非融合型重组人骨唾液蛋白在毕赤酵母中的高效表达及纯化

通过正交设计对毕赤酵母GS115／pPICZαAN-hbsp工程菌的发酵条件（菌体密度、甲醇诱导浓度、初始pH值、诱导时间）进行优化。采用重组人骨唾液蛋白（recombinant human bone sialoprotein，rhBSP）单克隆抗体与Aldehyde-Resin HP FF介质偶联制备免疫亲和层析柱，纯化非融合型rhBSP，并用Western blotting和补体抑制实验检测非融合型rhBSP的抗原性和活性。毕赤酵母GS115／pPICZαAN-hbsp工程菌最佳发酵优化为：菌体密度OD600达到45甲醇诱导剂量为1．5％，pH值6．0，诱导时间2d，最大表达量为0．126mg／ml。经免疫亲和层析法纯化后，SDS-PAGE显示非融合型rhBSP为43～66ku的分散条带，纯度在90％以上，Western-blotting显示rhBSP具有良好的抗原性，补体实验证明纯化的非融合型rhBSP活性很好。毕赤酵母GS115／pPICZαAN-hbsp工程菌发酵条件经优化后能高效表达非融合型rhBSP，应用免疫亲和层析方法纯化的非融合型rhBSP纯度好，活性高，为进一步研究非融合型rhBSP打下了基础。

非融合型重组人白细胞介素-18的纯化及鉴定

目的 获得高纯度的重组人白细胞介素 18(rhIL 18)。方法 采用溶菌酶加超声破菌的方法抽提包涵体 ,以8mol/L尿素溶解包涵体 ,变性条件下以阴离子柱层析进行首步纯化 ,复性后再进行凝胶过滤层析。对纯化的样品进行了SDS PAGE、HPLC、N端氨基酸序列、免疫印迹及生物学活性分析。结果 rhIL 18在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在 ,所提取的包涵体中重组蛋白纯度可达到 80 %以上 ,包涵体经二步柱层析纯化后 ,HPLC分析纯度达 98%以上 ,SDS PAGE测定其分子质量约 19× 10 3 ,N端 15个氨基酸序列与预期一致 ,生物学活性分析证实纯化的rhIL 18具有诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)产生IFN γ的能力。结论 所建立的纯化rhIL 18的方法简便有效 ,为开展rhIL 18的结构活性关系研究及其大规模纯化打下了良好的基础。

非融合型横过异位肾1例

1病例资料 患者女性，40岁。主诉轻度颜面浮肿反复发作2年，尿色微红10d，患者于2004年3月份起病后，曾多次在门诊化验尿常规：蛋白＋，脓球＋-＋＋＋，偶见红细胞3～10个／高倍视野。按肾盂肾炎治疗，症状时好时发。体检：T37．5℃，P80次／分，BP120／70mmHg；

非融合型交叉异位肾萎缩无功能并巨输尿管一例

患儿男，2岁。因发现腹部包块半年入院。检查：生长发育正常，心肺未见异常，右腹部可及一巨大包块，约5cm×8cm×4cm，囊性，跨越中线，无触痛。实验室检查：血常规、尿常规、血尿素氮、肌酐均正常。B型超声：左肾缺如，左侧异位肾异位于右侧并发育不全，其中异位肾及输尿管积水，上界达剑突下，下界达盆腔，双侧输尿管开口正常。CT示：正常肾窝内左肾缺如，右侧腹部见团块状囊性密度影，

非完全融合型“区镇合一”发展策略研究——以武进国家高新区与其周边乡镇为例

随着开发区发展转型,开发区与周边地区融合发展趋势逐渐明晰。为促进开发区与乡镇地区一体化,近年来我国提出了"区镇合一"的新型发展模式。文章首先依据区镇管理体制的融合程度,将"区镇合一"分为完全融合与非完全融合两种类型,并通过论证认为出后者更具有普遍性。继而选取武进国家高新区与周边乡镇,这一典型非完全融合型区镇空间,分析其现状发展困境。最终提出管理协同、空间整合、产业联动、设施共建、生态共享多维度发展策略,以此推进区镇一体化的实施。

中医整脊联合针刺治疗腰椎间盘突出症非椎间融合型术后复发的疗效观察

目的观察中医改良整脊手法结合电针、刺络拔罐法治疗非椎间融合型腰椎间盘突出症手术后复发的疗效。方法将符合标准的86例患者随机分成治疗组与对照组各43例,治疗组采用中医整脊手法结合电针与刺络拔罐法治疗,对照组采用双氯芬酸钠缓释片和甲钴胺片口服用药。分别记录治疗后症状体征改变情况,进行统计学分析。结果治疗组总有效率为81.4%,对照组为60.5%,治疗组优于对照组。治疗组在JOA量表评分、VAS疼痛评分的改善方面与对照组比较,差异有统计学意义。结论中医改良整脊手法结合电针、刺络拔罐法治疗非椎间融合型腰椎间盘突出症术后复发在改善疼痛、提高腰部功能方面明显优于双氯芬酸钠缓释片和甲钴胺片口服药物治疗。