非贴壁法体外诱导人外周血单核细胞生成树突状细胞的研究

目的探讨新型诱导剂钙离子载体A23187联合重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)通过非贴壁法体外诱导人外周血单核细胞(monocytes,Mo)生成树突状细胞(dendritic cell,DC)的可行性。方法采用密度梯度离心法分离出人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearc ell,PBMC),一组通过贴壁法分离出Mo,再加入rhGM-CSF+A23187,称贴壁法组。另一组直接加入rhGM-CSF+A23187,称非贴壁法组。通过光镜观察细胞形态的变化,流式细胞仪检测DC细胞的表面标志。结果两组诱导培养的DCs都具有典型的树突形态;与贴壁法比较,DC表面分子CD14-CD83+(39.2%vs40.9%)、CD14-CD1a+(19.6%vs18.3%)、CD14-CD86+(47.1%vs46.0%)、CD14-CD40+(30.5%vs32.8%)的表达无明显差异,P值均大于0.05。结论新型诱导剂钙离子载体A23187联合rhGM-CSF通过非贴壁法能有效地诱导Mo生成成熟的DCs。