肝细胞靶向基因药物分子构形和表达效率的研究

目的 :用调整肝细胞靶向基因药物分子构形的方法 ,以期提高外源转入基因在目标细胞的表达效率。方法 :加入特定辅料分子至基因药物中 ,用电镜观察其液态分子构形。在转入体外培养的人肝癌细胞株BEL 74 0 2中后 ,用ELISA方法检测基因表达产物IFN r的浓度 ,筛选最佳表达外源基因药物分子的构形。结果 :肝细胞靶向基因药物在辅料分子不同浓度中构形发生改变 ,显现出絮状、球形、串蛛状及杆状与类染色体形的混合体。筛选出了具最佳表达的杆形和类染色体混合体分子构形。该构形的药物分子在体外培养细胞中的表达显著高于脂质体转运载体携带的同一基因 ,且不需要抑制溶酶的活性。结论 :用于基因治疗的药物分子构形对其转入靶细胞的表达效率有重要的影响。杆状和类染色体复合分子构形 。

肝癌细胞靶向基因药物分子构形与表达量关系的体外研究

目的 通过调整靶向基因药物分子构形来提高外源基因的表达量 ,以解决外源基因在靶细胞中表达效率低的难题。方法 应用PCR方法扩增出人白介素 1 2P4 0 、P35亚基的cDNA全长并克隆至真核表达载体pcDNA3 .1 (± )中 ,构建P(+) /IL 1 2、P(+) /P4 0 和P(- ) /P35三种质粒 ,分别与脱唾液酸黏蛋白 多聚左旋赖氨酸 (ASOR PLL)结合成两种靶向基因药物 [ASOR PLL P(+) /IL 1 2和ASOR PLL P(+) /P4 0 、ASOR PLL P(- ) /P35] ,透射电镜观察它们在不同辅料浓度中的分子构形 ;不同构形药物分子转染HepG2细胞 ,48h后用半定量RT PCR和ELISA法检测hIL 1 2的表达量。 结果 靶向基因药物分子构形为直径 2 5～ 1 50nm的颗粒状或圆环状时 ,hIL 1 2表达量最高 ;ASOR PLL P(+) /P4 0 、ASOR PLL P(- ) /P35共转染者较ASOR PLL P(+) /IL 1 2转染者hIL 1 2表达量普遍要高。结论 靶向基因药物分子构形对外源基因的表达有重要影响 ,以直径 2 5～ 1 50nm的颗粒状或圆环状构形为最佳分子构形 。

常染色体显性多囊肾病的分子靶向药物治疗研究进展

常染色体显性多囊肾病(ADPKD)是一种单基因遗传性肾脏疾病,其特征是囊肿进行性形成,导致肾脏体积增加和肾功能下降,最后进展为终末期肾病。既往临床上对ADPKD的治疗以对症支持治疗为主,无法延缓多囊肾病的病情进展,临床上亟需针对ADPKD的有效治疗方案。近年来,随着人们对ADPKD病理生理机制研究的不断深入,针对ADPKD致病靶点和相关信号通路的分子靶向药物研发不断取得进展突破,目前已有多种ADPKD的分子靶向药物进入临床试验阶段。本文就ADPKD分子靶向药物研究进展进行综述,以期对该病治疗及新药研发有所裨益。

髓性白血病细胞靶向性基因药物高分子给药系统研究

目的:通过抗肿瘤腺病毒对髓性白血病细胞干预,探讨基因治疗方案的干预下,运用高分子给药系统的靶向性修饰特点,建立一个安全的、有效的适合髓性白血病细胞的防治模式。方法:合成p HPMA(p HPMA-ONp),加入制备好的Ad.mda-7.egfp形成pc-Ad.mda-7.egfp接合物,加入ACPPs形成ACPPs-pc-Ad.mda-7.egfp,在U937细胞上清中孵育pc-Ad.mda-7.egfp及CPP44-pcAd.mda-7.egfp20min以全波长酶标仪观察两种接合物的绿色荧光比值,进行抗腺病毒抗体中和实验;以CPP44-pc-Ad.mda-7.egfp感染U937细胞、RBC、MSC48h,全波长酶标仪检查绿色荧光蛋白表达,对CPP44pc-Ad.mda-7.egfp肿瘤靶向性检测;CPP44-pcAd.mda-7.egfp感染细胞,行CPP44-pc-Ad.mda-7.egfp穿膜活性检测;并采用倒置荧光显微镜观察CPP44-pc-Ad.mda-7.egfp穿膜活性的时间依赖性。结果:抗腺病毒抗体中和实验:通过人抗腺病毒抗体孵育两种接合物,赋予前U937细胞pc-Ad.mda-7.egfp全波长酶标仪检查荧光表达为91.7%,CPP44-pc-Ad.mda-7.egfp为90.3%,孵育后pc-Ad.mda-7.egfp为21.9%,CPP44-pc-Ad.mda-7.egfp为84.3%;肿瘤靶向性检测:CPP44-pc-Ad.mda-7.egfp分别感染U937细胞、RBC、MSC,全波长酶标仪检测发现,U937细胞(96.4±2.34),RBC(13.6±4.35),MSC(16.9±3.36),差异具有统计学意义(F=135.754,P=0.000);穿膜活性检测:倒置荧光显微镜观察发现,U937细胞内可见大量PI荧光,以及大量的Hoechst33342和PI的复合荧光;穿膜活性的时间依赖性检测:倒置荧光纤维镜观察发现,随时间的推移,细胞浆内PI荧光逐渐增强。结论:CPP44-pc-Ad.mda-7.egfp具有良好的免疫逃逸能力,在静脉给药时,可有效避免人体内的抗腺病毒抗体对腺病毒的清除作用,使靶向治疗达到更高的浓度,且其对正常组织的副作用小,具有良好的跨膜转运能力,提高了腺病毒在细胞内的表达,增加了腺病毒抑制癌细胞的效率。CPP44-pc-Ad.mda-7.egfp可能适合静脉给药用于髓性白血病治疗。

分子靶向药物和基因治疗陆续进入拥有1700万患者的市场

心力衰竭是指心肌梗死、心瓣膜病、心肌病等最终导致的一系列病症和综合征，该病是世界上发病率增速最快的心血管疾病。据推算．日本国内心力衰竭患者250多万人．世界上有1700万人。目前．世界上每年有730万人因心脏病发作而死亡。心力衰竭的定义为：心脏功能低下导致的不能充分发挥泵血作用的状态。发病时．由于心脏不能向全身器官输送血液．表现出心动过速、呼吸困难等运动应对能力下降症状。

应用分子靶点药物治疗犬肥大细胞瘤的研究进展

犬肥大细胞瘤因其恶性率和转移率都较高,并且常规化疗药物副作用较强,患犬生存期和生存质量显著下降,因此急需新型的药物进行治疗。近几年,治疗肿瘤的分子靶点药物凭借其疗效好、副作用低的特点,受到越来越广泛的关注,特别是在治疗犬肥大细胞瘤的应用中效果显著。论文重点介绍了欧美小动物临床最常用的伊马替尼、托赛拉尼、马赛替尼这3种以异常KIT为靶点的药物及其药物作用机理及药效,最后介绍了由c-kit基因二次突变所导致的耐药问题及其预防措施,期望能对我国小动物临床医师和科研工作者有所启发。

细胞信号转导通路中药物作用靶分子研究进展

细胞内有许多信号转导通路,交织成一个大的细胞信号转导网络系统,该网络系统是非常有序和复杂的.受外环境的干扰和基因突变等因素的影响,细胞信号转导系统的有序在肿瘤细胞中被打乱,某些信号转导途径出现异常.美国MIT肿瘤研究中心的ras基因发现者Robert A Weinberg教授认为有四种细胞信号转导途径的异常与肿瘤的生长有密切关系,它们包括TGF-周期素(transforming growth factir-cyclin)途径、p19-p53途径、端粒酶(telomer-ase)途径和RasMARP途径,这些信号转导途径既独立又相互影响.

EGFR分子靶向药物痤疮样皮疹中皮肤护理方法探讨

分子靶向治疗是指针对肿瘤细胞内某一蛋白质部分,某一核苷酸片段,或某一基因产物进行的治疗。近年来,随着分子生物学的进展,越来越多基于恶性肿瘤细胞特性的分子靶向药物在临床上得到了应用。表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor,

EML4-ALK融合基因与非小细胞肺癌分子靶向治疗的研究现况

肺癌是当今世界最常见的恶性肿瘤之一。据统计,每年新发肺癌患者中有大约85%为非小细胞肺癌,而其中又有70%的患者在确诊时已存在局部晚期或远处转移[1]。近年来随着对癌症发病机制的深入研究和分子生物学的发展,出现了以特定分子为靶点的抗肿瘤药物。针对EGFR19或21号外显子突变而开发的酪氨酸激酶抑制剂,

分子靶向治疗药物及其临床意义

肿瘤是一种分子网络病。分子靶向治疗是利用肿瘤细胞与正常细胞之间分子生物学上的差异，采用封闭受体，抑制血管生成，阻断信号传导通路等方法作用于肿瘤细胞特定的靶点，特异性地抑制肿瘤细胞的生长，甚至使其完全消退的一种全新的生物治疗模式。近20年来，随着肿瘤基因组学及基因组药物学的进展，肿瘤的分子靶向治疗成了临床肿瘤学最热门的研究课题，并且已经进入了常见肿瘤的临床应用中，并取得了乐观或显著的疗效。

2011医学科学前沿暨第四届分子靶向药物研究与应用研讨会第一轮会议通知

近年来，在转化医学框架下的分子靶向药物的研究研发与治疗应用研究已成为主流热点领域。随着功能基因组学与蛋白质组学的研究进展，将发现与确定越来越多新的与疾病相关的分子靶点，分子靶向药物正是与这一发展相适应的、具有高度特异性。为充分把握国际前沿进展动态，促进我国分子靶向新药研发、肿瘤分子标志物的发现以及肿瘤个体化治疗。

基因药物研究现状和对策

生物技术药物以人类体细胞的基因组、转录本组和蛋白质组三个层次生物大分子为目标 ,基因药物的研究主要针对致病基因的DNA和基因转录本mRNA两类生物大分子 .mRNA从结构上考虑是研发核酸药物的最理想靶标和策略之一 .反义寡核苷酸、特异水解基因mRNA的核酸酶(ribozyme和DNAzyme)以及具有干扰作用的双链RNA(siRNA)是药物设计的策略之二 .mRNA结构靶点研究是研发反mRNA基因药物的基础 ,mRNA分子具有高度折叠的二级及三级结构 ,阐明其可及性位点 ,筛选其结构靶位点序列是关键 .近年研究报道的靶点筛选有约 7种mRNA的实测新技术 ,以及计算机辅助软件预测分析 .但发展分子生物学实验新技术以分析、确认靶点是药物研发策略之三 .

当前肺癌分子靶向治疗的困惑与希望

0引言肺癌是世界范围内死亡率较高的恶性肿瘤之一,随着临床观察的报道增加,证实以铂类为主的联合化疗对肺癌的疗效达到了一个平台期。为突破这个瓶颈,一类针对肺癌特定的遗传表型,影响特定的分子信号途径的药物逐渐得到发展。当前临床使用和发展的肺癌分子靶向治疗药物,本文就其目前的进展和存在的问题加以阐述。

纳米靶向材料在基因治疗中的应用

纳米靶向材料作为基因药物载体,是一种新型的可控释体系,由于其具有超微体积,能穿过组织间隙被组织细胞吸收,还可通过人体最小的毛细血管进入体内,同时由于其结构的特异性,对组织细胞有靶向作用,因而具有广阔的应用前景。着重论述了纳米高分子及纳米无机材料在基因治疗中的研究进展,并对其在基因治疗中的应用前景提出展望。