Chelex-100法快速提取革兰氏阳性杆菌基因组DNA

目的探索一种快速、高效提取革兰氏阳性杆菌基因组DNA的方法。方法采用Chelex-100法提取14株革兰氏阳性杆菌的基因组DNA,利用PCR技术扩增16SrRNA基因及4个单拷贝管家基因以评价提取核酸的质量。结果 Chelex-100法能够在20min内从革兰氏阳性杆菌中提取出基因组DNA,所提取的DNA可直接用于PCR扩增。所有菌株的16SrRNA基因及棒状乳杆菌的4个单拷贝管家基因均扩增成功,PCR产物经电泳检测目的条带清晰特异,与预期目的片段长度相符。结论 Chelex-100法具有快速、高效、安全、经济的特点,采用这种方法提取的革兰氏阳性杆菌的基因组DNA可直接作为PCR扩增的模板。

一种快速高效提取革兰氏阳性菌微杆菌基因组DNA的新方法

[目的]探索可以快速从革兰氏阳性菌微杆菌中提取高质量基因组总DNA的新方法。[方法]采用3种不同方法提取微杆菌基因组DNA,并进行DNA纯度、完整度鉴定及16SrDNA扩增检测。[结果]紫外吸收结果表明,采用改良方法所获DNAA260/A280大于1.80,A260/A230为2.0,5ml过夜菌液可得6.5μg基因组总DNA。DNA凝胶电泳结果表明,DNA完整度高且无RNA污染。以此方法提取的基因组总DNA样品为模板,可灵敏有效地扩增16SrDNA基因。[结论]该方法用时短,操作简易,纯度好、产率高、成本低,适用于革兰氏阳性菌各相关的分子生物学研究。

革兰氏阳性球菌和革兰氏阴性杆菌菌血症的临床对比

目的：比较革兰氏阳性球菌菌血症和革兰氏阴性杆菌菌血症的临床特点，进一步指导菌血症的诊断和治疗。方法：139例菌血症患者按血培养结果分为革兰氏阳性球菌菌血症组（A组）和革兰氏阴性杆菌菌血症组（B组），分别对两组的年龄、体温、白细胞计数、原发感染灶进行分析、比较。结果：A组的平均年龄较小，与B组比较差异有明显差异（P〈0．05）；两组的体温、白细胞计数比较无明显差异（P〉0．05）；两组原发感染灶的构成比比较显示：尿路感染灶的构成比比较有明显差异（P〈0．05）；皮肤、黏膜感染灶的构成比比较有明显差异（P〈0．05）；中心静脉导管感染灶的构成比比较有非常明显差异（P〈0．01）。结论：鉴别诊断革兰氏阳性球菌菌血症和革兰氏阴性杆菌菌血症，以便更好地指导临床抗感染治疗。

山羊支原体、革兰氏阳性杆菌、附红细胞体混合感染的实验室诊断

为查明某养殖小区饲养山羊的死亡原因,采集13份病羊的血清、2头病死羊的内脏病料和血涂片进行实验室检测诊断。结果:布鲁氏杆菌虎红平板凝集试验阳性率为0%(0/13);羊口蹄疫病毒非结构蛋白抗体阳性检出率为0%(0/13);山羊痘病毒血清免疫抗体阳性检出率为61.5%(8/13);山羊支原体阳性检出率为100%(2/2);姬姆萨染色镜检可见边缘不整齐的红细胞;细菌分离培养、革兰氏染色镜检出革兰氏阳性杆菌,分离细菌对氟苯尼考、利福平、多西环素敏感。结果表明:养殖小区山羊死亡原因是由山羊支原体、革兰氏阳性杆菌、附红细胞体混合感染所致。

舒普深及常用抗生素对革兰氏阳性球菌和革兰氏阴性杆菌药敏实验结果比较

甘肃省中医药研究院在1994-2006年来的一些特殊病史的菌株和日常工作中分离出来的致病菌株,进行了舒普深、先锋必和临床日常用的具有一定抗菌活性的抗生素进行革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性杆菌的药敏试验。舒普深对革兰氏阳性球菌和革兰氏阴性杆菌都较其他抗生素敏感程度有显著的差异。它是一种对革兰氏阳性球菌和革兰氏阴性杆菌耐药菌株抗菌力强的抗菌活性的抗生素,虽然舒普深价值较高,但它较短时间内就可以治愈感染引起的多种疾病,是临床工作中非常需要的抗生素。现在厌氧菌的致病率也很高,更促使在厌氧菌药物敏感试验中进一步的证实舒普深对厌氧菌的抗菌活性,为临床在治疗厌氧菌所致的疾病中提供作用,提高医院防病治病的能力奠定更广泛的治疗基础。

应用16 S rRNA基因序列分析快速鉴定临床标本中的革兰氏阳性杆菌

目的探索一种快速鉴定临床标本中革兰氏阳性杆菌的方法。方法利用PCR技术扩增待检菌株的16 S rRNA基因序列,通过分析待检菌株的16 S rRNA基因序列对其进行鉴定。结果 5株待检菌株的16 S rRNA基因序列均成功扩增,其中4株的16 S rRNA基因序列与基因库中已注册的核酸序列相似率达99.9%以上,将其鉴定到种的水平,1株的16 S rRNA基因序列与基因库中雷弗森菌属的核酸序列相似率为97.09%,将其鉴定为雷弗森菌属。结论应用16 S rRNA基因序列分析可快速、准确地鉴定临床标本中的革兰氏阳性杆菌。

革兰氏阳性杆菌引起颏部阶梯截骨前移术后感染的经验和教训

目的:通过1例颏部阶梯状截骨术治疗严重小颏畸形术后感染患者的治疗,分析感染可能发生的原因和治疗措施,为临床颏部整形工作提供经验教训,提醒临床医师重视临床少见的革兰氏阳性杆菌引起的感染。方法:对1例小颏畸形患者进行颏部阶梯状截骨手术,术后1个月左右出现感染,通过细菌培养,彻底清创,全身抗炎治疗和局部换药进行治疗,并对感染发生的原因进行分析。结果:致病菌为革兰氏阳性杆菌,死腔、发育不良、口腔卫生差是感染发生的可能原因。治疗后感染得到良好控制,外形较术前明显改善。结论:死腔、异物和全身发育不良或局部卫生条件差会增加感染的几率。

枯草芽孢杆菌表达系统研究进展

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的研究已有百年历史,但前期工作仅限于分离鉴定、形态观察和功能鉴定。枯草芽胞杆菌是一类属于芽孢杆菌属的革兰氏阳性细菌,其粒径大小为(0.8~1.2)微米×(1.5~4.0)微米,主要存在于土壤和腐败的有机物中,是一类杆状好氧细菌,也是一种常见的蛋白表达宿主,具有易培养、无致病性、发酵工艺完善等优点,可用于多种工业酶的高效表达。然而,枯草芽胞杆菌的高效表达体系还不够理想。本文对枯草杆菌高效表达体系的研究进展进行了综述,以期为该菌株的高效表达奠定基础。

用若丹明123与二醋酸荧光素快速测定分枝杆菌属和革兰氏阳性菌的药物敏感性

依据细菌的生长与代谢特点已有多种快速测定细菌对药物敏感性的方法。但设备昂贵或不能用于革兰氏阳性菌及分枝杆菌的检测。作者发现用若丹明123测定细菌的膜电位可作为细菌具有活力的良好指标。此外,用二醋酸荧光素(FDA)

一种适合芽孢杆菌质粒DNA提取的改良碱裂解法

以Birnboim和Doly的质粒提取方法为基础 ,通过缩短菌体培养时间 ,增加菌体收集量 ,并对提取过程中所用的三种主要溶液的用量进行适当调整等 ,摸索出质粒提取的一种改良碱法 .用改良后的碱法对浸麻芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌进行质粒提取 。

标准三联、四联及序贯疗法治疗幽门螺旋杆菌阳性消化性溃疡的效果比较

幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori，Hp）是存在于胃黏膜组织中的一种微需氧的革兰氏阴性菌。Hp感染是绝大部分溃疡病患者的首要致病因素，控制和根治Hp可以有效改善溃疡愈合时间并减少溃疡复发。本次研究探讨标准三联、四联及序贯疗法治疗幽门螺旋杆菌阳性消化性溃疡的效果差异。报道如下。

革兰氏阳性菌的脂磷壁酸——Ⅱ变形链球菌脂磷壁酸的粘附作用

细菌致病的先决条件之一是先要粘附到靶器官上,这一过程与细菌胞壁成份密切相关,而只有将胞壁研究深入到分子水平才能真正揭示细菌的粘附本质。脂磷壁酸(LTA)为变形链球菌胞壁成份之一,关于其粘附作用尚无定论。1970年wicken和knox首次从口腔发酵乳杆菌(L.fermentum)中分离LTA。1974年Vanaght和Bleiveis从变形链球菌(S.mutans BHT)中分离LTA。随着免疫学的兴起,作为细菌表面重要抗原之一的LTA的研究得到了迅速发展。LTA在细菌粘附形成牙菌斑过程中的作用被学者们所关注,并进行了多方面研究。本文拟通过介绍LTA在变形链球菌粘附中作用的主要学说,使对LTA的粘附作用有一概括了解。

乳酸芽孢杆菌在水产养殖中的用途

乳酸菌类（Lacticacidbacteria）是一种可以分解糖类产生乳酸的革兰氏阳性菌，可以厌氧、兼性厌氧生长。乳酸菌在饲料添加剂中具有重要的地位，在美国FDA公布的40多种饲用微生物中有近30种是乳酸菌。乳酸菌耐酸，在pH为3．0～4．5时仍可生长，适应于胃肠的酸性环境，足鱼肠道的正常菌群，在鱼体肠系统定植，

抗菌肽与革兰氏阳性菌的互作及其机制

抗菌肽(AMP)因其具有理化性质稳定、抗菌谱广、耐高温以及不易使靶菌株产生耐药性等特点,作为一种新型的抗菌剂被提出,有望成为饲料抗生素的理想替代品,具有广阔的应用前景。但是随着对AMP的深入研究,发现部分细菌能对AMP产生耐药性。目前,还没有对AMP对革兰氏阳性(G^+)菌芽孢的抗性机制进行深入的研究。AMP对G^+菌的抑菌机制还知之甚少。在本文中,我们对AMP对G^+菌的作用靶点、抑菌机制以及G^+菌对AMP产生的耐药性等方面进行了综述。

INACTINE PEN110化学处理灭活浓缩红细胞中的革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌

背景和目的血液中的细菌污染导致输血传播细菌感染一直是输血医学的热点问题。本项研究目的在于探讨INACTINE PEN110病原体去除法可否灭活浓缩红细胞中接种的细菌污染。本研究选用4种菌株，分别是：厌氧性革兰氏阳性产气荚膜杆菌和痤疮丙酸杆菌，这是2种被认为可以通过输血途径传播的细菌；以及约氏不动杆菌和鲁氏不动杆菌2种革兰氏阴性细菌，

产单核细胞李斯特菌p60蛋白N端肽聚糖结合基序在枯草芽孢杆菌中的表达

目的:构建产单核细胞李斯特菌胞外蛋白p60的N端肽聚糖结合基序(p60-N)表达载体,实现其在枯草芽孢杆菌中的分泌表达。方法:将目标基因克隆到表达载体pHT43中获得重组载体pHT43-p60-N,转化枯草芽孢杆菌WB800N获得重组工程菌株WB800N/pHT43-p60-N,在此基础上考察IPTG浓度、培养基、表达时间和温度等条件对目标蛋白表达的影响。结果:p60-N蛋白可在枯草芽孢杆菌中分泌表达,与鼠李糖乳杆菌形成的革兰阳性增强基(GEM)颗粒特异性结合,具有与天然蛋白类似的生物学活性。用GB培养基,在37℃下,加入终浓度为0.2 mmol/L的IPTG诱导12~20 h,表达量提高到28 mg/L。结论:实现了p60蛋白N端基序在枯草芽孢杆菌中的分泌表达,为进一步研究以该蛋白为基础的细菌样颗粒疫苗奠定了基础。

多粘类芽孢杆菌

多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa Ash,Priest & Collins)是一种产芽抱,具有固氮能力的革兰氏阳性细菌.多粘类芽孢杆菌及其代谢产物广泛应用于农业、医学,工矿业及废水处理等方面,美国环境保护署(EPA)已将其列为可商业上应用的微生物种类之一,此外我国农业农村部也将其列为免做安全鉴定的一级菌种。

地衣芽孢杆菌对畜禽的研究及前景

地衣芽孢杆菌是土壤中常见的一种兼氧型革兰氏阳性菌,通过对老陈醋、窑泥进行微生物分离筛选中也有所发现。地衣芽孢杆菌生命力极强,可在高温、酸性等严重影响自身生命活动的情况下,以内生孢子的形式来保护自身不受伤害。内生孢子可存活时间长(不消耗自身养分),当环境条件恢复正常时,其可变回活细胞,继续生长繁衍。地衣芽孢杆菌属于过路菌。