化合物治疗非酒精性脂肪肝病相关肝细胞癌的研究进展

目前非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)已成为全球健康的严重威胁,将成为肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的主要诱导因素,并最终导致NAFLD相关的HCC的发生。但目前为止,其具体分子机制仍不完全清楚。现越来越多的研究关注着化合物在NAFLD和NAFLD相关的HCC中的应用。因此本文在简要回顾了NAFLD相关HCC发病和进展可能机制的最新研究基础上,进行总结和整理化合物对NAFLD相关肝细胞癌治疗的最新进展,并将这部分药物分为以下五种作用机制:抗炎、抗氧化、调节脂质代谢、调节肠道菌群和抑制肝纤维化,以期为今后NAFLD相关HCC的治疗和预防提供有价值的信息。

肠道菌群-胆汁酸轴在非酒精性脂肪肝病相关肝细胞癌中的研究进展

随非酒精性脂肪性肝病发生率的攀升,非酒精性脂肪性肝病相关肝细胞癌(NAFLD-HCC)在肿瘤中的占比也随之增加,已成为超越病毒性肝炎的肝癌病因。通过整合肠道菌群、胆汁酸和NAFLD-HCC的相关文章,基于肠-肝轴从肠道菌群、胆汁酸及其两者的关系,NAFLD-HCC的影响因素,肠道菌群-胆汁酸轴与NAFLD-HCC的关系,这四大方面展开,综述肠道菌群-胆汁酸轴对NAFLD-HCC发展的影响。

清肝降脂汤对体外诱导非酒精性脂肪肝细胞模型脂代谢和过氧化物酶体增殖物激活受体-α的调节作用研究

目的:探讨清肝降脂汤对体外诱导非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型脂代谢和过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)-α的调节作用。方法:取HepG2细胞株,采用油酸构建NAFLD细胞模型。将细胞分为正常对照组(无油酸建模+无药物处理)、模型对照组(有油酸建模+无药物处理)和清肝降脂汤组(有油酸建模+有药物处理)。采用CCK-8实验检测细胞活性。采用油红O染色定性定量检测清肝降脂汤对细胞内脂质的影响,定量计算脂质含量的抑制率。同时,测定细胞内丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和游离脂肪酸(FFA)含量;并采用聚合酶链反应(PCR)和Western blot检测脂肪代谢标志物PPAR-α和成纤维细胞生长因子-21(FGF21)的表达水平。结果:与正常对照组相比,模型对照组的HepG2细胞活性显著增高,脂质含量显著增高,MDA、SOD、TG、TC和FFA含量显著增高,而PPAR-α和FGF21表达水平显著降低(均P<0.05);而与模型对照组相比,清肝降脂汤组的HepG2细胞活性显著降低,脂质含量显著降低,MDA、SOD、TG、TC和FFA含量显著降低,而PPAR-α和FGF21表达水平显著增高(均P<0.05)。结论:清肝降脂汤有助于降低HepG2细胞活性、脂质含量以及MDA、SOD、TG、TC和FFA含量,并促进PPAR-α和FGF21表达,进而调节脂质代谢,抑制NAFLD发展进程。

苓桂术甘汤调控自噬对多柔比星抗非酒精性脂肪肝病相关肝细胞癌的增效作用

目的探讨苓桂术甘汤(LGZG)通过调控自噬增强多柔比星(DOX)的抗非酒精性脂肪肝病相关肝细胞癌(NAFLD-HCC)的作用及机制。方法将C57BL/6小鼠采用随机数字表法分为空白组、NAFLD-HCC组、LGZG组、DOX组、DOX+LGZG组,每组10只。采用腹腔注射二乙基亚硝胺溶液(50mg/kg)和喂养高脂饲料相结合的方法建立NAFLD-HCC小鼠模型;空白组小鼠注射等量生理盐水,给予普通饲料喂养。建模后,各给药组分别灌胃LGZG水提液(20g/kg)和/或腹腔注射DOX溶液(8mg/kg),空白组、NAFLD-HCC组灌胃等量生理盐水,每日1次,连续4周。在模型建立及药物干预期间,监测小鼠的一般情况。药物干预结束后,检测小鼠体重、肝重及肝脏系数;观察小鼠肝脏组织病理形态和纤维化程度;检测小鼠血脂水平[甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的水平],血清中甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)含量,肝脏组织中增殖标志物Ki-67、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平,以及微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)、苄氯素1(Beclin1)、选择性自噬接头蛋白P62的蛋白表达水平。结果与空白组比较,NAFLD-HCC组小鼠随着给药时间延长活动逐渐减少,精神萎靡,毛发蓬乱无光泽,体重显著降低(P<0.05),肝重有上升趋势,肝脏系数显著增加(P<0.05);小鼠肝脏组织炎症细胞大量浸润,部分细胞出现气球样变及小细胞性增生的病变,肝脏纤维化程度加重;血清中TC、TG、LDL-C水平及AFP、CEA含量均显著升高,HDL-C水平显著降低(P<0.05);肝脏组织中Ki-67、Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),Bax蛋白表达水平有降低趋势;肝脏组织中Beclin1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值有所降低,P62蛋白表达水平有所升高。与NAFLD-HCC组比较,DOX组、LGZG组及DOX+LGZG组小鼠上述指标均有不同程度改善,且DOX联合LGZG的干预效果优于DOX。结论LGZG联合DOX能够协同促进肿瘤细胞的凋亡,增强NAFLD-HCC化疗敏感性,有效减缓NAFLD-HCC的发生发展,其机制可能与调节肿瘤细胞自噬的发生有关。

非酒精性脂肪性肝病相关肝细胞癌的研究进展

近年来,随着病毒性肝病预防措施的实施和临床医疗水平的提高,病毒性肝病的发病率逐渐降低。代谢综合征(MS)和非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)在世界范围内的发病率显著增加,且与肝癌的发生有关,因此,非酒精性脂肪性肝病相关肝细胞癌(NAFLD-HCC)发病率的快速上升引起了人们的广泛关注。肝癌病因的这种转变意味着临床需要将肝癌的治疗重点转移到疾病的早期阶段,从根本上预防肝癌进展,从而减轻肿瘤负担。本文就NAFLD-HCC的危险因素及预防进行综述,以期引起人们对NAFLD-HCC早诊断、早预防的关注与重视。

苓桂术甘汤对非酒精性脂肪肝相关肝细胞癌模型小鼠肝脂肪酸代谢重编程的影响

目的从肝脂肪酸代谢重编程角度探讨苓桂术甘汤治疗非酒精性脂肪肝相关肝细胞癌(NAFLD-HCC)的可能作用机制。方法将60只C57BL/6小鼠随机分为正常组、脂肪肝组、脂肪肝相关肝癌组以及苓桂术甘汤低、中、高剂量组,每组10只。脂肪肝相关肝癌组及苓桂术甘汤低、中、高剂量组小鼠采用腹腔注射二乙基亚硝胺和高脂饲料喂养相结合方式建立NAFLD-HCC模型;脂肪肝组小鼠采用高脂饲料喂养建立非酒精性脂肪性肝病模型;正常组予普通饲料喂养。造模成功后,苓桂术甘汤低、中、高剂量组小鼠分别给予苓桂术甘汤4.875、9.750、19.500 g/(kg·d)灌胃,正常组、脂肪肝组、脂肪肝相关肝癌组小鼠每天给予10 ml/kg生理盐水灌胃,各组均连续灌胃30天。检测各组小鼠血脂含量[包括甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]及肝脏游离脂肪酸(FFA)含量,HE及油红O染色观察小鼠肝脏组织病理学改变;检测各组小鼠血清甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)含量及肝脏肿瘤增殖抗原Ki-67蛋白表达,肝脏脂蛋白脂肪酶(LPL)、白细胞分化抗原36(CD36)、肉毒碱棕榈酰基转移酶1α(CPT1α)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达,LPL、CD36、CPT1αmRNA表达。结果与正常组比较,脂肪肝相关肝癌组小鼠肝脏炎性细胞浸润,脂肪变性明显,部分细胞出现小细胞性增生的病理改变,血清TC、TG、LDL-C、AFP、CEA含量升高,HDL-C含量下降(P<0.05或P<0.01),肝脏Ki-67蛋白、Bcl-2蛋白表达均升高,LPL、CD36、CPT1αmRNA及蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01);脂肪肝组仅血清TC、TG和LDL-C含量升高,病理显示肝脏组织仅有脂肪变性和炎细胞浸润,AFP、CEA含量及肝脏Ki-67蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。与脂肪肝相关肝癌组比较,苓桂术甘汤高剂量组可显著改善肝脏病理形态,显著降低肝脏脂质沉积面积,降低血清TC、TG、LDL-C、AFP、CEA含量,升高HDL-C含量,降低肝脏Ki-67、Bcl-2蛋白表达和LPL、CD36、CPT1α蛋白及mRNA表达(P<0.05或P<0.01);苓桂术甘汤中、低剂量组上述各指标改善效果不及高剂量组。结论苓桂术甘汤可能通过影响LPL/CD36/CPT1信号轴调控脂肪酸代谢重编程,从而抑制NAFLD-HCC的发生发展。

非酒精性脂肪性肝病病人血清长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18水平与氧化应激指标、肝纤维化程度的相关性

目的 探究非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)病人血清长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)与氧化应激指标及肝纤维化程度的相关性。方法 以儋州市人民医院2020年11月至2022年3月收治的92例NAFLD病人为NAFLD组,另选取同期健康体检志愿者90例为对照组。根据NAFLD肝纤维化(NFS)评分将NAFLD组病人分为排除晚期纤维化组(30例)、中间状态组(46例)、晚期纤维化组(16例)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清lncRNA HCG18表达水平;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测氧化应激指标水平;Pearson相关性分析NAFLD病人血清lncRNA HCG18与氧化应激指标的关系;Spearman相关性分析NAFLD病人血清lncRNA HCG18与NFS评分的关系。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA HCG18对NAFLD的诊断价值。结果 NAFLD组lncRNA HCG18(1.37±0.29比1.01±0.24)、丙二醛[(6.96±2.13)μmol/L比(4.17±1.04)μmol/L]水平明显高于对照组(P<0.001),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)[(72.39±11.26)U/mL比(98.25±13.92)U/mL]、超氧化物歧化酶(SOD)[(68.36±10.65)U/mL比(92.84±12.89)U/mL]水平明显低于对照组(t=9.11、11.19、13.79、13.98,P<0.001)。排除晚期纤维化组、中间状态组、晚期纤维化组lncRNA HCG18(1.20±0.25比1.39±0.30比1.65±0.35)、丙二醛[(5.64±1.88)μmol/L比(7.12±2.16)μmol/L比(8.99±2.51)μmol/L]水平依次显著升高(F=12.36、13.06,P<0.001),GSH-Px[(81.56±13.58)U/mL比(71.74±10.52)U/mL比(57.06±9.05)U/mL]、SOD[(81.45±12.52)U/mL比(66.52±10.25)U/mL比(49.13±8.29)U/mL]水平依次显著降低(F=24.27、48.42,P<0.001)。Pearson相关性分析显示,NAFLD组血清lncRNA HCG18水平与丙二醛呈正相关(r=0.59,P<0.001),与GSH-Px、SOD均呈负相关(r=-0.57、-0.62,P<0.001);Spearman相关性分析显示NAFLD组血清lncRNA HCG18水平与NFS评分呈正相关(r=0.69,P<0.001)。血清lncRNA HCG18诊断NAFLD的ROC曲线下面积(AUC)为0.85。结论 NAFLD病人血清lncRNA HCG18显著升高,与氧化应激指标及肝纤维化程度存在一定的相关性。

非酒精性脂肪肝对免疫检查点抑制剂治疗肝细胞癌疗效的影响及机制研究进展

近年来,非酒精性脂肪肝合并肝细胞癌的患者数量逐渐上升,免疫治疗在晚期肝细胞癌的治疗中扮演着越来越重要的角色。既往研究发现非酒精性脂肪肝可以影响肝细胞癌免疫治疗的疗效,但机制不清,可能与这些因素相关:非酒精性脂肪肝中CD8^(+)PD-1^(+)T细胞增多导致肝脏细胞增殖能力缺陷;锌指蛋白64激活CSF1抑制抗肿瘤免疫;PCSK9下调LDLR水平抑制肿瘤微环境中CD8^(+)T细胞免疫应答;免疫应答的缺失导致肝损伤等。研究发现联合使用仑伐替尼、PKCa抑制剂、PCSK9蛋白的抑制、铁死亡诱导剂、HIF2a小分子抑制剂可以改善非酒精性脂肪肝相关肝细胞癌免疫检查点抑制剂的疗效。本文就非酒精性脂肪肝对肝脏免疫微环境和肝细胞癌免疫检查点抑制剂疗效的影响和机制,以及如何改善非酒精性脂肪肝相关肝细胞癌免疫检查点抑制剂疗效的研究进行综述。

血清脂联素、肝细胞生长因子水平对非酒精性脂肪肝的诊断价值

目的:探讨血清脂联素(ADPN)、肝细胞生长因子(HGF)水平在非酒精性脂肪肝(NAFLD)诊断、病情严重程度评估中的价值。方法:选取2021年5月至2023年5月来我院治疗的NAFLD患者作为患病组(n=100),根据病情严重程度进一步分为重度组(n=31)、中度组(n=33)和轻度组(n=36),另选取同期于本院参加健康体检的人群作为对照组(n=100)。采用ELISA法对血清ADPN、HGF水平进行检测;Logistic回归分析重度NAFLD发生的影响因素;ROC曲线分析血清ADPN、HGF水平对NAFLD及重度NAFLD的诊断价值。结果:与对照组相比,患病组血清ADPN水平显著下降,HGF水平显著升高(P<0.05);血清ADPN、HGF二者联合诊断NAFLD的曲线下面积(AUC)均高于二者单独诊断(0.859 vs 0.790、0.744,Z_(二者联合-ADPN)=2.033、Z_(二者联合-HGF)=2.384,P=0.042、0.017);随着病情严重程度增加,糖尿病占比、BMI、总胆固醇、三酰甘油、HGF水平呈升高趋势,血清ADPN水平呈下降趋势(P<0.05);ADPN是重度NAFLD发生的保护因素(P<0.05),总胆固醇、HGF是重度NAFLD发生的危险因素(P<0.05);血清ADPN、HGF二者联合诊断重度NAFLD的曲线下面积(AUC)均高于二者单独诊断(0.837 vs 0.674、0.728,Z_(二者联合-ADPN)=2.393、Z_(二者联合-HGF)=2.092,P=0.017、0.036)。结论:NAFLD患者血清ADPN水平下降,HGF水平升高,且ADPN、HGF水平与病情严重程度密切相关,二者联合对NAFLD及重度NAFLD具有更高的诊断价值。

12周跑台训练对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏肝细胞癌下调的线粒体转运蛋白表达的改变及其对线粒体功能的影响

目的:研究12周跑台训练后非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠肝脏肝细胞癌下调的线粒体转运蛋白(HDMCP)的变化及其对肝脏线粒体功能的影响。方法:雄性8周龄ApoE-/-小鼠48只,随机分为4组,对照组(C,n=12),14周西方膳食组(模型组,M,n=12),继续西方膳食+12周跑台运动组(ME,n=12);西方膳食26周组(MM,n=12)。跑台训练12周,坡度为0°,跑速13m/min,60min/次,每周5次。测定肝脏HDMCPmRNA的表达,线粒体活性氧及H2O2生成,线粒体ATP合成活力,肝脏ATP含量,线粒体态3呼吸、态4呼吸及呼吸控制比(RCR)。结果:耐力训练组(0.53±0.09)肝脏HDMCPmRNA表达显著低于C组(0.72±0.10)、M组(1.24±0.16)、MM组(1.32±0.17);耐力训练组肝脏线粒体ATP合成活力(11.23±2.53)及肝脏组织ATP含量(10.57±2.12)均显著高于MM组(7.36±1.22,8.32±1.41);耐力训练组肝脏线粒体ROS(42.51±4.12)及H2O2生成(18.33±3.10)均显著低于MM组(68.94±5.99,24.31±3.56);耐力训练组线粒体态3呼吸(12.21±1.32)与RCR(2.78±0.89)均显著高于MM组(10.76±1.11,1.75±0.69),而态4呼吸(4.40±1.32)显著低于MM组(6.14±1.45)。结论:12周跑台训练可以显著降低肝脏HDMCP表达,可能进而减少线粒体质子漏,增强线粒体ATP合成,改善线粒体功能。

白藜芦醇对小鼠非酒精性脂肪性肝炎相关肝细胞癌的治疗作用及机制研究

目的探讨白藜芦醇(RSV)在非酒精性脂肪性肝炎相关肝细胞癌(NASH-HCC)小鼠模型中的治疗作用及分子机制。方法选取出生后4d C57BL/6J小鼠,每只背部皮下注射STZ 200μg,4周龄时选取雄性小鼠,随机分为STZ+普通饲料组、STZ+高脂高胆固醇饲料(HFHC)组和STZ+HFHC+RSV(RSV 400mg/kg,1次/d灌胃)组,每组10只。于16周龄处死实验小鼠,测定血清生化指标,采用RT-PCR法检测肝组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、I型胶原蛋白(Collagen Type I)、转化生长因子(TGF)-β、磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)和胆汁酸相关受体法尼醇X受体(FXR)及其下游靶基因小异二聚体伴侣(SHP)和肝细胞膜上胆汁酸盐输出泵(BSEP)mRNA的表达水平,采用超高效液相色谱串联质谱联用仪(UPLC-MS/MS)检测鹅去氧胆酸(CDCA)、去氧胆酸(DCA)、牛磺β鼠胆酸(TβMCA)、甘氨胆酸(GCA)、胆酸(CA)、牛磺胆酸(TCA)、牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)、牛磺石胆酸(TLCA)、石胆酸(LCA)等胆汁酸及总胆汁酸的含量,观察肝组织病理变化及进行非酒精性脂肪性肝病活动度积分(NAS)评定。结果与STZ+普通饲料组比较,STZ+HFHC组肝指数、AST、HDL、LDL、TC、TNF-α、MCP-1、Collagen Type I、TGF-β、GPC3 mRNA表达水平,总胆汁酸、CDCA、DCA、TβMCA含量以及脂肪变、小叶内炎症、NAS评分均明显升高,FXR mRNA表达水平明显下降(均P<0.05);与STZ+HFHC组比较,STZ+HFHC+RSV组肝指数、FPG、ALT、AST、HDL、LDL、TC、TG,MCP-1、Collagen Type I、TGF-β和GPC3 mRNA表达水平,总胆汁酸、CDCA、DCA、TβMCA、GCA、CA、TCA、TCDCA、TLCA含量以及脂肪变、NAS评分均明显下降,FXR、SHP和BSEP mRNA表达水平均明显升高(均P<0.05)。结论RSV具有抗NASH相关HCC的作用,可以作为治疗NASH-HCC的候选药物。

孟德尔随机化研究铁死亡在非酒精性脂肪肝病的发生机制及作用研究

目的 探讨孟德尔随机化研究铁死亡在非酒精性脂肪肝病的发生机制及作用。方法 基于铁死亡与非酒精性脂肪肝病的全基因组关联研究结果数据,采用IVW和MR-Egger两种两样本MR方法评估了包括:氧化应激、脂质过氧化、生长因子、趋化因子、炎性因子、肿瘤坏死因子及其他多个细胞因子与铁死亡和非酒精性脂肪肝病的因果关系,并采用多种方法完成其多效性检验。结果 确定氧化应激、脂质过氧化及炎性因子的效应值评估需要选择MR-Egger回归方法进行干预,其余参数均选择IVW为主要方法进行效应值统计。同时,入组的铁死亡相关的细胞因子对非酒精性脂肪肝的I2GX>0.9,使得该方法使用时不需要矫正偏差;铁死亡与NAFLD显著相关,铁死亡能通过脂质过氧化及炎症反应等,增加NAFLD的发生(IVW:OR=1.03,95%CI:1.01~1.04);趋化因子CXCL19与肝细胞因子对NAFLD的发生存在潜在效应;Q检验P与MR-Egger回归方法截距P>0.05,说明MR分析结果未见多效应性偏差。结论 从基因层面而言,铁死亡能直接参与非酒精性脂肪肝的发生和发展,并伴有脂质过氧化及炎性反应,造成肝脏细胞变性,亦可为临床治疗提供新的思路,但仍需要进一步研究来全面的评估其相关性。

非酒精性脂肪性肝病相关肝细胞癌的发病机制

非酒精性脂肪性肝炎/非酒精性脂肪性肝病(NASH/NAFLD)已经逐渐发展成为西方发达国家肝细胞癌(HCC)的主要病因之一。不同于经典的肝炎-肝硬化-肝癌疾病演变过程,近40%的NAFLD相关HCC可不经历肝硬化直接进展为HCC,表明其可能有不同的发病机制。阐述了关于NAFLD相关HCC发病机制的最新研究进展。

非酒精性脂肪性肝炎相关肝细胞癌研究进展

随着肥胖和糖尿病（DM）的增加,非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的发病率也逐渐升高。NAFLD疾病谱主要包括单纯性非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）、肝硬化及肝细胞癌。目前,NAFLD被认为是世界范围内引起肝病的第一位病因。单纯性非酒精性脂肪肝通常病情稳定,预后良好,但仍有高达25%NAFLD患者会进展为NASH。

非酒精性脂肪肝致肝细胞癌发病机制研究进展

非酒精性脂肪肝（NAFLD）包含以微小肝脂肪堆积或伴有炎症细胞浸润的肝细胞损伤以及肝纤维化的一系列肝功能障碍,包括良性的脂肪肝（NAFL）,NAFLD可发展为脂肪性肝炎（NASH）、肝纤维化、肝硬化,最终发展为肝细胞癌（HCC）.

中性粒细胞/淋巴细胞比值与2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝伴肝功能异常的相关性

非酒精性脂肪肝（NAFLD）是与胰岛素抵抗和遗传易感密切相关的代谢应激性肝脏损伤，由于肝细胞脂肪的大量堆积，严重影响肝细胞血氧供应，长期发展会因肝纤维化引起肝硬化，甚至可导致肝癌。根据流行病学调查表明，NAFLD在肥胖和2型糖尿病患者中的发病率高达70％～75％，尤其肝脏作为糖尿病作用的最大靶器官，高血糖会加重肝细胞受损情况，而NAFLD会增加胰岛素抵抗。

非酒精性脂肪性肝病对乙肝病毒相关肝细胞癌患者生存的影响

目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)对乙型肝炎病毒(HBV)相关肝细胞癌(HCC)患者生存的影响。方法 纳入2008年6月-2020年12月就诊于解放军总医院第五医学中心的HBV相关HCC患者833例,回顾性收集患者初次诊断HCC时的临床信息及随访资料,根据巴塞罗那肝癌临床(BCLC)分期进行分层,并以是否合并NAFLD分组,采用稳健逆概率处理加权法(IPTW)平衡相关临床指标,采用Kaplan-Meier生存曲线、Log-rank检验及Cox回归比较NAFLD组与非NAFLD组HBV相关HCC患者的预后,研究终点为肝癌相关性死亡。结果 以BCLC分期为标准,本组833例中可切除患者465例,不可切除患者368例;可切除患者中161例(34.6%)合并NAFLD,不可切除患者中76例(20.7%)合并NAFLD。进行稳健IPT W加权后,两组间所有指标差异均无统计学意义。生存分析结果显示,合并NAFLD的HBV相关HCC患者中位生存时间明显长于非NAFLD患者,可切除NAFLD患者3、5、8年累积生存率分别为96.9%、82.1%、41.2%,明显高于非NAFLD患者(分别为91.1%、60.4%、13.7%,P<0.01)。Cox分析结果显示,NAFLD是生存的保护因素(HR=0.473,95%CI0.356~0.627,P<0.01)。在不可切除患者中也获得了类似的结果,合并NAFLD患者3、5、8年累积生存率分别为76.8%、53.7%、18.4%,明显高于非NAFLD患者(分别为53.0%、25.7%、2.5%,P<0.01);单因素Cox分析结果显示,NAFLD是患者生存的保护因素(HR=0.358,95%CI 0.247~0.518,P<0.01)。结论 合并NAFLD的HBV相关HCC患者累积生存率高于未合并NAFLD的患者。

非酒精性脂肪性肝病相关肝细胞癌的临床研究进展

脂肪性肝病（FLD）包括酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）以及其他原因所致脂肪肝等三个类型。随着饮食结构的改变、人口老龄化，NAFLD的发病率逐年增加，在我国因肥胖等所致的FLD明显多于因饮酒所致的FLD。此外，流行病学研究表明，NAFLD增加原发性肝癌，尤其是肝细胞癌（HCC）风险。因此，本文就我院一例患者及当前NAFLD与HCC的诊疗指南谈谈NAFLD与HCC的关系、诊疗方面的新进展。

piRNA-DQ723301通过靶向调控Smad2对非酒精性脂肪肝小鼠肝星状细胞活化及功能的影响

目的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)目前已逐渐成为威胁人类生活健康的最常见的肝病之一,然而其发病机制尚未完全阐释清楚,近期有研究表明在非酒精性脂肪肝病存在异常表达的piRNAs,其中piRNA-DQ723301可能通过靶向调控Smad2参与非酒精性脂肪肝病的发生发展,但其靶向作用及具体机制尚未被完全阐明。因此,本实验的目的旨在研究piRNA-DQ723301与Smad2是否存在靶向调控,从而参与NAFLD的发生发展,以不断完善piRNA在NAFLD发病机制中的作用奠定理论基础。方法1.设计含有piRNA-DQ723301结合位点的Smad23′-UTR PCR引物,通过双荧光素酶实验分析得出piRNA-DQ723301对Smad2的靶向调控作用。2.通过CCK8法检测,比较转染不同浓度piRNA-DQ723301模拟物及抑制剂48h后各组细胞的活力,通过比较得出较合适的浓度。3.Smad2 mRNA及蛋白、piRNA-DQ723301的表达情况通过Western-blot法、实时荧光定量PCR分析。并观察piRNA-DQ723301对非酒精性脂肪肝纤维化发病关键因子的影响。结果1.将构建的阴性对照序列、质粒、模拟物共同转染至293T细胞,针对荧光素酶活性进行检测。表明与对照组相比,piRNA-DQ723301以野生型质粒为载体时,酶活性能受到抑制;而以突变型质粒为载体时,荧光素酶酶活性则无明显改变,且piRNA-DQ723301类似物野生质粒组荧光素酶活性比piRNA-DQ723301类似物突变型质粒组组明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。2.CCK8法结果表明,小鼠原代肝星状细胞活力在转染100 nM、150 nM的模拟物、抑制剂后分别呈现出下降、增强趋势,转染50 nM的模拟物、抑制剂及各浓度的对照序列则基本不变。3.相较于未转染组,转染组piRNA-DQ723301表达量、Smad2 mRNA表达量、α-SMA mRNA在NC组、Mimic组、Inhibitor组分别呈现出基本不变、显著增高(P<0.001)、明显降低(P<0.001)的变化趋势。4.相较于未转染组,各转染组Smad2蛋白的表达量在NC组、Mimic组、Inhibitor组的变化趋势分别为基本不变、显著降低(P<0.001)、明显升高(P<0.001);Piwi蛋白的表达量在NC组、Mimic组、Inhibitor组的变化趋势分别为基本不变、Piwil3基本不变及Piwil1、Piwil2、Piwil4显著增高(P<0.01)、Piwil3基本不变及Piwil1、Piwil2、Piwil4降低(P<0.05)。与Inhibitor组相比,Mimic组Piwi表达量增加(P<0.01),Smad2表达量降低(P<0.001)。5.与未转染组比较,TGF-β1、α-SMA蛋白表达量在NC组、Mimic组的变化趋势分别为基本不变、显著降低(P<0.001),Inhibitor组则显著上升(P<0.001)。结论1.piRNA-DQ723301针对Smad2的表达具有靶向调节作用,能够抑制其表达;2.piRNA-DQ723301可靶向调控Smad2抑制肝星状细胞活力及功能;3.利用piRNA-DQ723301的靶向调控作用或可对肝纤维化的发生发展产生抑制甚至逆转作用。

非酒精性脂肪性肝病与HBV既往感染者发生肝细胞癌的关系探讨

目的 探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)与慢性HBV既往感染者发生肝细胞癌(HCC)的关系。方法 选取2023年2月至2024年2月102例HBV感染相关HCC患者作为观察组,其中HBV既往感染者(HBsAg阴性、抗-HBc阳性)23例,现症感染者(HBsAg阳性、抗HBc阳性)81例。另选取同期接诊的100例非HCC慢性乙型肝炎患者作为对照组。对比观察组与对照组、HBV既往感染与现症感染者的临床特征。单因素和多因素分析HBV既往感染者发生HCC的影响因素,并通过校正混杂因素进一步分析NAFLD与HCC的关系。结果 与对照组相比,观察组的男性(78.43%对63.00%)、肝硬化家族史(14.71%对6.00%)、肝癌家族史(12.75%对3.00%)、NAFLD(20.59%对9.00%)、肝硬化(32.35%对15.00%)及AFP>400 ng/mL(40.20%对18.00%)占比更高,年龄更大[(57.9±10.4)岁对(52.1±9.9)岁],差异有统计学意义(均P<0.05)。多因素分析显示性别、年龄、肝癌家族史、NAFLD、肝硬化、AFP>400 ng/mL均是发生HBV感染相关HCC的影响因素(OR=2.250、1.047、2.586、1.064、2.016、1.730,均P<0.05)。HCC患者中,与现症感染组相比,既往感染组的年龄更大[(59.2±9.4)岁对(53.7±10.6)岁],肝癌家族史(38.10%对6.17%)、合并糖尿病(33.33%对12.35%)、高血压(42.86%对24.69%)、NAFLD(38.10%对16.05%)占比更高(P<0.05)。将HBV现症感染组患者作为参照对象,对年龄、糖尿病、高血压因素进行校正后多因素分析显示,NAFLD是HBV既往感染者发生HCC的独立影响因素(OR=1.643, 95%CI:1.301~2.818,P<0.05)。结论 HBV感染相关HCC的发生与性别、年龄、肝癌家族史、NAFLD等多种因素相关,NAFLD可能是HBV既往感染者发生HCC的一个重要危险因素。