合肥地区献血者血液筛查非重复反应性标本与OBI标本间HBV血清学特征分析

目的 了解血液筛查非重复反应性标本与隐匿性乙型肝炎病毒感染(OBI)标本间HBV血清学特征的相关性。方法 收集本科室2021年1月—2023年1月血液筛查ELISA结果均为阴性,仅NAT反应性的标本共144份,其中TMA法联检反应性标本92份,PCR法单人份检测HBV DNA反应性标本52份。联检反应性标本补充TMA法鉴别检测和PCR法单人份检测,2种方法检测均无反应性的标本纳入NRR标本组,任1种方法检出HBV DNA反应性的标本纳入OBI标本组。对2组标本完成HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc检测,分析NRR标本与OBI标本在血清学模式和阳性率上是否存在差异。结果 联检反应性标本补充检测均阴性标本53份,纳入NRR标本组。91份标本在任1种方法中检测出HBV DNA反应性,纳入OBI标本组。2组标本血清学检测均未检出HBsAg和HBeAg,抗-HBs检出率NRR标本组为64.15%,OBI标本组为47.25%;抗-HBc检出率NRR标本组为86.79%,OBI标本组为94.51%;抗-HBe检出率NRR标本组为35.85%,OBI标本组为52.75%。2组标本血清学模式:NRR标本组表现最多的模式为抗-HBs+、抗-HBc+(32.08%),OBI标本组表现最多的模式为抗-HBe+、抗-HBc+(37.36%)。结论 NRR标本与OBI标本在HBV血清学检测中的部分检测结果间存在差异,但NRR标本中较高的抗-HBc阳性率提示仍有较高的可能存在HBV感染风险。

核酸检测非重复反应性的HBsAg阴性血液HBV感染的确认

目的对单个标本核酸检测呈初始反应性（Initial reactive,IR）但鉴别试验为无反应性,即所谓的核酸检测非重复反应性（NAT non-reproducible reactivity,NAT NRR）,且HBsAg阴性的献血者进行HBV感染的确认。方法采用Ultrio plus（盖立复）进行单个标本核酸检测（Individual donation nucleic acid testing,ID-NAT）。应用超高速离心技术（25 0000 g×3 h）与靶向HBV基因BCP/PC、PreCore/Core、pre-S/S和S区段的高灵敏度巢式PCR检测相结合的超离体系对12mL NAT NRR血浆标本进行HBV DNA确认,以获得HBV基因序列作为HBV DNA确认的标准;同时与采用2次联检和1次鉴别试验的推荐流程的确认结果进行比较。NAT NRR标本补充电化学发光法（ECL,罗氏）的HBsAg,抗-HBc和抗-HBc检测。结果 2016年1月至2018年2月间共筛查标本77 556份,检出HBsAg-/NAT NRR标本85份（0. 11%）,其中有79份标本进行了确认试验。超离体系确认出HBV感染标本43份,推荐流程确认出32份。配对比较显示超离体系明显优于推荐流程（McNemar test,P〈0. 05）：有48份（60. 7%）标本至少被1种流程确认,其中27份（34. 2%）标本同时被2种流程确认,16份（20. 2%）标本单独被超离体系确认,超离体系未能确认的5份（6. 3%）标本被推荐流程确认。HBV感染确认组和未确认组间抗-HBc＋（92%和80%）和抗-HBs＋（42%和55%）的占比无统计学差异,但确认组抗-HBs定量值的分布（中位数22 IU/mL,范围10-1 000 IU/mL）明显低于未确认组（P〈0. 05）。在HBV感染确认组中鉴别出血清学阳性型隐匿性乙型肝炎病毒感染（Occult Hepatitis B virus infection,OBI）献血者45位（94%）、血清学阴性OBI献血者1位,2位献血者因未能跟踪而疑似HBV窗口期感染。结论加大核酸提取的血浆体积并结合以高灵敏度巢式PCR的方法能够确认60%的HBsAg-/NAT NRR标本存在HBV DNA。NAT NRR现象与病毒载量极低的OBI有关,抗-HBc检测可有助于此类HBV感染献血者的排除; HBV DNA低水平感染构成了血液安全的潜在风险,对NAT NRR献血者进行屏蔽是防范此类风险的合理措施。

献血者HBV核酸检测非重复反应性确认及追踪结果分析

目的分析献血者乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测非重复反应性确认及追踪结果。方法对1200例于我站无偿献血者的血液样本进行非重复反应性确认,补充乙肝“两对半”检测,并对其部分单项核酸检测反应的患者予以回访结果追踪。结果1200份无偿献血血液样本单项核酸检测有反应性者150份(12.50%)。150份单项核酸检测有反应性样本经重新病毒核酸检测后,仍有58例样本有反应性(38.67%)、92例样本为非反应性(61.33%)。其中有18例献血者实际召回抽血,完成两次追踪,第一次追踪60~125天,第二次追踪间隔天数在160~356天,第一次追踪HBV DNA有反应(+)8例,第二次追踪仍存在反应(+);7例HBV DNA有反应者存在抗-HBc阳性(+)。核酸反应检测HBV-DNA阳性值10~17有37.25%,高于核酸反应检测值<10的4.17%(P<0.05)。结论部分单项核酸检测反应无偿献血者存在一定的输血传播HBV风险,多为HBV隐匿性感染,此时需要重视其输血情况,屏蔽单项核酸反应性献血者。

广州地区献血者HBV核酸检测非重复反应性样本确认及追踪研究

目的研究无偿献血乙型肝炎病毒(HBV)核酸检测中非重复反应性样本确认方法,探讨此类献血者血液安全性及归队屏蔽策略。方法对391例HBV单项NAT(Grifols Proleix Elite Assay)反应性样本使用原NAT检测系统进行重复检测,非反应性样本使用罗氏MPX 2.0核酸检测试剂进行确认,并补充乙肝"两对半"试验,对部分HBV单项NAT反应性献血者进行回访追踪。结果 391例单项HBV NAT反应性样本原系统重测,90例样本仍为反应性(占23.01%),301例样本为非反应性(占76.99%)。296例非重复反应性样本在罗氏MPX 2.0试剂复核阴性,5例样本呈反应性,推断为低水平HBV隐匿性感染。HBV NAT重复检测非反应性样本组在抗-HBs项的阳性率高于重复检测反应性样本组(x^2=7.629,P<0.05),在抗-HBc项则反之(x^2=15.303,P<0.05)。8例HBV NAT非重复反应性献血者随访复检NAT合格,18例献血者复检呈单项NAT反应性,后用双NAT系统重测,6例献血者单或双NAT系统为反应性(抗-HBc均为阳性),12例献血者为阴性(抗-HBc阳性9例)。结论在鉴定HBV NAT非重复反应性样本及献血者复查时,在原有检测基础上补充另外一种灵敏度相当的核酸检测系统进行复试,并增加抗-HBs和抗-HBc检测能进一步甄别假反应性样本和隐匿性乙肝病毒感染样本,建议采供血机构以3-6个月为间隔对核酸检测中HBV NAT非重复反应性的献血者进行一次以上复检。

核酸检测在献血筛查中的应用

目的分析单人份核酸检测方法 (NAT)在无偿献血者血液筛查中的应用。方法采用Procleix TIGRIS全自动核酸检测系统,结合血站常规的血清学检测,平行检测无偿献血者血液标本。对部分仅核酸检测阳性的献血者,特别是仅HIV核酸单阳性献血者和非重复反应性献血者进行追踪检测,并进行人群特性的描述性分析。结果在304 103份标本中,ELISA阴性NAT初始反应性标本608份(0.20%)。经鉴别实验检出HBV-DNA阳性标本232份,鉴别阴性复试阳性标本74份,非重复反应性阳性标本301份。追踪分析17名非重复反应性献血者,发现4人有HBV-DNA可鉴别的阳性。结论核酸检测技术用于献血者的常规血液筛查能进一步保障输血安全。非重复反应性的标本存在着真阳性的可能,应重视核酸检测非重复性的标本。