HER2肿瘤靶向亲合体重组蛋白的构建、表达纯化及功能验证

目的实现重组亲合体的高效表达和纯化,并验证其活性。方法选择2016年1—12月该院收治的56例卵巢癌患者为研究对象,对HER2亲合体编码序列进行优化,增加其与纳米载体的连接位点,提高表达和纯化效率。重组表达产物Z_（HER2：342）经过凝胶亲和层析纯化和质谱检测分子量,并将纯化产物作为靶向分子连接纳米药物,检测其对HER2高表达细胞的靶向能力。结果 Z_（HER2：342）重组亲合体产物纯度约为97.8%,回收效率1.0 mg/mL。纯化产物分子量为7.648 kDa,与理论值7.631 kDa误差0.2%,表明构建的Cys-Z_（HER2：342）-6His重组亲合体正确。细胞实验表明其可显著提高纳米药物对乳腺癌细胞的细胞毒性（P〈0.01）,对HER2高表达的肿瘤细胞具有特定的靶向性。结论重组表达产物Z_（HER2：342）构建正确,可实现高效表达纯化并对HER2高表达的肿瘤细胞具有特定的靶向性。