载多烯紫杉醇及酞菁锌并靶向乳腺癌多功能分子探针体外光声显像特性及寻靶能力

目的观察载多烯紫杉醇及酞菁锌并靶向乳腺癌多功能分子探针的体外光声显像特性及寻靶能力。方法采用双乳化法及碳二亚胺法制备载多烯紫杉醇及酞菁锌并连接RDG靶向肽的多功能分子探针。检测探针的一般物理特性、多烯紫杉醇及酞菁锌包封率及载药量、与RGD连接情况及体外寻靶能力,观察其体外光声显像情况、体外释放特性及体外抑制乳腺癌细胞的能力。结果成功制备靶向载多烯紫杉醇及酞菁锌的多功能分子探针,平均粒径(266.00±65.85)nm,表面电位(-29.20±6.27)mV;多烯紫杉醇包封率及载药量分别为(88.00±0.32)%、(34.92±0.02)μg/mg,酞菁锌包封率及载药量分别为(97.25±0.22)%、(30.87±0.11)μg/mg;靶向载多烯紫杉醇及酞菁锌纳米粒具有一定缓释效应,且呈明显光声信号,并随酞菁锌含量增加而增强。流式细胞仪检测RGD肽与靶向载多烯紫杉醇及酞菁锌纳米粒连接率为89.19%。激光辐照靶向载多烯紫杉醇及酞菁锌纳米粒后,乳腺癌细胞凋亡率明显增高。结论载多烯紫杉醇及酞菁锌并靶向乳腺癌多功能分子探针呈明显光声信号,并具备乳腺癌细胞靶向能力,可通过光声介导抑制乳腺癌细胞增殖。

携MAGE靶向金纳米粒光声及超声显像黑色素瘤的实验研究

目的制备抗黑色素瘤相关抗原(MAGE)抗体偶联的载金纳米棒靶向纳米分子探针,探讨其对体外恶性黑色素瘤细胞的靶向性,观察其体外光声成像效果。方法采用双乳化法制备包裹金纳米棒和液态氟碳的聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)纳米粒,碳二亚胺法连接靶向MAGE的单克隆抗体,制备高分子多功能靶向PLGA纳米分子探针,检测其一般物理特性、MAGE抗体与纳米粒的连接情况及其体外寻靶能力,并观察体外光声成像效果。结果成功制备的靶向载金纳米棒多功能纳米分子探针平均粒径(336.40±27.46)nm,平均Zeta电位(-4.34±4.9)m V。MAGE抗体与纳米粒有效连接。体外寻靶能力实验显示黑色素瘤B16细胞株周围有大量靶向纳米探针环绕;光声成像显示随金纳米粒含量增加,其光声信号逐渐增强。结论 MAGE抗体偶联金纳米棒纳米分子探针制备成功,对体外恶性黑色素瘤细胞具有较好的生物活性,细胞靶向性较好,且体外光声成像有明显增强信号,可作为光声成像造影剂,进一步行肿瘤靶向光热治疗。

动脉斑块内骨桥蛋白靶向的新型超声对比剂的制备及体外实验研究

目的骨桥蛋白(OPN)在动脉易损斑块中高表达,本研究通过构建偶联骨桥蛋白(OPN)抗体的聚乳酸(PLA)纳米颗粒,实现OPN的超声纳米分子成像。方法通过乳化溶剂挥发法制备包裹液态氟碳的PLA纳米颗粒,经碳二亚胺法进行聚乙二醇(PEG)亲水性修饰和OPN抗体偶联,得到OPN靶向的超声成像纳米探针。对探针进行表征,CCK-8法检测探针毒性,激光共聚焦显微镜评估细胞摄取,超声诊断仪进行体外超声成像。结果 PLA纳米颗粒呈球形或类球形,水合粒径为(267.60±82.40)nm;CCK-8毒性实验显示,经不同浓度探针(0.00~0.50 mg/ml)的孵育后,各实验组与空白对照组比较细胞活性差异无统计学意义(P>0.05);靶向OPN的纳米颗粒在泡沫细胞内摄取明显增多(P<0.05);乳胶管超声成像见纳米探针在反向脉冲谐波成像(PIHI)模式下显示为点状密集高回声影像。结论本实验构建的靶向OPN纳米探针生物相容性好,能够在体外与OPN高表达的泡沫细胞模型特异性结合,超声成像效果良好。

靶向乳腺癌细胞的多功能纳米分子探针介导光声成像及治疗

目的制备一种载Fe3O4同时靶向乳腺癌的多功能纳米分子探针，观察其体外光声成像效果，并探讨其体外寻靶能力及光声介导乳腺癌细胞凋亡的能力。方法采用双乳化法和碳二亚胺法，制备载Fe3O4同时连接靶向乳腺癌单克隆抗体（Herceptin）的高分子多功能纳米分子探针，检测其一般物理特性、Herceptin与纳米粒的连接情况及其体外寻靶能力；对不同浓度的纳米粒进行光声成像；体外评价靶向纳米粒介导光声对乳腺癌细胞的抑制作用。结果成功制备的靶向载Fe3O4多功能纳米分子探针平均粒径为（235．40±53．75）nm，Zeta电位（-13．4±4．7）mv；Fe3O4颗粒分布于纳米探针壳层；间接免疫荧光法观察到抗体成功连接到纳米探针表面；体外寻靶能力实验显示乳腺癌SKBR3细胞株周围有大量靶向纳米探针环绕。体外光声成像显示随Fe3O4含量增加，其光声信号逐渐增强。体外细胞抑制实验显示激光辐照后的乳腺癌细胞凋亡率明显升高，证明制备的纳米探针能够协同光声对乳腺癌细胞产生明显的抑制作用。结论制备的靶向载Fe3O4多功能纳米分子探针可作为光声成像造影剂，同时在光声介导下，能够显著抑制乳腺癌细胞的增殖。