革皮氏海参总皂苷对小鼠骨髓细胞周期和细胞凋亡的影响

目的研究革皮氏海参总皂苷对环磷酰胺(cyclophos-phamide,Cy)诱导的骨髓抑制模型小鼠骨髓细胞细胞周期和细胞凋亡的影响。方法通过腹腔注射Cy建立小鼠骨髓抑制模型,灌胃不同剂量的革皮氏海参总皂苷(10和30 mg(kg·d)-1),1次/d,连续16 d。采用流式细胞术检测革皮氏海参总皂苷对小鼠骨髓细胞周期分布和凋亡的影响,逆转录聚合酶链式反应(reverse ranscription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测小鼠骨髓细胞cyclinB1、bcl-2和bcl-xl基因mRNA表达水平。结果革皮氏海参总皂苷能明显增加骨髓有核细胞数;促进骨髓细胞周期由S期进入G2/M期,提高G2/M期关键因子cyclinB1 mRNA的表达水平;明显降低细胞凋亡率,提高抑制凋亡基因bcl-2和bcl-xl mRNA表达量。结论革皮氏海参总皂苷明显促进骨髓细胞增殖。其作用机制可能通过促进细胞进入增殖活跃期,抑制细胞凋亡,达到促进小鼠骨髓造血的作用。

革皮氏海参总皂苷的安全性评价研究

目的对革皮氏海参总皂苷的使用安全性进行评价,阐明其毒性及潜在的危险。方法将健康ICR小鼠随机分为正常组和革皮氏海参总皂苷不同剂量组,每组5只。根据预实验的结果灌胃剂量分别为0.464、1、2.15和4.64 g.kg-1bw,一次性灌胃后连续观察14 d,记录各组的死亡数;另取健康ICR小鼠50只,随机分为正常对照组、阳性对照组和革皮氏海参总皂苷低、中、高剂量组,每组10只,♀♂各半,取股骨骨髓细胞涂片观察骨髓嗜多染红细胞微核率的变化;大鼠30 d喂养实验中,将Wistar大鼠随机分为4组,每组♀♂各10只,给大鼠灌胃不同浓度(分别为20、50和100mg.kg-1)的革皮氏海参总皂苷30 d后,进行体重、外周血象、血糖、血脂、肝脏功能、心肌损伤、肾脏功能等指标检测,取肝、肾、睾丸、卵巢、胃、心、肺进行了组织病理学观察。结果革皮氏海参总皂苷对♂小鼠的LD50为1.08 g.kg-1,♀小鼠LD50为1.10 g.kg-1,属低毒级;骨髓细胞微核实验结果为阴性;30 d喂养实验中,不同剂量组大鼠各项检测指标与正常组相比较差异均无显著性(P>0.05),组织病理观察发现革皮氏海参总皂苷对大鼠睾丸有轻微毒性作用。结论革皮氏海参总皂苷的急性毒性级别为低毒,未发现遗传毒性,存在一定的亚急性毒性。

革皮氏海参总皂苷致畸和致突变作用的研究

目的对革皮氏海参(Pearsonothuria graeffei,P.graeffei)总皂苷的生殖毒性和遗传毒性进行评价。方法采用Ames试验法,分别检测不同浓度海参皂苷对组氨酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA97、TA98、TA100和TA102回复突变菌落数的影响;健康性成熟雌、雄大鼠2∶1同笼过夜,将孕鼠随机分为正常组、不同浓度海参皂苷剂量组,剂量组大鼠给予灌胃海参皂苷的剂量分别为17.2、68.8、275mg·(kg·bw)-1,正常组灌胃生理盐水。于妊娠第20d处死孕鼠,记录总胎数、活胎数、死胎数和吸收胎数;称子宫重、胎盘重和胎鼠重;测量胎鼠体长和尾长;检查胎数的外观、内脏和骨骼。结果不同剂量组海参皂苷都没有引起试验菌株回变菌落数的明显增加,结果为阴性;与正常组相比,各剂量组对胚胎形成、生长发育、外观、骨骼及内脏各指标均无显著性差异。结论在该实验剂量与条件下,海参总皂苷无致突变作用,对孕鼠生长和胚胎发育亦无致畸作用。