌株的有效手段。

高岭土、壳聚糖和几丁质作为Fo47菌剂填料的研究

从对菌体的保护作用、菌剂在土壤中的活菌量变化以及菌剂对西瓜枯萎病的防治效果与对西瓜幼苗的促生效果测定3个方面,研究高岭土、壳聚糖和几丁质作为生防菌非致病尖镰孢Fusarium oxysporum Fo47菌剂填料的可能性。结果表明,3种填料对生防菌Fo47具有一定的抗紫外线辐射作用和良好的热保护作用。在4℃条件下储存半年,各处理的活菌量是对照的100倍以上。在土壤中,3种填料对菌体均有良好的保护作用和一定的释放效果,其中壳聚糖和几丁质处理在施用60d内可增加土壤中菌体含量,说明其与菌体之间有良好的兼容性。3种菌剂对西瓜苗期枯萎病的防效分别为42.31%、65.39%和57.68%,均高于单纯Fo47菌体的防效;同时对西瓜幼苗均具有不同程度的促进生长发育的作用;其中,壳聚糖处理的菌剂防效与恶霉灵相当,其促生作用最好。表明高岭土、壳聚糖和几丁质作为生防菌Fo47菌剂的填料具有一定的应用前景。

京津冀设施大棚根际土壤中筛选出的防治根腐病的生防镰孢菌

由致病性尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum)引起的根腐病严重危害果蔬生产,但非致病性镰孢菌可作为潜在的生防菌。为筛选防治根腐病的非致病生防镰孢菌,从京津冀设施大棚采集茄科、葫芦科果蔬78份根际土样中分离2402株真菌,筛选出对致病性尖孢镰孢菌(F.oxysporum)具有拮抗效果的真菌173株。利用镰孢菌通用引物进行PCR扩增,从中筛选出28株候选镰孢菌;通过镰孢菌发酵液泡根进行安全性测试,筛选出对寄主黄瓜幼苗安全无害的镰孢菌菌株4株(1418、1441、1436和1473)。进一步通过镰孢菌测序通用引物TEF1αF/TEF1αR结合菌落和分生孢子的形态学特征,1418菌株和1441菌株被鉴定为尖孢镰孢菌(F.oxysporum)、1436菌株被鉴定为茄病镰孢菌(F.solani)。盆栽测试发现,除1441菌株外,1418菌株、1436菌株和1473菌株对黄瓜根腐病的防效均在50%以上,其中1418菌株的防效为70%,与杀菌剂咪酰胺的防效相当,具有很好的应用潜力。本研究筛选获得的具有生防潜力的镰孢菌不仅为镰孢菌致病力分化的研究提供了实验材料,也为新型生防产品的研制奠定了基础。