3种革兰氏阴性细菌及其L型内毒素含量的测定

本文采用鲎试剂对大肠杆菌（ＡＴＣＣ２５９２２）、伤寒杆菌、绿脓杆菌（ＡＴＣＣ７８５３）及它们的Ｌ型内毒素的含量进行测定。结果显示细菌型与细菌Ｌ型均具有内毒素，但细菌Ｌ型内毒素含量较细菌型低（约为１／３～１／２）。因此。

革兰氏阴性细菌感染患者血清内毒素检测临床探讨

目的：探讨细菌内毒素（ET）检测在革兰氏阴性细菌感染性疾病患者中的临床应用。方法对200例送细菌培养检测的患者，同时抽取血标本，采用鲎试剂动态浊度法对其行ET水平检测。结果送检标本中有112例ET水平＞0.030 EU／ml；39例患者标本培养检出细菌，革兰氏阴性菌（G－）24例，ET检测结果0.264±0.109 EU／ml，均＞0.115 EU／ml；革兰氏阳性菌（G＋）15例，ET结果0.023±0.025 EU／ml，两组比较，差异有统计学意义（t＝28.23，P＜0.05）。结论血液 ET升高与 G－菌感染有相关性，患者先行血 ET检测有利于对患者 G－菌感染早期诊断和治疗提供理论依据。

β-内酰胺类抗生素诱导革兰氏阴性菌释放内毒素对其疗效的影响

探讨β-内酰胺类抗生素在诱导革兰氏阴性菌释放内毒素 (L PS)及对感染动物保护效能方面的差异 ,旨在为临床上防治革兰氏阴性菌感染时正确选择抗生素提供实验依据。将 Wistar大鼠背部做 30 %TBSA( °)烫伤 ,创面立即涂铜绿假单胞菌 (PA10 3)悬液 1ml(1× 10 9CFU) ,72 h后制成大鼠烧伤创面脓毒症模型。烧伤脓毒症大鼠随机分为单纯抗生素治疗组、半乳糖胺 (Gal N)敏化后治疗组及爱兰苔胶 (CGN)封闭后治疗组。分别用亚胺培南 (IMP,5 mg)和头孢他啶 (CTZ,10 mg)单剂量腹腔注射 (i.p.)治疗 ,对照组施以等量无菌生理盐水 ,同时 ,敏化组加用 Gal N 5 0 mg i.p.,以增强大鼠对 L PS的敏感性 ,封闭组在敏化组的基础上加用 CGN 1mg i.p.,以阻断 L PS的生物学效应。于抗生素治疗前及治疗后 3、6及 9h抽静脉血 ,检测血中细菌浓度 ,血浆 L PS水平 ,并观察敏化组和封闭组大鼠 10 d后的死亡率。结果 IMP和 CTZ均能使大鼠血中菌量显著降低 ;IMP和 CTZ在杀菌过程中均能诱导 PA10 3释放大量 L PS,但 CTZ组血浆 L PS水平显著超过相应的IMP组 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1) ;与此同时 ,敏化组大鼠的死亡率 CTZ组明显高于 IMP组 (P<0 .0 5 ) ,而在封闭组 ,两者间的这种差异则消失 (P>0 .0 5 )。结果表明 ,同属β-内酰胺类的 IMP和

内毒素检测在上、下尿路革兰氏阴性杆菌感染中的诊断价值

目的：探讨内毒素在鉴别上、下尿路革兰氏阴性杆菌感染中的价值，为患者的早期诊断和治疗及抗生素的合理使用提供依据。方法采用动态浊度法检测患者尿液内毒素含量，同时进行尿培养；检测患者血液白细胞和 CRP水平。结果379例泌尿系革兰氏阴性杆菌感染患者中，上尿路感染132例，下尿路感染247例。上尿路革兰氏阴性杆菌感染组的WBC，CRP和内毒素水平分别为11.25（7.98，13.99）×10^9／L，81.36（76.64，83.50）mg／L和49.57（17.28，78.37）pg／ml，下尿路革兰氏阴性杆菌感染组的WBC，CRP和内毒素水平分别为10.24（7.94，12.24）×10^9／L，70.46（70.46，77.32）mg／L和21.18（21.18，37.31）pg／ml，上尿路革兰氏阴性杆菌感染组的 CRP和内毒素水平明显高于下尿路感染组，差异有统计学意义（P值均＜0.05）。ROC曲线分析，以39.7pg／ml为诊断 Cut-off值，内毒素用于分辨上、下尿路革兰氏阴性杆菌感染的敏感度为84.1％，特异度为90.3％。结论动态浊度法测定尿液内毒素含量具有速度快，操作简便等优点，在鉴别上、下尿路革兰氏阴性杆菌感染中具有重要价值。

抗生素诱导革兰氏阴性菌释放内毒素的机理及临床意义

抗生素诱导革兰氏阴性菌(GNB)释放游离内毒素(FLPS),已在体外得到证实,并发现与抗生素的作用机制、作用时间及抗生素浓度有关。大部分体内外研究证实,部分抗生素可 诱导GNB释放FLPS,使机体某些细胞因子产生过多,加重炎症反应及病情,但其临床意义尚需进一步研究。本文就抗生素诱导GNB释放FLPS的机理及临床意义的有关研究近况作一综述。

抗内毒素核心糖脂抗体防治革兰阴性细菌感染的研究现状

革兰阴性细菌（Ｇｒａｍｎｅｇａｔｉｖｅｂａｃｔｅｒｉａ，ＧＮＢ）感染仍然是当前临床医学中的一个令人棘手的难题，严重者并发症多，死亡率高。ＧＮＢ最主要的致病成分是位于细菌细胞壁上的内毒素。而临床上针对真正起主要致病作用的内毒素的治疗措施仍较少，效果也不...

革兰氏阴性菌肺炎低IgM血症患者血浆内毒素和血清CRP浓度的测定

测定２１例革兰氏阴性菌（ＧＮＢ）肺炎血清ＩｇＭ低下患者的血浆内毒素和血清ＣＲＰ浓度，并与２０例ＧＮＢ肺炎ＩｇＭ增高患者对照比较，结果显示：ＩｇＭ低下组的血浆内毒素和血清ＣＲＰ浓度均显著高于ＩｇＭ增高组（Ｐ均＜０．０１），血清ＣＲＰ浓度与血浆内毒素浓度呈正相关；血清ＣＲＰ和血浆内毒素浓度均与血清ＩｇＭ浓度呈负相关。提示血清ＩｇＭ可中和血浆内毒素，在ＧＮＢ肺炎时血清ＩｇＭ低下会加重内毒素对机体的损害。

杀菌/渗透增强蛋白及其对革兰阴性菌和细菌内毒素的抗御作用

杀菌/渗透增强蛋白(BPI)是主要存在于人和某些哺乳动物中性粒细胞中的一种相对分子质量为55×10~3的阳离子蛋白。天然BPI(nBPI_(55))及其酶解N端片段(nBPI_(25))以及重组完整BPI(rBPI_(55))和重组BPIN端片段(rBPI_(23))均可程度不同地与革兰阴性菌外膜脂多糖(LPS)或游离LPS类脂A区的疏水部分结合相互作用。此外,存在于LPS内核心和类脂A区的阴离子基团也对BPI及其功能性N端片段的结合起重要作用。体外和动物试验表明,完整BPI及其功能性N端片段不仅对革兰阴性菌具有广谱抑制和杀伤作用。而且还具有中和细菌内毒素(LPS)、抑制细胞因子释放和抗御内毒素致死效应等作用。

内毒素在革兰氏阴性杆菌感染中的诊断价值

目的探讨内毒素水平在革兰氏阴性杆菌感染中的临床价值。方法选取肺部感染或慢性肺部基础疾病合并肺部感染患者,以白假丝酵母菌组作为对照组,分析铜绿假单胞菌组、肺炎克雷伯杆菌组、鲍曼不动杆菌组、金黄色葡萄球菌组内毒素水平变化,评估不同类型革兰氏阴性杆菌产生内毒素差异。结果铜绿假单胞菌组、肺炎克雷伯杆菌组、鲍曼不动杆菌组与白假丝酵母菌组内毒素水平比较,差异具有统计学意义(P<0.05),金黄色葡萄球菌组与白假丝酵母菌组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论内毒素检测可作为诊断革兰氏阴性杆菌感染的快速简便的方法,同时也是评估病情变化及指导抗菌药物治疗的重要工具。

肺泡灌洗液革兰氏染色与内毒素检测对革兰氏阴性菌呼吸机相关性肺炎快速诊断的比较研究

目的通过比较肺泡灌洗液中内毒素检测与革兰氏染色对革兰氏阴性菌呼吸机相关性肺炎的诊断价值,探寻出一种更好的诊断革兰氏阴性菌呼吸机相关性肺炎的方法。方法 2014年10月至2016年1月入住本院综合ICU的呼吸机相关性肺炎患者,根据肺泡灌洗液中病原学结果,将其分为革兰氏阴性菌感染组(A组)和非革兰氏阴性菌感染组(B组)。采用鲎试剂的显色基质法,检测肺泡灌洗液内毒素含量,分析比较两组的内毒素水平;比较革兰氏染色为阴性菌(C组)和内毒素检测≥6 EU/ml组(D组)患者中革兰氏阴性菌呼吸机相关性肺炎所占的比例数;并采用受试者工作特诊曲线(ROC)分析泡灌洗液内毒素检测的灵敏度和特异度等。结果最终有65例患者纳入本研究,其中A组51例,B组14例,A组肺泡灌洗液中内毒素水平显著高于B组(P<0.05);D组中革兰氏阴性菌呼吸机相关性肺炎所占的比例显著高于C组(P<0.05);ROC曲线分析表明,以≥6 EU/ml为界点,肺泡灌洗内毒素检测革兰氏阴性杆菌脓毒血症的灵敏度95.9%,特异度68.7%,阳性预测值92.0%,阴性预测值77.8%,曲线下面积为0.857(P<0.05)。结论肺泡灌洗液内毒素检测是一种快速诊断革兰氏阴性菌呼吸机相关性肺炎非常有效的方法,其作用显著优于革兰氏染色法。

铅对革兰氏阴性菌内毒素脂多糖介导原代小胶质细胞氧化应激反应的影响

目的:通过观察乙酸铅[lead acetate,Pb(Ac)_(2)]对革兰氏阴性菌内毒素脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)介导大鼠原代小胶质细胞氧化应激反应的影响,探索中枢神经系统小胶质细胞对铅与内毒素产生的反应或后果。方法:随机将培养后的小胶质细胞分为阴性对照组(Control组)、LPS组(100 ng/ml LPS)、不同浓度Pb(Ac)_(2)组1(20、50、100μM)、LPS+Pb(Ac)_(2)组[20、50、100 μM Pb(Ac)_(2)+100 ng/ml LPS]及不同浓度Pb(Ac)_(2)组2(10、20、50、100、200、500、1000、2000μM),置37℃、5%CO_(2)培养箱中孵育24h或36h,采用光学或免疫荧光显微镜观察或鉴定细胞,用MTT法检测铅作用后细胞存活率,用Griess Assay检测细胞分泌一氧化氮(nitric oxide,NO)情况、Western blot检测诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达水平。结果:LPS单用介导小胶质细胞24 h后,可使NO、iNOS水平上调(P<0.05);LPS与Pb(Ac)2共孵育后,NO水平下调(P<0.05),且iNOS与NO有一致性下调趋势;细胞生长状况随着铅浓度增加而出现损害现象,如细胞聚集、胞膜不完整、轮廓不清、粘合成团,核仁模糊不清;小胶质细胞存活率随Pb(Ac)_(2)浓度的增加而下降。结论:LPS可导致原代小胶质细胞发生氧化应激反应,与Pb(Ac)_(2)合用见氧化应激产物下调,似乎呈“保护”作用,但细胞形态学及细胞存活率呈现不良变化,与NO或iNOS的减少有“分离现象”。

失血、烧伤、腹泻、呕吐、急性心肌梗塞泵功能衰竭，以及革兰氏阴性杆菌内毒素引起的休克分别叫什么休克？

答：失血、烧伤、腹泻、呕吐引起的休克为低血容量性休克；急性心肌梗塞泵功能衰竭引起的休克为心源性休克；革兰氏阴性杆菌内毒素引起的休克为中毒性休克，或感染性休克。

失血、烧伤、腹泻、呕吐。急性心肌梗塞泵功能衰竭，以及革兰氏阴性杆菌内毒素引起的休克分别叫什么休克？

答：失血、烧伤、腹泻、呕吐引起的休克为低血容量性休克；急性心肌梗塞泵功能衰竭引起的休克为心源性休克；革兰氏阴性杆菌内毒素引起的休克为中毒性休克，或感染性休克。

老年革兰阴性菌肺炎患者血清降钙素原、内毒素及C反应蛋白水平变化及临床意义

目的明确降钙素原(PCT)、内毒素(LPS)及C反应蛋白(CRP)检测在老年革兰阴性菌肺炎患者诊治中的应用价值。方法选取革兰阴性菌肺炎、非典型病原体(或病毒感染)两组老年患者各45例,观察两组患者之间以及革兰阴性菌肺炎组内治疗前后、症状轻重患者间,PCT、LPS及CRP水平的差异。结果革兰阴性菌肺炎组PCT及LPS水平明显高于非典型病原体(或病毒感染)组,差异有统计学意义(P<0.01);CRP在两组间差异无统计学意义(P>0.05);革兰阴性菌肺炎组内,重症患者PCT及CRP水平显著高于非重症患者,差异有统计学意义(P<0.01);LPS在两组间差异无统计学意义(P>0.05);革兰阴性菌肺炎组内,患者治疗前后PCT、CRP水平差异有统计学意义(P<0.01);LPS水平在两组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论联合检测血清PCT、LPS以及CRP水平,对于老年革兰阴性菌肺炎患者的诊断,以及预后的评估,具有较高的应用价值。

草莓微生物污染分析及革兰氏阴性细菌和霉菌鉴定

为评估草莓的微生物污染情况,在2016年3—4月份对浙江地区基地温棚和市售草莓进行随机抽样,分析草莓中菌落总数、大肠菌群、霉菌,并运用全自动微生物分析系统(VITEK)和分子生物学技术,分别对分离的革兰氏阴性细菌和霉菌进行了鉴定。结果表明:温棚草莓菌落总数为120~48 600 cfu·g^(-1),大肠菌群为3~1 100 MPN·g^(-1),霉菌为0~2 900 cfu·g^(-1);市场草莓菌落总数为1 900~36 900 cfu·g^(-1),大肠菌群为15~1 100 MPN·g^(-1),霉菌为200~6 100 cfu·g^(-1);同时鉴定出大肠埃希菌(Escherichia coli)、阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)、河生肠杆菌(Enterobacter.amnigenus)、植生拉乌尔菌(Raoultella planticola)等19株革兰氏阴性细菌和毛霉属(Mucor)、镰刀菌属(Fusarium)等5株霉菌,所检出的革兰氏阴性细菌和霉菌多数具有较强的致病性。研究结果为草莓微生物数量的控制和开发杀菌抑菌技术提供了参考。

头孢他啶诱导的细菌溶解和内毒素释放

β－内酰胺类抗生素在杀死革兰氏阴性细菌的同时可能诱导细菌内毒素（ＬＰＳ）从细菌细胞壁释放，从而导致或加重内毒素血症。实验结果表明，头孢他啶（ＣＡＺ）在高浓度（５×ＭＩＣ）或低浓度（１／４或１／８×ＭＩＣ）时，在无血清体外培养系统或含血液培养系统中，作用于大肠埃希氏菌Ｏ１１１：Ｂ４，均可引起大量的内毒素释放到培养上清液中，这些培养上清液在体外培养的巨噬细胞上和小鼠体内可诱导大量的肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）和白细胞介素６（ＩＬ－６）产生。结果提示，在抗生素治疗过程中应考虑到可能加重的毒血症对预后的影响。

革兰氏阴性细菌Ⅵ型分泌系统的研究进展

细菌的Ⅵ型分泌系统(T6SS)参与了细菌与细菌间、细菌与宿主间的相互作用,在细菌的存活及致病中发挥着重要的作用。本研究中综述了细菌T6SS的发现与命名、结构与组成,调控机制(Fur、σ54依赖性激活因子、表面缔合、群体感应)与作用机制的最新研究进展,并对其下一步的研究方向进行展望。本研究结果可为深入研究细菌T6SS在细菌间及细菌与宿主间的作用机制,研制基于T6SS的疫苗或靶向药物,寻找对细菌T6SS有效的防控措施提供参考。

革兰阴性菌L型与其原菌内毒素含量比较

目的:探讨革兰阴性菌L型和原菌内毒素含量差异。方法:采用定性和定量鲎试验,分别检测稳定的大肠埃希菌和铜绿假单胞菌L型及其原菌内毒素含量。结果:大肠埃希菌和铜绿假单胞菌L型内毒素定性鲎试验检测阳性,定量鲎试验检测出大肠埃希菌和铜绿假单胞菌L型内毒素含量分别为原菌内毒素含量的25.1%和36.4%。结论:革兰阴性菌L型仍能产生内毒素,但其含量较原菌明显减少,是其致病力减弱的原因之一。

ICU患者血浆内毒素定量检测在革兰阴性菌败血症早期诊断中的应用

目的研究血浆中内毒素定量检测在革兰阴性菌败血症早期诊断中的临床应用价值。方法采集医院疑似革兰阴性菌败血症的112例重症监护病房患者静脉血标本,同时进行血浆内毒素定量检测和血培养检测,比较两种检测方法的差异。结果革兰阴性菌败血症患者组血浆内毒素含量为(109.6±112.1)pg/mL,明显高于非败血症组的(6.5±5.9)pg/mL,差异有统计学意义(P<0.01)。以20pg/mL为临界值时,血浆内毒素含量检测阳性49例(43.7%),阴性63例(56.3%);血培养阳性24例(21.4%),阴性88例(78.6%)。血浆内毒素检测具有较好的敏感度(85.7%)和特异度(90.3%),阳性预测值(87.6%)和阴性预测值(92.3%)均较高;血培养的敏感度较低(46.2%),但特异度较高(92.4%),阳性预测值和阴性预测值分别为86.5%和80.7%。两种方法联合检测后敏感度提高至95.2%,特异度为88.9%。结论血浆内毒素定量测定具有快速、敏感的特点,对革兰阴性菌败血症的早期诊断具有一定的临床应用价值。

细菌内毒素研究与检测的临床应用

长期以来,众多学者对细菌内毒素进行了大量的研究,取得了一些成果,发表了大量的论著。现已证明细菌内毒素就是革兰阴性细菌细胞壁的脂多糖成分,具有广泛的生物活性。微量的内毒素进入机体,将会出现发热、血压降低、弥散性血管内凝血、内毒素败血症等一系列临床反应。内毒素检测对鉴别诊断革兰阴性杆菌感染具有重要的参考价值,有助于早期判断感染类型及是否存在内毒素血症,有利于指导临床用药及判断预后。