新型人上皮性卵巢癌细胞HO8910靶向输送系统的构建及其生物学活性的鉴定

目的构建新型人卵巢癌HO8910细胞株靶向输送系统TAT-OSBP-EGFP,并对其靶向输送特性和体外活性进行研究鉴定。方法采用PGEX-6P-3质粒分别构建TAT-EGFP、OSBP-EGFP和TAT-OSBP-EGFP表达载体,重组质粒转化BL21(DE3)大肠杆菌,经IPTG诱导表达和GST SefinoseTMResin柱亲和层析纯化后,采用SDS-PAGE和Western blotting鉴定。流式细胞术分析不同浓度(0、1、5、10μmol/L)TAT-EGFP、OSBP-EGFP和TAT-OSBP-EGFP融合蛋白处理HO8910细胞2h后的细胞穿膜率,细胞免疫荧光法检测3种融合蛋白对HO8910的输送特性(以人结肠癌Lo Vo细胞作对比),CCK-8法检测0、1、5、10、15、40、60、80、100μmol/L TAT-OSBP-EGFP处理HO8910细胞2h后的细胞活性。结果成功构建TAT-OSBP-EGFP原核表达载体,并获得可溶性融合蛋白。与TAT-EGFP相比,当浓度为10μmol/L时,TAT-OSBP-EGFP处理后HO8910细胞的穿膜率无明显升高(P>0.05);但当浓度为1、5μmol/L时,TAT-OSBP-EGFP处理后HO8910细胞的穿膜率升高,差异有统计学意义(P<0.01)。经TAT-OSBP-EGFP蛋白处理,HO8910细胞内荧光强度高于Lo Vo细胞;经TAT-EGFP蛋白处理,HO8910细胞内绿色荧光强度与Lo Vo细胞相似;经OSBP-EGFP蛋白处理,两种细胞内未见明显的绿色荧光。不同浓度TAT-OSBP-EGEP对HO8910细胞活性无影响(P>0.05)。结论成功构建针对人卵巢癌HO8910细胞株的靶向输送系统,为下一步肿瘤靶向药物输送载体的构建并发挥肿瘤的靶向杀灭作用打下了良好的基础。

热物理在肿瘤治疗及纳米药物靶向输送方面的应用研究

目的 从在体动物模型和细胞水平上研究局部温热促进微纳米颗粒靶向输送并初探其机理。方法 利用无菌外科手术将鼠源乳腺癌 4T1组织块接种到裸鼠皮脊翼视窗 ,接种后第 4d ,7d ,8d ,10d分别观察肿瘤新生血管的生长情况。利用激光共聚焦荧光显微镜三维实时定性和定量研究微纳米脂质体在正常组织和肿瘤组织间质的渗透和扩散。将脐静脉内皮细胞 (HUVEC)接种至模拟肿瘤环境的ECM6 2 5胶上 ,形成类似血管的管状结构 ,研究温热作用对生长在肿瘤环境下的血管内皮细胞的影响。结果 肿瘤新生血管随着时间的变化生长逐渐加快 ,组织学研究表明肿瘤新生血管在肿瘤内生长受到抑制 ,在肿瘤边缘的肿瘤新生血管生长非常活跃。微纳米脂质体在正常组织中 ,在常温和 4 2℃ ,作用 1h基本不渗漏 ;在肿瘤组织中 ,4 2℃ ,加热 1h ,微纳米脂质体渗漏显著增加 ,与常温相比 ,相对荧光强度提高了 4倍左右。 4 2℃ ,加热 1h可促使生长在ECM6 2 5胶上的血管内皮细胞变圆 ,细胞之间连接松散 ,甚至断裂。结论 肿瘤新生血管内皮细胞对热敏感 ,局部温热作用促使了肿瘤环境下内皮细胞之间连接的破坏 ,进而促进了微纳米脂质体在肿瘤组织中的渗透。

靶向输送三元复合体系提高采收率技术研究

为减少ASP三元复合驱油体系在近井地带的吸附损失,进一步提高ASP三元复合体系的利用效率,提出了一种靶向输送ASP三元复合驱油体系的新方法:将水射流钻水平井技术与三元复合驱相结合,应用水射流的工艺钻通注入井附近剩余油较少的区域,直接将ASP三元复合驱油体系输送至剩余油富集区域。使用渗透率100×10^(-3)~1500×10^(-3)mm^2的30 cm均质方岩心进行物理模拟,水驱完成后钻出10 cm的靶向通道,进行ASP三元复合驱油体系的靶向输送模拟,考察靶向输送ASP驱油体系的驱油效果,并与常规ASP三元复合驱油效果做对比。研究结果表明,对于渗透率为100×10^(-3)、700×10^(-3)、1500×10^(-3)μm^2左右的岩心,在水驱基础上,常规驱替ASP三元复合驱油体系提高采出程度分别为13.43%、14.19%、19.76%;而在相同条件下采用靶向输送方式注入ASP三元复合驱油体系的提高采出程度分别为26.29%、29.77%、38.84%,采用靶向输送方式ASP驱替提高采出程度是常规ASP驱替的两倍左右。靶向输送技术在三元复合驱提高采收率方面具有非常广阔的应用前景。

热物理在肿瘤治疗及纳米药物靶向输送方面的应用研究

叙述热物理应用于肿瘤治疗,着重介绍利用局域温热条件促进微纳米颗粒药物靶向作用的渗透传输以及人乳腺癌的冷冻治疗的机理研究,并进一步研制出适用于肿瘤治疗的有效的临床医疗方案和仪器。

载药纳米微粒靶向输送和控释系统的研究进展

目前,生化药物仍是人类与疾病斗争的主要工具,发展安全高效的药物靶向输送和控释技术是提高疗效、减少药物用量及其毒副作用的关键。由纳米技术与现代药物学结合形成的载药纳米微粒是一种新型的药物输送体系,因其在药物的靶向输送、控释或缓释以及提高药物的生物利用度等方面具有其他输送体系难以比拟的优势,已成为现代药物制剂发展的趋势之一。

三元复合驱靶向输送提高采收率技术

针对三元复合驱在注入井近井地带的损耗问题,提出了将高压水射流钻超短半径径向水平井与三元复合驱相结合的靶向输送提高采收率技术,利用水平井作为"靶向通道",将三元复合体系直接输送至剩余油富集区,避免了三元复合体系在注入井近井地带的损耗。平板均质模型室内实验与数值模拟参数优化研究证实,该技术可显著扩大波及效率,改善驱油效果,大幅度提高原油采收率;靶向输送技术最佳驱替参数组合为:直角靶向输送,通道长度约为井距的15%,三元复合体系段塞注入量为0.4倍孔隙体积;三元复合驱靶向输送技术在合理参数下,相对于水驱可提高采收率48.87%,相对于常规三元复合驱可提高采收率22.04%。靶向输送技术解决了三元复合驱近井地带化学剂的高损耗问题,同时弥补了三元复合驱成本高、应用受限的缺陷,具有广阔的应用前景。

周民研究员团队以螺旋藻为载体靶向输送药物至乳腺癌肺转移肿瘤

周民研究员团队研究成果论文“Biodegradable microalgae-based carriers for targeted delivery and imaging-guided therapy toward lung metastasis of breast cancer”近日发表于纳米与微技术研究领域期刊《微尺度》(Small)(https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/smll.202000819)。

^(99)Tc^m-Cl_2MDP-明胶微粒的制备及其肝脾靶向性研究

目的研究粒径300～500nm、表面带正电荷的明胶微粒对二氯亚甲基二膦酸盐(Cl2MDP)的包封技术,并观察明胶微粒和载药明胶微粒在SD大鼠体内的分布。方法通过静电吸附将Cl2MDP连接到明胶微粒表面完成药物包封。用99Tcm标记,进行SD大鼠生物学分布实验和显像,观察明胶微粒和Cl2MDP明胶微粒的组织靶向特性。结果通过静电吸附法可将Cl2MDP连接到明胶微粒表面,其药物包封效率约为20%,最大载药量达6mgmg明胶微粒;生物学分布实验和放射性核素显像示其具有较好的肝脾靶向性,可将Cl2MDP定向输送到巨噬细胞,肝脾的摄取超过注射量的60%。结论该明胶微粒具有良好的肝脾网状内皮系统靶向性,是较理想的以肝脾巨噬细胞为作用靶点的药物靶向输送载体;明胶微粒通过静电吸附的方法包封Cl2MDP简便可行,具有较高的药物包封效率和载药量。

纳米氧化石墨烯作为临床药物载体在肿瘤治疗中的研究

免疫治疗的出现开创了癌症治疗的新时代,但其临床疗效有限,其中一个主要原因是肿瘤局部药物浓度过低,不能有效激活机体的免疫反应。纳米材料因其独特的载药优势,逐渐应用于临床肿瘤治疗。纳米氧化石墨烯(nanographene oxide,NGO)是一种新型二维纳米材料,具有巨大的载药界面,化学稳定性、生物相容性及高效的光热转换效率等。此外,功能化修饰可实现药物的靶向输送,减少药物的毒副作用,提高药物在肿瘤部位的富集浓度。该文概述了NGO在肿瘤药物装载、靶向输送及肿瘤光热治疗等方面的应用与挑战,有望为今后纳米氧化石墨烯应用于临床肿瘤治疗提供理论基础。

超声波介导的基因输送技术

近年来超声波介导的基因输送技术由于其相对安全性和操作上的简单得到关注。本文对超声波导致的声致穿孔的机制,空化核的作用——增强基因输送的效率,以及细胞和在体基因输送效率作了综述,讨论了超声波介导的基因输送效率的影响因素。

基于糖类化合物靶向药物载体的研究进展

药物载体是癌症治疗领域的一大研究热点,但是一些药物载体缺乏靶向性,并且还存在转染效率低,具有一定的细胞毒性等问题。糖类化合物凭借其良好的生物相容性和特异性受体识别能力在癌症治疗领域越来越受到专家学者的关注。介绍了以半乳糖、甘露糖和葡萄糖及其衍生物为原料,经修饰载药后靶向到各自的特异性受体上,对细胞转染和毒性产生一定的差异。对比于未用糖类化合物修饰的脂质体,对肿瘤组织的抑制作用都有显著增强的效果。同时对不同糖类化合物靶向药物载体在癌症治疗领域的前景进行了展望。

含聚多价适配体的长链DNA用于抗肿瘤药物的靶向传输

采用滚环扩增(RCA)方法合成含聚多价适配体的长链DNA(polyaptamer),并负载抗肿瘤药物多柔比星(Dox),用于靶向治疗白血病肿瘤细胞。研究结果表明,含聚多价适配体的polyaptamer载药能力比单价适配体(monoaptamer)提高了10倍以上,而其对急性淋巴白血病细胞(CCRF-CEM)的靶向效率比单价适配体提高了约35倍,极大降低了Dox对正常体细胞的不良反应。药物释放实验和肿瘤细胞杀灭实验同时证明,在酶的作用下,polyaptamer/Dox复合物进入肿瘤细胞后能够短时间内释放出Dox,从而高效地杀灭肿瘤细胞。

周民研究员团队发现磁控光合作用微纳机器人可用于靶向肿瘤联合治疗

近日,周民研究员团队在《先进功能材料》(Advanced Functional Materials)在线发表题为"Photosynthetic biohybrid nanoswimmers system to alleviate tumor hypoxia for triple-modal imaging-guided radio-photodynamic synergetic therapy"的研究论文(https://onlinelibrary. wiley. com/doi/abs/10. 1002/adfm. 201910395)。研究人员利用一种光合杂化的类生命微泳体微纳机器人,以微藻作为活体支架,"穿上"磁性涂层外衣,靶向输送至肿瘤组织,成功改善肿瘤乏氧微环境并有效实现磁共振/荧光/光声三模态医学影像指导下的肿瘤诊断与治疗。

聚合物纳米粒子用于给药载体

聚合物纳米粒子用于给药载体具有广阔的前景。本文按聚合物纳米粒子的主要制备方法 (单体聚合法 ,聚合物后分散法和两亲性聚合物自组装法等 )

皮肤功效成分纳米载体研究进展

皮肤功效成分纳米载体具有治疗皮肤病和护肤美容等功效,在经皮给药和化妆品领域具有良好的应用前景。该文介绍应用于皮肤功效成分纳米载体的性能特点,综述具有治疗皮肤病、修复皮肤屏障、抑制黑色素、抗氧化、祛痘等皮肤功效成分纳米载体的研究和应用进展。

人抗HER2单链抗体/精氨酸九聚体融合蛋白的基因构建、表达及鉴定

目的:构建人源性抗HER2单链抗体(scFv)/精氨酸九聚体(9R)融合蛋白基因,在大肠杆菌里表达纯化并检测该融合蛋白的活性。方法:采用PCR的方法,扩增融合基因scFv-9R,将获得的基因克隆入原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定,通过Ni-NTA螯合层析纯化,透析复性,超滤浓缩。ELISA分析scFv-9R融合蛋白抗原亲和活性,凝胶迁移实验检测scFv-9R融合蛋白与siRNA结合活性。结果:成功构建了人源性抗HER2 scFv-9R融合基因,经IPTG诱导后在M15中以包涵体形式表达。表达的目的蛋白scFv-9R能与HER2抗原结合,同时具有siRNA结合能力。结论:scFv-9R具有结合抗原与siRNA双重活性,为靶向递送siRNA的研究奠定了基础。

HV单链抗体/鱼精蛋白片段融合蛋白1A8 ScFv/Cκ/P的构建和表达

目的:构建汉坦病毒(Hantavirus,HV)单链抗体/鱼精蛋白片段融合蛋白1A8 ScFv/Cκ/P基因的原核表达载体,蛋白经表达后纯化并进行1A8 ScFv/Cκ/P融合蛋白的功能活性鉴定.方法:采用PCR的方法,扩增单链抗体基因1A8 ScFv和1A8 ScFv/Cκ,将鱼精蛋白片段的编码序列设计入扩增引物,获得HV单链抗体/鱼精蛋白片段的融合蛋白基因1A8 ScFv/Cκ/P.将获得的重组基因克隆入原核表达载体pET32a,并在大肠杆菌BL21中表达.表达产物经SDS-PAGE和Western Blot鉴定,用Ni-NTA螯合层析介质进行纯化.采用ELISA方法分析1A8 ScFv/Cκ/P融合蛋白与HV抗原的结合活性,凝胶迁移阻滞实验检测1A8 ScFv/Cκ/P融合蛋白与质粒DNA的结合活性.结果:成功构建了HV 1A8 scFv/Cκ/P融合蛋白基因的表达载体,在大肠杆菌中实现了可溶性表达.通过功能活性测定,纯化的1A8 scFv/Cκ/P融合蛋白既保持了与HV抗原的结合能力,同时又具有与核酸的结合活性.结论:构建和表达的HV 1A8 scFv/Cκ/P融合蛋白具有HV抗原结合活性和DNA结合的活性.

高分子—顺铂键合物的合成与药效研究

有关降低顺铂毒副作用的研究自1969年顺铂投入市场以来就从未停止过,但是,顺铂的水溶性低、重度消化道反应、骨髓抑制等问题仍未得到有效解决。本文利用高分子键合药技术,制备了一种高分子与顺铂的键合物,其粒径较小,铂含量达到11.3%,对乳腺癌细胞MCF-7的IC50值为9μg/m L,实现了对顺铂的有效保护和靶向输送,提高了肿瘤治疗效果。

从分子到药物-纳米技术的作用

纳米技术是在一个介于分子和微米之间的介观尺度上认识物质的性质和功能。在一个微米尺度的细胞内所发生的生命事件基本上是在纳米空间内完成的，如：DNA的复制到mRNA的合成、蛋白质的生成到其定向运输、以及信号通路的传导等。因此，纳米技术在认识生命基本问题的过程将起到关键性的作用。另外，纳米技术在成药性研究中起到日益重要的作用。如药物作用机制的研究，药物效应的评价及药物的靶向输送等。

磁性纳米Fe3O4颗粒的表面改性及其在肿瘤治疗中的应用

磁性纳米Fe3O4颗粒(MNP-Fe3O4)作为药物载体在肿瘤治疗领域受到广泛关注。综述了目前MNP-Fe3O4的研究现状,重点阐述了该材料的表面改性目的与改性途径,介绍了MNP-Fe3O4不同载药系统在肿瘤治疗中的应用,并详细阐述了介孔结构的MNP-Fe3O4颗粒作为药物载体的优势,指出了MNP-Fe3O4在肿瘤治疗中仍需解决的问题和发展趋势。