非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G通过Akt信号通路促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨非染色体结构维护凝集素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)调控卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭的机制。方法生物信息学GEPIA数据库分析NCAPG在卵巢癌组织中的差异表达。Western blotting检测正常卵巢上皮细胞IOSE80、卵巢癌A2780和SKOV3细胞中NCAPG的蛋白表达。NCAPG siRNA沉默实验分为空白组、对照组、siNCAPG-1组和siNCAPG-2组。NCAPG过表达实验分为空白组、对照组、NCAPG组、NCAPG+MK2206组和MK2206组。MTT实验检测细胞增殖活性;细胞划痕实验和Transwell实验评估细胞的迁移和侵袭能力;Western blotting检测细胞的磷酸化Akt(p-Akt)、总Akt(t-Akt)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达水平。结果NCAPG在卵巢癌组织和卵巢癌细胞中高表达。沉默NCAPG可明显抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖、迁移和侵袭,p-Akt、PCNA、MMP-9、vimentin和N-cadherin表达减少,E-cadherin表达增多。过表达NCAPG质粒可促进卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和侵袭,p-Akt、PCNA、MMP-9、vimentin和N-cadherin表达增多,E-cadherin表达降低。Akt抑制剂MK2206可明显抑制NCAPG的上述作用。结论NCAPG激活Akt信号通路,调控PCNA、MMP-9和上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白的表达,促进卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

非染色体结构维护亚基凝聚素Ⅰ复合物亚基G在消化系统恶性肿瘤中的研究进展

非染色体结构维护亚基凝聚素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)是一种有丝分裂相关的染色体凝缩蛋白,主要参与细胞分裂过程中染色体的凝聚和稳定。近年来,越来越多的研究发现,NCAPG在多个肿瘤中作为促癌基因发挥促进细胞增殖、侵袭、转移等生物学效应,其与消化系统恶性肿瘤(包括肝癌、胃癌及结直肠癌)的发生、发展密切相关,可作为促癌基因影响肿瘤患者的总体预后并调控其细胞生物学行为。本文对NCAPG在多种消化系统恶性肿瘤中的研究进展进行综述。

凝聚素Ⅰ复合物亚基G促进小鼠胃腺癌发展、诱导免疫逃逸

[目的]为研究凝聚素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)对胃腺癌发展及免疫逃逸相关因子的影响,通过干扰NCAPG后,观察胃腺癌AGS细胞的在体内外的变化,以期为胃腺癌的治疗提供新思路。[方法]将裸鼠和AGS细胞均分为3组:对照组、si-NC组和si-NCAPG组。采用CCK-8检测细胞增殖情况。采用实时定量PCR检测临床IL-2、IFN-γ、TNF-α和PD-L1 mRNA的表达水平。采用免疫组化法检测肿瘤组织中Ki-67的表达水平。采用流式技术检测NCAPG对AGS细胞凋亡的影响。通过蛋白免疫印迹实验检测PI3KAKT蛋白表达水平。[结果]与对照组和si-NC比较,si-NCAPG组的裸鼠体内肿瘤组织生长速度最慢,Bax/Bcl-2比值升高,Ki-67表达降低,IL-2、IFN-γ、TNF-α的mRNA水平升高,PD-L1的mRNA水平降低,PI3K和AKT蛋白的磷酸化水平降低(P<0.05)。与对照组和si-NC比较,si-NCAPG组的细胞增殖倍数最低、凋亡率最高,IL-2、IFN-γ、TNF-α的mRNA水平升高,PD-L1的mRNA水平降低,PI3K和AKT蛋白的磷酸化水平降低(P<0.05)。[结论] NCAPG可促进胃腺癌的发生及诱导免疫逃逸,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路相关。

miR-150-5p与NCAPG的靶向关系及其对肝细胞肝癌Huh7细胞的抑制作用

目的:探究miR-150-5p与非SMC凝聚体Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)的靶向关系及其对肝细胞肝癌(HCC)细胞生物学功能的影响,为HCC的临床诊断和治疗提供潜在靶点。方法:通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-150-5p与NCAPG的靶向关系。将HCC Huh7细胞根据转染质粒不同分为模拟物阴性对照(mimic NC)组、miR-150-5p模拟物(miR-150-5p mimic)组、miR-150-5p模拟物+过表达阴性对照(miR-150-5p mimic+ovNC)组和miR-150-5p模拟物+过表达NCAPG(miR-150-5p mimic+ovNCAPG)组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中NCAPG mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中NCAPG蛋白表达水平,5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)实验检测各组细胞EdU阳性率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Transwell实验检测各组细胞中迁移和侵袭细胞数。将裸鼠分为agomiR-NC组、agomiR-150-5p组、agomiR-150-5p+过表达阴性对照(agomiR-150-5p+ovNC)组和agomiR-150-5p+过表达NCAPG(agomiR-150-5p+ovNCAPG)组,Huh7细胞皮下成瘤,检测各组裸鼠肿瘤体积和质量。结果:双荧光素酶报告基因实验证实NCAPG是miR-150-5p的靶基因。与mimic NC组比较,miR-150-5p mimic组Huh7细胞中NCAPG mRNA和蛋白表达水平及EdU阳性率明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.05);与miR-150-5p mimic+ovNC组比较,miR-150-5p mimic+ovNCAPG组Huh7细胞中NCAPG mRNA和蛋白表达水平及EdU阳性率明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加(P<0.05)。与agomiR-NC比较,agomiR-150-5p组裸鼠Huh7细胞移植瘤体积和质量明显减少(P<0.05);与agomiR-150-5p+ovNC组比较,agomiR-150-5p+ovNCAPG组裸鼠Huh7细胞移植瘤体积和质量明显增加(P<0.05)。结论:miR-150-5p通过靶向结合抑制NCAPG表达进而抑制HCC细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤生长,促进细胞凋亡。

NCAPG基因的表达上调促进肺腺癌细胞增殖并与不良临床预后相关

目的探究非SMC凝聚素I复合亚基G(NCAPG)基因在肺腺癌组织中的表达以及与临床预后的相关性和其分子机制。方法2017年1月至2019年12月在连云港市第二人民医院确诊并接受手术治疗的肺腺癌患者的肿瘤组织及邻近正常组织110份。使用TCGA数据库分析NCAPG基因表达与肺腺癌患者预后的关系。使用免疫组织化学(IHC)评估NCAPG在110个肺腺癌组织和正常组织中的表达。使用慢病毒介导的shRNA获得稳定敲低NCAPG的肺腺癌的细胞系。采用CCK-8和集落形成实验研究NCAPG对肺腺癌细胞系(A549,H1975)增殖能力的影响。通过蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)和共表达分析探究NCAPG的共表达基因,并使用免疫共沉淀(CO-IP)验证。采用Log-rank方法判定总生存期(OS)和无病生存期(DFS)的统计差异,采用卡方检验评估110例患者的临床病理特征和NCAPG的表达之间的相关性。结果NCAPG在TCGA肺腺癌数据库和110个肺腺癌组织中上调,并且与肺腺癌患者的肿瘤大小(P=0.048)和临床分期(P=0.021)有关。此外,敲低NCAPG抑制了肺腺癌细胞增殖和生长。机制上,我们进一步发现细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)与NCAPG具有表达相关性,并相互结合,共同促进了肺腺癌的进展。结论NCAPG可以用作肺腺癌预后不良的标志物和肺腺癌治疗的潜在靶点。

NCAPG在恶性肿瘤中的研究进展

非染色体结构维护亚基(SMC)凝聚素Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)是一种有丝分裂相关的染色体凝缩蛋白,广泛存在于真核细胞中。NCAPG在多种癌症中异常表达,且通过相关分子机制与肿瘤细胞的侵袭、转移、凋亡及耐药等过程密切相关。随着对NCAPG与肿瘤关系研究的不断深入,显示其可能成为新的肿瘤标志物与治疗靶点。本文主要就NCAPG基因对肿瘤发生发展的影响及其作用机制做简要综述。