2017-2020年江门地区儿童手足口病流行病学特征及非EV71型非CA16型肠道病毒型别分析

目的:分析广东省江门市2017-2020年手足口病的流行特征,了解非EV71型非CA16型肠道病毒的分子流行病学特征,为本市进一步临床治疗和防控工作提供科学依据。方法:通过全国传染病报告信息管理系统收集2017-2020年本市手足口病患儿资料,收集整理2017-2020年本院信息系统报告的手足口病例及分析其流行特征,采用荧光RT-PCR法对疑似手足口病患者标本同时进行EV通用型、EV71型、CA16型检测,并选取EV71型和CA16阴性而EV通用型阳性的标本进行型别鉴定,设计5’非编码区特异性引物,RT-PCR扩增后进行序列测定,最后对核苷酸的同源性进行比对及确定病毒的型别。结果:2017-2020年江门市共报告HFMD总发病人数为31 709例,其中2017年报告病例数最高。4年内共采集了因怀疑手足口病到本院就诊患儿的2 587例标本,并同时进行EV通用型、EV71型、CA16型检测,总阳性1 263例,总阳性率为48.82%。阳性主要以托幼儿童和男患儿为主。其中EV71核酸阳性173例,占13.70%;CA16核酸阳性282例,占22.33%;其他EV核酸阳性808例,占63.97%。在2017-2020年中确定属于肠道病毒分型共87份,检出的非EV71型非CA16型的肠道病毒有6种型别,分别为CA6、CA10、CA4、CA12、CA5、CA8,其中CA6是占主要的,为70.11%,其次是CA10占13.79%。结论:江门市手足口病的分布呈现出人群差异、季节差异,非EV71型非CA16型的肠道病毒病原谱有六种,病毒型别以CA6为主。应持续进行病原学检测,掌握优势型别,为防控提供依据。

HPLC-UV法检测EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液相关抗原纯度的方法建立与评价

为建立一种准确可靠的高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)方法,检测EV71-CA16二价手足口病(HFMD)灭活疫苗原液中的相关抗原,肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CA16)的纯度。本文采用Waters体积排阻色谱柱(SEC,UltrahydrogelTM 2507.8×300 mm,6μm),流动相为0.01 mol/L的PBS中再加入0.1 mol/L氯化钠溶液,等度洗脱,流速0.3 mL/min,检测波长280 nm,进样量50μL,柱温21℃,进行EV71与CA16病毒原液的纯度检测,并对该方法的检测限、拖尾因子、专属性、重复性及检测范围进行验证。结果显示,2种抗原的灵敏度溶液的信噪比(S/N)分别为37.053和47.710,均远大于3,各试样的拖尾因子均小于3;CA16原液和EV71原液经HPLC分离纯化后的目标抗原峰馏分经SDS-PAGE和Western-Blot特异性鉴定,结果显示,色谱峰样品组成分别为CA16和EV71的2种病毒衣壳的结构蛋白,表明本检测方法专属性高。不同浓度的EV71与CA16病毒抗原经多次检测后,各浓度条件下的峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,重复性良好。不同抗原浓度批样品检测结果显示,CA16原液抗原浓度在89 U/mL~26398 U/mL之间,EV71原液抗原浓度在170 U/mL~9074 U/mL之间时,2种抗原溶液经多次检测统计显示峰面积百分比与保留时间的RSD均小于1%,本方法在该抗原浓度范围内准确可靠,适用于EV71-CA16二价手足口病灭活疫苗原液中病毒抗原纯度的检测。

EV71与CA16双价灭活疫苗诱导小鼠免疫原性研究

目的评价EV71和CA16双价灭活疫苗免疫小鼠诱导的体液免疫和细胞免疫应答。方法分别应用EV71和CA16双价疫苗、EV71和CA16单价疫苗按单针、两针(0,14 d)的程序免疫小鼠,采用细胞病变法检测血清第1针免疫后21 d时中和抗体效价,应用LUMINEX液相芯片技术检测小鼠脾单个核细胞体外经抗原刺激分泌细胞因子的水平。结果双价疫苗与EV71单价疫苗单针、两针免疫相比,EV71中和抗体几何平均值相近(118.8∶84.0;159.5∶156.8,P>0.05)。双价疫苗与CA16单价疫苗单针免疫诱导的CA16中和抗体均为阴性;两针免疫CA16中和抗体几何平均值一致(30.0∶26.9,P>0.05)。加强免疫7 d后,小鼠脾MNC经EV71抗原刺激,双价疫苗较EV71单价疫苗诱导Th2类细胞因子IL-4、5、6、10和炎症因子TNF-α的分泌水平显著增高(P=0.020,P=0.027,P=0.038,P=0.019,P=0.026);MNC经CA16抗原刺激,双价疫苗与CA16单价疫苗相比诱导细胞因子水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论双价疫苗可诱导与单价疫苗相似的中和抗体应答水平,并可提高Th2类细胞因子应答,研究为EV71和CA16双价灭活疫苗的研发提供了实验依据。

2009年西安地区手足口病病原血清型分析及肠道病毒71型基因特征

目的了解西安地区2009年手足口病的肠道病毒血清型;评价IgM抗体检测在肠道病毒71(EV71)感染早期诊断中的意义;分析西安地区EV71 VP1基因特征。方法分别在西安市城区医院和郊县医院采集的标本共185份,RT-PCR法检测标本中的病毒核酸;采集EV71核酸阳性的急性期病例血液标本,ELISA法检测血清中IgM抗体;细胞培养分离EV71,扩增其VP1区,测序并与EV71各血清型代表株序列比对,进行进化分析。结果在185份标本中,156份检出肠道病毒核酸(84.32%),其中72.4%为EV71,17.3%为柯萨奇A16(CA16);63份EV71核酸阳性的急性期病例血清标本中,45份EV71 IgM抗体阳性(71.43%);分离到的12株EV71均为C4亚型。结论 2009年西安地区手足口病病原以EV71为主,且主要是C4亚型;ELISA方法可用于EV71感染的早期诊断。

EV71型病毒疫苗接种后住院患儿手足口病流行病学特征及病原学变化

目的了解EV71型病毒疫苗接种对手足口病流行病学及病原学的影响,为手足口病的防治工作提供科学依据。方法收集2014—2018年某院手足口病住院患儿病例资料,应用SPSS 18.0软件对数据进行统计,比较EV71型病毒疫苗接种前后(2014年—2016年10月VS 2016年11月—2018年)住院患儿手足口病的流行病学特征及病原学变化。结果共收治手足口病住院患儿7099例,其中普通型6339例,重症1570例。与EV71型病毒疫苗接种前比较,接种后手足口病住院患儿数减少,重症病例所占比率下降,差异有统计学意义(χ2=56.27,P<0.001)。男童患病率高于女童,发病年龄仍然以5岁以下婴幼儿为主,但每个年龄段重症病例均有下降;全年发病呈现两个高峰,分别在5—7月、9—11月;普通型病例以非EV71/CoxA16肠道病毒感染为主,重症病例仍以EV71型病毒感染为主。结论EV71型病毒疫苗接种后手足口病优势病原体较前发生了明显变化,且重症病例所占比率明显下降,EV71型病毒疫苗值得推广应用。需进一步开展非EV71/CoxA16肠道病毒的分型检测,为手足口病的防治提供更加有力的依据。

非EV-71和非CV-A16肠道病毒的流行病学现状分析

肠道病毒(EV)是人类最常见的病原体,常引发大规模的疾病,如:手足口病、疱疹性咽峡炎、心肌炎、脑炎、无菌性脑膜炎、急性弛缓性麻痹及急性弛缓性脊髓炎等神经系统和心肺疾病,且多感染5岁以下儿童,严重时可引起致命的并发症。近年来,非肠道病毒71型(EV71)和非柯萨奇病毒A组16型(CV-A16)肠道病毒流行强度逐渐增强,EV优势流行株逐渐发生了变化,及时掌握EV的病原学、流行病学、分子进化特征,对于EV的防控具有重要的意义。因此,本文对非EV71和非CV-A16肠道病毒所致疾病现状及分子流行病学进行阐述,以期对EV的防控产生一定的提示作用。

2010年盐城地区手足口病例肠道病毒型别调查

目的对盐城地区2010年手足口病患儿及其临床重症病例进行病原学调查。方法采集手足口病患儿咽拭子和肛拭子,对其病毒核酸进行肠道病毒检测定型。结果 481例(含重症52例)患儿采集的咽拭、肛拭标本中,共检测出病毒核酸阳性326例,阳性率为67.78%,其中CA16型44例(13.50%)、EV71型179例(54.91%)、未定型103例(31.59%)。52例重症病例中共检测出病毒核酸阳性45例,阳性率为86.54%,其中EV71型32例(71.11%)、未定型13例(28.89%)、CA16型0例。326例病毒核酸阳性患儿中男214例,女112例;45例病毒核酸阳性重症患儿中男33例,女12例。结论盐城地区手足口病患儿检测到的主要病原体是CA16和EV71等,EV71感染率高于CA16感染率,肠道病毒EV71是引起重症病例的主要病原体。

2016年至2017年广州市手足口病流行病学及非肠道病毒A组71型非柯萨奇病毒A组16型肠道病毒型别分析

目的了解2016年至2017年广州市手足口病流行病学及非肠道病毒A组71型(enterovirus 71, EV-A71)病毒非柯萨奇病毒A组16型(coxsaekievirus group A 16,CV-A16)病毒的分子流行病学特征,为其治疗和防控提供依据。方法运用荧光反转录-PCR对2016年至2017年疑似手足口病患者标本同时进行EV通用型、EV-A71、CV-A16检测,并选取EV-A71和CV-A16是阴性而EV通用型是阳性的标本进行型别鉴定,设计5′非编码区(UTR)引物,RT-PCR扩增后进行序列测定,用BLAST程序进行序列的EV型别确定。结果2016年至2017年同时进行EV通用型、EV-A71型、CV-A16型3类病毒的疑似手足口病例标本共25 779份,总阳性16 300份,阳性率为63.23%;其中EV-A71阳性1 178份,占4.57%;CV-A16阳性3 274份,占12.70%;非EV-A71非CV-A16EV阳性标本11 848份,占45.96%。2017年非EV-A71非CV-A16EV全年平均检出率(55.68%)比2016年检出率(35.14%)更高。95份非EV-A71非CV-Al6阳性标本的序列分析结果有16种型别,分别为CV-A6、CV-A10、CV-A4、CV-A2、CV-A8、CV-A12、CV-A9、CV-B5、CV-B2、CV-B4、CV-B3、E1、E16、E30、E2和E18,其中CV-A6占主,(26.32%),其次是CV-A10(15.79%),这两种病毒占到非EV-A71非CV-A16EV的42.11%。结论2016年至2017年EV-A71感染较低,2016年4月至7月CV-A16存在一个感染小高峰。2016年至2017年手足口病主要以非EV-A71非CV-A16为主,序列分析表明非EV-A71非CV-A16中以CV-A6和CV-A10为主,应加强对以CV-A6、CV-A10为主的非EV-A71非CV-A16的研究及监测。

2010年合肥儿童手足口病病例肠道病毒血清基因型分析

目的：对合肥地区2010年5～7月儿童手足口病流行期间的手足口病患儿进行病原学调查.方法：采集手足口病患儿的疱疹液、粪便、咽拭子进行病毒分离;分离的病毒接种非洲绿猴肾细胞（Vero）后待细胞病变（CPE）达到＋＋＋＋以上后提取RNA.分别用EV71和CA16的VP1基因的特异性引物进行RT-PCR鉴定,并根据血清型不同比较其临床特征.结果：77例患儿采集的标本中65例分离到病毒；经RT-PCR检测发现其中47例CA16阳性,18例为EV71,比例为2.6∶1.CA16感染和EV71感染在患者的年龄大小、症状轻重等方面无显著统计学差异.结论：手足口病患儿检测到的主要病原是CA16和EV71,两者感染对临床的影响无显著差异.

肠道病毒、EV71及CoxA16多重PCR检测方法的研究

目的建立多重聚合酶链反应(multiplex polymerase chain reaction)方法,检测手足口病患者粪便、咽拭子标本中的肠道病毒(Pan-enterovirus,PE)、肠道病毒71型(Enterovirs71EV71)和柯萨奇病毒A组16型(Coxsachie virus,CoxA16)。方法设计3对寡核苷酸引物,分别在同一体系中扩增PE、EV71及CoxA16特异性基因片段,优化反应体系,测定该方法的灵敏性,并用乙型脑炎病毒、轮状病毒、单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型检测其特异性。结果对临床标本作多重PCR检测,EV71(+)标本可见264bp和440bp两条特异性条带,CoxA16(+)标本可见440p、550bp两条特异性条带,PE(+)EV71(-)CoxA16(-)标本可见440bp1条特异性条带。病毒cDNA最低检出浓度分别为4.78、2.36和43.27μg/ml。提取乙型脑炎病毒、轮状病毒、单纯疱疹病毒Ⅰ、Ⅱ型核酸,进行同体系、同条件多重PCR扩增,均为阴性。结论多重PCR方法能在一个反应体系和反应条件下同时检测PE、EV71、CoxA16,且特异性强,灵敏度高,可用于手足口病的临床诊断和流行病学调查。

手足口病患儿EV71/CA16-DNA肠道病毒检测感染情况临床分析

为研究分析手足口病患儿EV71/CA16-DNA肠道病毒检测感染情况,将确诊为手足口病的160例患儿作为研究对象,通过患儿咽拭子、肛拭子以及粪便标本对患儿EV71以及CA16-DNA肠道病毒进行特异性核酸检测,对手足口病患儿的流行特征进行临床分析。结果:比较四季EV71以及CA16-DNA肠道病毒分布情况差异具有统计学意义(P<0.05),其中春季EV71以及CA16-DNA肠道病毒分布最多,分别为39.36%和37.88%,其次是冬季,分别为26.60%和27.27%。比较EV71以及CA16-DNA肠道病毒的年龄分布差异具有统计学意义(P<0.05),其中12~23个月患儿EV71以及CA16-DNA肠道病毒的年龄分布最多。比较EV71以及CA16-DNA肠道病毒的性别分布差异具有统计学意义(P<0.05),男性患儿EV71肠道病毒感染居多,女性患儿CA16-DNA肠道病毒居多。结果表明,手足口病患儿肠道病毒感染类型以EV71为主,其中以春冬季发病为主,以12~23个月男性儿童为高发年龄,儿童聚集环境应及时通风消毒。

RT-PCR检测运城市手足口病患儿肠道病毒结果分析

目的了解本地区手足口病病毒感染情况,为临床医师治疗手足口病提供基础数据。方法选取我院感染性疾病科收治的手足口病患儿86例,用实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测患儿咽拭子肠道病毒通用型（EV）、肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A组16型（CA16）。结果 EV、EV71、CA16阳性率为分别为44.2%,20.9%,3.5%;男女患儿EV、EV71、CA16阳性率分别为44.4%和43.9%,17.8%和24.4%,2.2%和4.9%;〈1岁手足口病患儿,EV、EV71、CA16阳性率分别为46.2%,7.7%,0%;1岁-2岁患儿,EV、EV71、CA16阳性率分别为37.2%,20.9%,2.3%;≥2岁患儿,EV、EV71、CA16阳性率分别为53.3%,26.7%,6.7%。结论运城市手足口病病原以EV71型为主,女患儿EV71感染阳性率高于男患儿,≥2岁患儿病毒检出阳性率最高。

手足口病患者肠道病毒感染特征分析

目的文章主要针对手足口病患者肠道病毒感染情况进行调查分析,指导临床疾病预防和控制。方法收集183例手足口病患儿临床资料及标本,样本经前处理后提取RNA,采用荧光PCR试剂盒检测EV71、CA16以及其他肠道病毒,并对结果进行统计学分析。结果2017年确诊的183例手足口病患儿中,肠道病毒阳性86例,其中EV71感染46例(占53.49%),CA16感染27例(占31.40%),其他肠道病毒感染1313例(占15.12%);0-岁组51例(占59.3%),1-岁组13例(占15.12%),3-岁组22例(占25.58%),0-岁组与其他组相比,差异有统计学意义(χ2=5.9535,P=0.0147)。男性患儿57例(占66.28%),女性患儿29例(占33.72%),男、女性差异有统计学意义(χ2=18.2326,P=0.000)。57例肠道病毒感染手足口病男性患儿中,EV71感染33例,CA16感染16例,其他肠道病毒感染8例;29例女性患儿中,EV71感染13例,CA16感染11例,其他肠道病毒感染5例。春季感染患者31例(36.05%),夏季感染患者17例(19.77%),秋季感染患者14例(16.28%),冬季感染患者13例(27.91%),差异有统计学意义(χ2=13.3953,P=0.0003)。手足口病发热、手部皮疹、足疹、口腔疱疹、住院患者各73例(84.88%)、65例(75.58%)、62例(72.09%)、54例(62.79%)、17例(19.77%),平均住院时间5d。结论手足口病患儿肠道病毒感染类型以EV71为主,以0~岁、男性患儿多发,且以春季为发病高峰期,主要临床表现有发热、皮疹等。

EV71非结构蛋白的结构和功能及其为靶点的药物研究进展

近年肠道病毒71型(EV71)等引起的手足口病在中国大陆呈现上升的流行趋势,其正链的RNA基因组翻译成一个多聚蛋白,进一步自剪切为结构蛋白和非结构蛋白;随着研究的深入,非结构蛋白在病毒生命周期中的功能逐一被鉴定,本文就EV71非结构蛋白的结构功能及针对这些靶点的抗病毒药物进行综述。

菏泽市2013～2017年手足口病病毒学监测分析

目的探讨菏泽市2013~2017年手足口病流行病毒类型,为菏泽市手足口病疫情的防控和实施策略提供科学依据。方法 2013~2017年菏泽市各县区手足口病定点医疗单位收集的临床诊断病例的粪便或肛拭子标本,提取病毒核酸,应用实时荧光定量PCR进行病毒的核酸检测;用描述性流行病学方法分析流行病学特征。结果2013~2017年共收集样本2751份,其中阳性样本2294份,阳性率为83.39%;EV71阳性样本1111份,阳性率为40.39%;CA16阳性样本387份,阳性率为14.08%;其他肠道病毒阳性样本796分,阳性率为28.93%。2013年、2015年优势株为EV71;2014年优势株为CA16;2016、2017年以其他肠道病毒型为优势株。不同年龄组、性别、季节分布差异有显著性(P<0.05)。各年手足口病毒型别分布差异有统计学意义(P<0.05)。结论 2013~2017年菏泽市手足口病流行病毒类型从高到低分别是EV71、其他肠道病毒和CA16。EV71是引起重症病例的主要病原体。在高发季节前,应加强托幼机构及散居儿童的卫生健康教育和防控力度,提前做好低幼儿童的疫苗宣传及接种工作;强化手足口病监测力度。

2011~2013年某市手足口病标本病毒检测结果分析

目的对2011~2013年某市手足口病病例的不同标本进行病原体检测和分析,了解到本市的手足口病感染状况。方法对临床诊断为手足口病的患者的粪便标本460份,咽拭子标本549份(EV阳性345份,EV71阳性23份,CA16阳性13份),用RT-PCR是实时荧光定量PCR检测肠道通用病毒、CVA16和EV71,华山的急性期血清采用酶联免疫吸附试验检测EV71和CAV16的IgM抗体。结果患者的粪便标本肠道病毒总阳性率为82.26%(378/460),CVA16的阳性率为37.40%(172/460),EV71的阳性率为25.41%(116/460),其他肠道病毒为19.66%(90/460),CVA16行阳性率高于EV71。粪便标本的肠道病毒阳性率高于咽拭子的38.75%(345/549)(x2=27.01,P<0.01)。发病年龄多为1~5岁,主要集中在3岁左右,男性患者多余女性患者。对手足口病病例的急性期血清进行酶免疫检测,EV71和CVA16的阳性率分别为28.70%(31/108)和33.33%(36/108),和粪便标本的阳性率的核酸检测比较,有较高的相关性。结论2011~2013年度本市的手足口病疫情以肠道病毒通用型为主,粪便标本的阳性率较高,急性期血清的免疫实验结果和分子生物系相符,采用分子生物学方法检测手足口病的病原体,用酶联免疫吸附试验检测血清抗体,对手足口病的诊断有重要作用。

肠道病毒71型北京分离株VP4基因序列及蛋白抗原性分析

为探讨肠道病毒71型（EV71）VP4基因序列与手足口病（HFMD）不同临床类型之间的关系,分析重组蛋白EV71 VP4的抗原性,并初步探讨其与柯萨奇病毒A16（CA16）重组蛋白VP4是否存在交叉反应性,对2007~2009年从北京患HFMD儿童标本分离到的10株EV71的VP4基因进行克隆测序,运用生物学软件对测序结果进行比较分析,并选择其中1株与1株同期分离的CA16的VP4分别进行原核表达;用表达产物对189份正常体检的成人及来首都儿科研究所就医的非HFMD患儿血清中的IgG进行Western Blot检测,并分析14份确诊为EV71感染和12份CA16感染患者急性期血清中的IgM抗体。分析表明这10株EV71 VP4基因核苷酸同源性为94.20%~100.00%,所推导的氨基酸序列则完全相同,从重症与轻症患儿分离的毒株之间VP4的核苷酸序列未见一致性的差异,基于EV71 VP4基因核苷酸序列的进化树分析表明2007~2009年北京地区所流行的毒株均属于C4亚型;本研究中EV71和CA16的VP4核苷酸序列的同源性为69.60%,所推导的氨基酸序列的同源性为78.60%,在运用Western Blot检测189份血清中的VP4特异性IgG时,EV71 VP4的血清阳性率为38.10%,说明其具有良好的抗原性,CA16 VP4的血清阳性率为58.20%,两者差别具有显著统计学意义（2χ=15.30,P〈0.01）,提示EV71 VP4与CA16 VP4没有交叉反应性;在用表达的VP4检测已确诊为相应病毒的特异性IgM时,两者皆为阴性,提示感染后机体对VP1和VP4产生不同的反应。

2022—2023年新冠疫情期间及疫情后手足口病流行病学及分型分析

目的对比了解2022—2023年新冠疫情期间及疫情后广州市和佛山市手足口病流行病学及非肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)非柯萨奇病毒A组16型(Coxsaekievirus group A 16,CA16)病毒的分子流行病学特征,为治疗和防控提供依据。方法运用荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)对2022—2023年疑似手足口病患者标本同时进行肠道病毒(enterovirus,EV)通用型、EV71、CA16检测,并选取EV71和CA16是阴性而EV通用型是阳性的标本进行型别鉴定,设计5′非编码区(UTR)引物,RT-PCR扩增后进行序列测定,序列用BLAST程序进行序列的EV型别确定。结果2022年,同时进行EV通用型、EV71、CA163种病毒检测的疑似手足口病例标本共362份,总阳性47份,阳性率为12.98%;其中EV71阳性0份;CA16阳性5份,占1.38%;非EV71非CA16的EV阳性标本42份,占11.60%。2023年,同时进行EV通用型、EV71、CA163种病毒检测的疑似手足口病标本有297份,总阳性100份,阳性率为33.67%,全年没有检出EV71,CA16全年检出率为2.36%(7/297),非EV71非CA16的EV阳性率为31.31%(93/297)。51份非EV71非CA16阳性标本的序列分析表明,2022—2023检出的非EV71非CA16的EV有9种型别,分别为:CA6、CA10、CA4、CA2、CA8、柯萨奇病毒B组5型(CB5)、CB2、CB3、埃可病毒30型(E30),其中CA6占主要,为27.45%(14/51),其次是CA10,占15.69%(8/51)。结论新冠疫情结束后的2023年比疫情期间的2022年EV阳性率高。2022—2023年手足口病主要以非EV71非CA16为主,序列分析表明非EV71非CA16病毒中以CA6和CA10为主,应加强对CA6、CA10为主要非EV71非CA16病毒进行研究及监测。

实时荧光定量PCR在手足口病病原体检测中的应用

目的应用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测手足口病的病原体,并通过与病毒学培养法和ELISA法的比较,评价该法对诊断小儿手足口病感染的价值。方法临床315例手足口病疑似患者和66例手足口病密切接触者的粪便、咽拭子、疱疹液和血清标本,分别采用肠道病毒通用型(EV)和肠道病毒71型(EV71)以及柯萨奇病毒A组16型(CA16)的特异引物进行FQ-PCR检测,随机选30例进行病毒学培养,并结合ELISA法检测结果进行比较。结果 315例手足口病疑似组FQ-PCR法检测到EV阳性率为72.7%(229/315),ELISA法检测到EV阳性率为40%(126/315);66例手足口病密切接触组FQ-PCR法检测到EV阳性率为34.5%(23/66),ELISA法检测到EV阳性率为18.2%(12/66);FQ-PCR法与病毒学培养结果符合率为100%。结论咽拭子标本较适合于FQ-PCR检测手足口病病原体的检查,FQ-PCR是一种敏感性高、特异性好、速度快的检测手足口病病原体的方法,对手足口病病原体的及时检测和流行病学观察都具有重要作用。

泰安市2010～2012年手足口病不同标本检测结果分析

目的对2010～2012年度泰安市手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)病例的不同标本进行病原体检测和分析,了解本区域HFMD感染状况。方法对临床诊断为手足口病病例的粪便标本1356份、咽拭子68份、脑脊液156份,用RT-PCR和实时荧光定量PCR检测肠道通用病毒(PE)、CVA16和EV71,病人的急性期血清采用酶联免疫吸附试验(ElISA)检测EV71和CVA16的IgM抗体。结果粪便标本肠道病毒总阳性率为81.86%(1110/1356),CVA16阳性率为37.17%(504/1356),EV71阳性率为25.66%(348/1356),其他肠道病毒为19.03%(258/1356),CVA16的阳性率高于EV71。粪便标本的肠道病毒阳性率高于咽拭子的39.70%(27/68)(χ2=27.05,P<0.01)。发病年龄多为1～5岁,主要集中在3岁左右,男性略多于女性,脑脊液的检出率较低,总阳性率为7.69%。对病例的急性期血清进行酶免检测,EV71和CVA16的阳性率分别为28.57%(28/98)和33.57%(33/98),和粪便标本的核酸检测相比较,有较高的相关性。结论 2010～2012年度本区域的手足口病疫情以CVA16为主,粪便标本的阳性率较高,急性期血清的免疫试验结果和分子生物学相符,采用分子生物学方法检测手足口病的病原体,用ElISA检测血清抗体,对手足口病的诊断有重要作用。