靶向毒素DT-VEGF的构建、表达与活性分析

肿瘤的快速生长依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子 (VEGF)是血管发生和形成过程中的主要介质 ,其特异性受体在正常组织和肿瘤组织的表达率存在数个数量级的差异 ,因此可以将毒素分子转运至增生的肿瘤上皮组织中抑制肿瘤血管增生 ,从而抑制肿瘤的生长。将白喉毒素的前 3 89个氨基酸基因片段与VEGF165通过一短肽相连构建为融合蛋白基因 ,在大肠杆菌中表达 ,获得纯化蛋白。实验证实该融合蛋白对血管内皮细胞有特异性杀伤作用 。

促黄体激素释放激素及其靶向毒素

促黄体激素释放激素受体可以作为某些恶性肿瘤细胞的靶标。促黄体激素释放激素(LHRH)的结合位点在人乳腺癌、卵巢和子宫内膜肿瘤以及前列腺癌细胞的中均有较高表述,而在人的正常组织中少有表达,因此成为一种有效的恶性肿瘤特异性受体。LHRH重组毒素能有效抑制接种LHRH受体阳性肿瘤的裸鼠肿瘤生长。本文对LHRH及其受体和靶向毒素的研究进展作了较全面的综述。

重组靶向毒素IL-6(23)-PE40_(KDEL)在毕赤酵母中的表达及其活性

目的利用毕赤酵母表达系统表达IL-6(23)-PE40KDEL重组靶向毒素,并检测其杀伤肿瘤细胞的活性。方法采用PCR技术,将目的基因IL-6(23)-PE40KDEL插入到pPIC9载体中SnaBⅠ与NotⅠ位点,电转化至巴斯德毕赤酵母GS115中,筛选Mut-型重组酵母;甲醇诱导表达,体外细胞试验检测其细胞毒性。结果获得12株Mut-重组酵母,其中8株具有细胞毒性,表达产物占上清液蛋白的9%～12.7%;15"l以上的表达产物在体外对SP2/0、HL-60、HepG2、BGC-832和HCT-116细胞具有高度杀伤活性,对CK、HeLa和NIH/3T3细胞无明显影响。结论IL-6(23)-PE40KDEL重组靶向毒素在毕赤酵母GS115中获得表达,并具有选择杀伤肿瘤细胞的活性。

脑肿瘤靶向毒素治疗的现状和展望

靶向毒素,亦称为免疫毒素或细胞毒素,是一种肿瘤细胞表面特异性抗原或受体相结合的细胞分子。如与EG-FR、IL-13受体等相结合的细胞分子,其毒素成份可杀死肿瘤细胞。目前研究的毒素多为以白喉毒素、假单胞杆菌外毒素等为母基合成的毒素。双重特异性靶向毒素能同时靶向肿瘤细胞和/或其新生血管上的两个过表达受体的毒素,如DTAT13靶向uPAR和IL-13受体,DTATEGF靶向EGFR和uPAR,其较单一靶向毒素具有更高的特异性和更强的毒性,同时免疫源性亦大为降低。寻找特异性的肿瘤细胞表面标志物、降低毒素的免疫源性及研究实体肿瘤毒素的投递方式是靶向毒素治疗脑肿瘤的研究方向。

抗癌试剂——靶向毒素的研究进展

癌细胞常过度地表达各种生长因子受体和抗原,特异地识别这些细胞表面结构的生长因子或抗体,可与蛋白毒素相联而形成细胞特异性的细胞毒试剂即靶向毒素。在动物异种移植模型中已证明,导向于表皮生长因子受体、成纤维细胞生长因子受体、erbB-2/HER-2以及肿瘤相关碳水化合物抗原的靶向毒素,可使建立的肿瘤完全消退,为人类癌症的治疗提供了令人振奋的前景。

以VEGF受体为靶向的融合毒素的研究

肿瘤的快速生长主要依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子(VEGF)在刺激血管内皮细胞生长和诱导血管生成方面起重要作用。肿瘤组织因血管含量丰富,VEGF特异性受体的数目远高于邻近正常组织,因此可以将血管内皮生长因子和某些细胞毒素构建为融合毒素,特异性定位于肿瘤部位,通过抑制血管的增生达到抑制肿瘤的目的。国外自二十世纪九十年代后期开展这方面研究,国内尚少见此类报道。本文就此类融合毒素的设计及临床研究等方面的进展作一综述。