Hippo通路及靶因子YAP与肿瘤关系的研究进展

近年来研究发现，Hippo信号转导通路在维持组织器官大小及肿瘤发生发展中起着重要的作用。组织的生长和器官的大小是由发育过程中细胞增殖和凋亡的速度决定的．正常情况下，细胞增生与凋亡间的动态平衡维持着组织器官正常大小和机体内环境的稳态．而当细胞增殖或凋亡失控时，即可发生细胞恶性转化。

靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞毒性作用的体内外验证

目的 对靶向人表皮生长因子受体2嵌合抗原受体T(HER2-CAR-T)细胞进行毒理学评估,为其后期HER2-CAR-T细胞治疗的临床上评估提供安全性依据。方法 利用重组慢病毒载体制备HER2-CAR-T细胞,采用软琼脂集落形成实验,观察HER2-CAR-T细胞集落形成情况并对集落形成率进行统计分析;将HER2-CAR-T细胞悬液与兔红细胞悬液共孵,通过直接观察法以及酶标仪检测法评估红细胞溶解情况;对雄性新西兰兔耳缘静脉注射HER2-CAR-T细胞制剂,通过组织切片染色观察HER2-CAR-T细胞对动物血管的刺激作用;以pMD 2.G载体上的水泡性口炎病毒囊膜糖蛋白(VSV-G)基因为目标序列,利用荧光定量PCR进行慢病毒载体安全性的验证;取接受HER2-CAR-T细胞输注的小鼠心、肝、肺、肾,HE染色观察其病变情况。结果 成功制备了HER2-CAR-T细胞,这些细胞在体外不具备软琼脂集落形成能力,HER2-CAR-T细胞制剂对新西兰兔红细胞不产生溶血现象。新西兰兔耳缘静脉输注HER2-CAR-T细胞后未发现明显血管刺激反应,也未检测到VSV-G的特异性扩增,治疗组小鼠心、肝、肺、肾组织未见明显病变。结论 所制备的HER2-CAR-T细胞具有可靠安全性。

血管内皮生长因子靶向药相关性蛋白尿发病机制和中医药治疗研究进展

血管内皮生长因子(VEGF)靶向药目前越来越多地应用于恶性肿瘤的临床治疗,安全有效,易耐受,但仍会产生蛋白尿等常见的不良反应。VEGF靶向药相关性蛋白尿的发病机制主要是足细胞和内皮细胞改变及血管内皮细胞功能障碍。西医对症处理多有局限性,效果不显著。中医药辨治可有效改善VEGF靶向药所致的蛋白尿,提高临床疗效,改善患者生活质量,延长生存期。今后需进一步加强中医药防治VEGF靶向药相关性蛋白尿的机制研究,开展大样本、高质量的临床试验研究,为临床提供更多的参考。

七氟醚联合丙帕他莫对老年患者术后认知功能及磷酸化雷帕霉素靶蛋白/生长因子受体结合蛋白通路的影响

目的探讨七氟醚联合丙帕他莫对老年患者术后认知功能及磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/生长因子受体结合蛋白(Grb)通路的影响。方法选取2019年1月至2020年12月于南平市第一医院行择期全身麻醉腹腔镜下胆囊切除术老年患者76例为研究对象,采用随机数字表法将其分为观察组和对照组,每组各38例。观察组在麻醉诱导前15 min给予2 g丙帕他莫配伍100 ml氯化钠注射液静脉滴注,对照组仅给予100 ml氯化钠注射液静脉滴注。比较两组患者的手术情况、手术前后简明精神症状量表(MMSE)评分,比较两组患者在麻醉诱导前、术后1、6、12 h(T_(0)~T_(3))血流动力学、血清炎症因子、中枢神经特异蛋白(S100-β)、p-mTOR、Grb水平。结果两组患者的手术时间、输液量及术中出血量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组T_(1)~T_(3)时间点平均动脉压(MAP)、T_(1)的中心静脉压(CVP)、T_(1)、T_(2)的心率和血氧饱和度(SpO_(2))高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者T_(0)~T_(3)时点血清C反应蛋白(CRP)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素8(IL-8)水平呈逐渐升高趋势,而观察组T_(1)~T_(3)血清CRP、IL-4、IL-8低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者T_(1)~T_(3)时的血清S100-β蛋白水平高于T_(0),而观察组T_(1)~T_(3)血清S100-β蛋白水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者T_(1)~T_(3)时血清p-mTOR、Grb蛋白水平高于T_(0)时,观察组T_(1)~T_(3)时的血清p-mTOR、Grb蛋白水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后MMSE各项评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论给予老年全身麻醉患者丙帕他莫超前镇痛联合七氟醚吸入麻醉,能有效维持围手术期血流动力学稳定,通过影响mTOR/Grb信号通路磷酸化,减轻麻醉后炎症反应,改善术后认知功能。

抗HER2靶向治疗乳腺癌患者对预后的影响

目的:探讨乳腺癌抗人表皮生长因子受体–2(HER2)靶向治疗对患者预后的影响。方法:回顾性选取2021年1月至2022年2月江西省妇幼保健院乳腺科收治的乳腺癌患者80例,依据治疗方法的不同分为常规方案化疗组、抗HER2靶向治疗组(常规方案化疗+抗HER2靶向治疗),每组各40例。比较两组患者临床疗效、疼痛程度、手部功能、上肢功能、负面情绪情况、生活质量、肩关节活动度、不良反应发生率。结果:抗HER2靶向治疗组患者客观缓解率高于常规方案化疗组,差异具有统计学意义(P<0.05)。用药后,抗HER2靶向治疗组患者视觉模拟评分法(VAS)、上肢功能评定量表(DASH)、医院焦虑抑郁量表(HADS)评分低于常规方案化疗组,乳腺癌生命质量测定量表、简易上肢功能评定量表(STEF)评分以及肩关节活动度高于常规方案化疗组,差异具有统计学意义(P<0.05)。抗HER2靶向治疗组患者不良反应总发生率低于常规方案化疗组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:乳腺癌抗HER2靶向治疗能够有效改善患者预后,可提高临床疗效,改善患者生活质量,且安全性高。

Nrf2、LTBP2、PECAM1与NSCLC患者EGFR靶向治疗反应性关系及意义

目的:探讨血清核因子E2相关因子2(Nrf2)、转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)、血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM1)与非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)靶向治疗反应性关系及意义。方法:选取我院2021年1月—2023年1月收治的95例NSCLC患者为研究对象,根据EGFR靶向治疗3个月后的治疗反应性分为有效组(54例)、无效组(41例)。比较2组治疗前及治疗1个月、2个月后血清Nrf2、LTBP2、PECAM1水平,分析治疗1个月、2个月后血清Nrf2、LTBP2、PECAM1水平与NSCLC患者EGFR靶向治疗反应性相关性,偏回归分析治疗无效的影响因素,受试者工作特征曲线(ROC)分析治疗1个月、2个月后血清Nrf2、LTBP2、PECAM1水平联合检测对NSCLC患者EGFR靶向治疗效果的预测价值。结果:治疗1个月、2个月后无效组血清Nrf2、LTBP2、PECAM1水平均高于有效组(P<0.05);相关性分析发现,治疗1个月、2个月后血清Nrf2、LTBP2、PECAM1水平与治疗反应性均呈负相关(P<0.05);Logistic回归分析发现,治疗1个月、2个月后血清Nrf2、LTBP2、PECAM1水平为NSCLC患者EGFR靶向治疗效果的影响因素(P<0.05);ROC曲线分析发现,治疗1个月、2个月后血清Nrf2、LTBP2、PECAM1水平联合预测治疗无效的曲线下面积(AUC)分别为0.761、0.816,最佳预测敏感度、特异度分别为(85.37%、66.67%)、(92.68%、70.37%),高于单一指标预测(P<0.05)。结论:血清Nrf2、LTBP2、PECAM1水平与NSCLC患者EGFR靶向治疗反应性密切相关,并在预测治疗效果方面具有较高效能。

靶向线粒体转录因子A大鼠活体RNA干扰实验动物模型的建立

目的:在体外构建并筛选出靶向线粒体转录因子A(TFAM)的有效RNA干扰慢病毒载体,用于大鼠整体RNAi实验,观察其对肝组织中目的基因表达的干扰效果。方法:设计4条siRNA序列并合成双链DNAoligo,制备目的基因RNA干扰慢病毒载体,体外感染目的细胞,利用RT-PCR和Western blot的方法检测目的基因TFAM的表达情况,从而筛选出有效的干扰靶点。构建大鼠活体RNAi动物模型,观察大鼠肝脏中靶基因表达的变化情况。结果:酶切鉴定及测序结果均提示siRNA序列成功连接入载体中。RT-PCR结果提示3号靶点的干扰效率最高,达到了55%左右,Western blot也验证了其干扰的有效性。大鼠活体RNAi结果显示,肝脏中目的基因的表达也明显减少,这种表达减弱具有特异性和靶向性。结论:TFAM靶向RNA干扰慢病毒载体构建成功,能有效抑制目的细胞中线粒体转录因子A的表达。构建的慢病毒载体在大鼠活体内也具有良好的干扰效果。该研究为下一步利用此慢病毒载体进行活体RNA干扰打下了基础。

缺氧诱导因子-1靶基因参与生酮饮食提高大脑中动脉闭塞模型小鼠脑缺血耐受作用

目的探究生酮饮食对大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型小鼠的作用及缺氧诱导因子-1靶基因参与机制。方法小鼠随机分为正常对照组及标准饮食组、高碳水化合物饮食组、生酮饮食组,建模前通过3周饮食干预后,饮食干预的3组小鼠建造MCAO模型,正常对照组给予标准饮食但不进行MCAO造模。2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色观察脑梗死体积,Longa评分法对模型鼠进行神经功能评分,聚合酶链反应检测缺血区脑组织缺氧诱导因子-1下游靶基因红细胞生成素、血管内皮生长因子、葡萄糖转运体1、单羧酸转运体4的mRNA表达量。结果生酮饮食组小鼠脑组织梗死体积更小,神经功能评分更低,缺血区脑组织中红细胞生成素、血管内皮生长因子、葡萄糖转运体1、单羧酸转运体4的mRNA表达显著增加。结论生酮饮食可能是通过增加缺血区缺氧诱导因子-1靶基因表达,从而提高MCAO小鼠脑组织对缺血的耐受性。

抗α肿瘤坏死因子新靶点的进展

α肿瘤坏死因子是介导炎症反应和免疫反应的细胞因子,具有广泛的生物学活性。近年来,国内外抗α肿瘤坏死因子药物的研究进展迅速。从抑制α肿瘤坏死因子、肿瘤坏死因子前体生成、拮抗已经释放的肿瘤坏死因子作用方面简要介绍了目前研究的几个主要靶点及相关药物。

组织因子靶向肽对激光诱导小鼠脉络膜新生血管形成的抑制作用

目的探讨组织因子靶向肽(tissue factor targeting peptide,TF-TP)对激光诱导C57BL/6小鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成的影响。方法选取36只清洁级C57BL/6雌性小鼠分为3组:正常对照组、激光组和TF-TP给药组。激光光凝后第1天开始,TF-TP给药组每隔1 d应用5μL微量进样器给予小鼠玻璃体内注射1μL浓度为100 mg·L^(-1)的TF-TP,共3次。通过FFA评价各组小鼠CNV渗漏情况;采用组织病理学方法观察光凝后14 d各组小鼠CNV中央最大厚度;采用免疫组织化学法测定视网膜脉络膜组织中CD34的表达;通过Western blot检测小鼠RPE-脉络膜复合物中TF蛋白的表达。结果激光组小鼠在光凝后14 d,视网膜光斑处可见明显荧光渗漏点,造影晚期呈弥漫性荧光扩散,总渗漏率为69.79%。TF-TP给药组小鼠视网膜光斑处可见轻度荧光渗漏,造影晚期可见渗漏处高荧光点但无扩散,总渗漏率为55.21%。TF-TP给药组的渗漏率低于激光组,差异有统计学意义(P=0.037)。TF-TP给药组CNV中央最大厚度为(60.02±2.48)μm,明显低于激光组(115.89±5.04)μm,差异有统计学意义(P<0.05)。TF-TP给药组视网膜脉络膜组织中CD34表达的A值为0.09±0.03,明显低于激光组(0.16±0.01),差异有统计学意义(P<0.05)。正常对照组、激光组、TF-TP给药组TF蛋白的相对表达量分别为0.14±0.01、0.40±0.02、0.22±0.03。TF-TP给药组TF蛋白的相对表达量明显低于激光组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TF-TP可以减小激光诱导的小鼠CNV厚度,降低视网膜脉络膜组织中CD34以及RPE脉络膜混合物中TF蛋白的表达,抑制小鼠CNV的形成。

miR-1247通过靶向CC趋化因子配体16调控肺炎幼鼠巨噬细胞极化和过敏性炎症

目的探究miR-1247通过靶向CC趋化因子配体16(CC chemokine ligand 16,CCL16)调控肺炎幼鼠巨噬细胞极化和过敏性炎症的机制。方法BALB/C幼鼠维持在特定的无病原体条件下的医学院动物设施中。所有实验使用年龄和性别匹配的对照小鼠。实验分为3组:对照组(在指定的时间段内给予PBS,1 mg/kg,气管内);肺炎组(在指定的时间段内给予LPS,1 mg/kg,气管内);miR-1247模拟组(气管内滴注miR-1247模拟物2 mg/kg,24 h后,在指定的时间段内给予PBS或LPS,1 mg/kg,气管内)。通过RT-PCR实时分析2组小鼠中miR-1247和CCL16 mRNA表达。荧光素酶报告基因检测miR-1247靶向CCL16。通过ELISA测量血液中凋亡蛋白[B细胞淋巴瘤-2(B cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bax和Caspase-3]以及TNF-α,IL-6和IL-10的水平。通过流式细胞仪测量M1标记基因(iNOS和IL-1β)以及M2标记基因(Arg1和Mrc1)表达。通过蛋白质免疫印迹检测p-p38、p-p65、p-ERK和p-JNK蛋白表达水平。结果肺炎组较对照组miR-1247 mRNA表达降低,CCL16 mRNA表达升高(P<0.05)。与模拟对照组比较,miR-1247模拟组抑制了CCL163’UTR野生型的相对荧光素酶活性(P<0.05),miR-1247模拟组对CCL163’UTR突变型的相对荧光素酶活性没有显著影响(P>0.05)。肺炎组较对照组Bcl-2表达降低,Bax和Caspase-3表达水平升高(P<0.05),miR-1247模拟组较肺炎组Bcl-2表达升高,Bax和Caspase-3表达水平降低(P<0.05)。肺炎组较对照组TNF-α和IL-6表达水平升高,IL-10表达水平降低(P<0.05),miR-1247模拟组较肺炎组TNF-α和IL-6表达水平降低,IL-10表达水平升高(P<0.05)。肺炎组较对照组iNOS和IL-1β表达水平升高,Arg1和Mrc1表达水平降低(P<0.05),miR-1247模拟组较肺炎组iNOS和IL-1β表达水平降低,Arg1和Mrc1表达水平升高(P<0.05)。肺炎组较对照组p-p38、p-p65、p-ERK和p-JNK蛋白表达水平升高(P<0.05),miR-1247模拟组较肺炎组p-p38、p-p65、p-ERK和p-JNK蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论miR-1247的过表达可通过靶向CCL16减轻肺炎幼鼠巨噬细胞损伤。JNK和NF-κB通路可能是调节miR-1247在肺炎幼鼠巨噬细胞损伤中的作用的关键机制。

靶向血管内皮生长因子受体2微泡造影剂评价肿瘤血管生成的实验研究

目的:探讨靶向血管内皮生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR2)微泡造影剂用于肿瘤血管生成的超声分子成像。方法:用生物素-亲和素桥接法制备靶向VEGFR2超声微泡,免疫荧光法检测微泡与抗体的结合。建立裸鼠Hep G2肝癌皮下种植瘤模型,随机分成靶向组(n=5)和非靶向组(n=5),经尾静脉团注相同剂量靶向微泡或非靶向微泡,录像并绘制时间-强度曲线(time-intensity curve,TIC);注入造影剂5 min后利用高声压爆破技术清除肿瘤内部微泡,比较爆破前后两组造影图像灰阶强度的下降,估计靶向微泡在体内与靶点的结合能力。结果:靶向造影剂和非靶向造影剂均表现为裸鼠皮下瘤的显著增强,但TIC显示两组间曲线下面积差异有统计学意义[(3 940.4±200.9)dB·s vs.(2 796.8±452.3)dB·s,P=0.001];微泡爆破后靶向组灰阶强度降低显著大于非靶向组[(7.61±2.20)dB vs.(3.74±1.40)dB,P=0.010]。结论:靶向VEGFR2微泡造影剂在体内能显著增强肿瘤血管成像,可作为监测肿瘤血管生成的较可靠分子影像学探针。

上皮生长因子受体(EGFR)靶向治疗药物(易瑞沙)治疗非小细胞肺癌的疗效及影响因素

目的探讨上皮生长因子受体(EGFR)靶向治疗药物易瑞沙治疗非小细胞肺癌的疗效、影响因素。方法晚期非小细胞肺癌患者90例,根据不同的用药方案进行分组,观察组给予易瑞沙口服治疗,对照组不给予易瑞沙和放化疗治疗。回顾性分析患者围手术期有关的因素:性别、年龄、AJCC疾病分期、ECOG PS、病理分型(鳞癌、腺癌、其他类型)、化疗的次数、化疗的方案、吸烟情况等指标。结果 (1)观察组总控制率(97%)明显高于对照组(68%),两组比较差异具有统计学意义,P<0.05。(2)观察组恶心呕吐发生率为8%,腹痛腹泻发生率为5%,口腔炎发生率为3%,皮疹为50%,头晕发生率为5%。(3)吸烟、病理分型与患者的生存率具有显著相关性。(4)影响预后情况的独立因素包括吸烟、非腺癌。结论易瑞沙治疗非小细胞肺癌疗效显著,尤其是腺癌、不吸烟患者疗效更为理想。其疗效受到病理类型、吸烟因素的影响,可作为预后提示的独立预测因素。

咖啡酸对铜绿假单胞菌群体感应抑制探究

世界范围内,病原菌对抗生素的耐药性日趋严峻,但药物研发效率日趋缓慢,迫切需要新的抗感染药物或药物作用靶点。铜绿假单胞菌群体感应系统(quorum sensing,QS)与其致病性密切相关,寻找靶向QS系统的抑制剂是新型抗感染药物新策略。前期研究发现,以咖啡酸为主要成分的大血藤提取物对铜绿假单胞菌的群体感应具有转录抑制作用。进一步探究了咖啡酸对铜绿假单胞菌的QS系统相关基因的表达和毒性因子产生的抑制作用;通过分子对接结合缺失突变体感染白菜模型检测,探究了咖啡酸的作用靶点。结果表明:咖啡酸显著抑制铜绿假单胞菌QS系统相关基因rhlR、rhlI、pqsA、pqsR及其调控的毒性因子的编码基因如phzA 1、lasB等,进一步抑制该类毒性因子的产生和降低了细菌的运动性和生物被膜,最终降低了铜绿假单胞菌的感染性,其可能通过靶向pqs系统发挥其QS抑制作用。

EGFR–TKI靶向治疗对老年突变优势晚期肺癌患者肿瘤标志物及生存的影响

目的:探讨应用表皮生长因子受体(EGFR)–络氨酸激酶抑制剂(TKI)靶向治疗对EGFR突变状态未明但具突变优势的老年晚期肺癌患者的血清肿瘤标志物及生存状况的影响。方法:选取平潭综合实验区医院2019年10月至2021年5月期间收治的20例老年晚期肺腺癌患者,患者均为EGFR突变状态未明但具备突变优势特征。随机将患者分两组,各10例。观察组患者采取EGFR–TKI(吉非替尼)靶向治疗,对照组患者使用白蛋白紫杉醇与顺铂双药化疗。两组患者治疗3个月后,评价临床疗效,并采集患者治疗前后的血清标本,测定其癌胚抗原(CEA),细胞角蛋白19片段(CYFRA21–1),鳞状细胞癌相关抗原(SCC)的指标水平;患者均随访1年,以卡氏功能状态(KPS)评分评价生存质量。结果:两组患者治疗总有效率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者CEA、CYFRA21–1、SCC均有不同程度降低,且治疗3个月观察组患者CEA、CYFRA21–1、SCC均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后两组患者生存质量评分均有不同程度提高,且治疗3个月观察组患者生存质量评分均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组患者生存8例(80.00%),高于对照组2例(20.00%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:应用EGFR–TKI靶向治疗EGFR突变状态未明但具备突变优势特征老年晚期肺癌患者效果较好,可有效降低患者肿瘤标志物水平,提高其生存质量。

吲哚-3-甲醇通过抑制mTOR/HIF-1α信号通路减弱低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞增殖

目的观察吲哚-3-甲醇(I3C)对低氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的作用。方法采用0.2%Ⅰ型胶原酶消化分离SD大鼠PASMCs,以低氧(1%O2)作为诱导剂,建立PASMCs增殖的细胞模型,以不同浓度的I3C(25、50、100、200μmol·L^(-1))干预24 h,检测细胞增殖及存活率;设置哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂rapamycin或缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制剂LW6为阳性对照组,以100μmol·L^(-1 )I3C,HIF-1α稳定剂DMOG或mTOR激活剂MHY1485干预24 h后,CCK-8试剂盒检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测HIF-1α、总的mTOR及磷酸化的mTOR和细胞周期调控相关蛋白的表达,确定I3C抑制PASMCs增殖的作用机制。结果25~100μmol·L^(-1 )I3C抑制低氧诱导的PASMCs增殖的作用具有浓度依赖性(P<0.05),而100μmol·L^(-1)与200μmol·L^(-1 )I3C抑制细胞增殖的作用无明显差异,且I3C无明显细胞毒性作用。I3C(100μmol·L^(-1))与LW6均可抑制低氧诱导的PASMCs增殖,阻滞细胞周期于G0/G1期,抑制HIF-1α、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、Cyclin E、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2、CDK4和CDK6的表达(P<0.05),且DMOG能够逆转I3C的上述作用(P<0.05)。另外I3C与rapamycin在抑制低氧诱导的PASMCs增殖与mTOR/HIF-1α信号通路活化方面作用相似,且MHY1485能够逆转I3C抑制细胞增殖及mTOR/HIF-1α信号通路活化的作用(P<0.05)。结论I3C可通过抑制mTOR/HIF-1α信号通路减弱低氧诱导的PASMCs增殖。

EGFR靶向药物在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌是常见的消化系恶性肿瘤,传统的化疗和放疗效果均不甚理想.表皮生长因子受体(EGFR)信号转导通路在结直肠癌细胞的增殖、血管生成、侵袭、转移等方面有重要作用.因此,针对EGFR的靶向药物已陆续开发,并应用于结直肠癌治疗的临床实践.本文就EGFR靶向药物在结直肠癌中的研究现状及其相关问题进行综述.

MicroRNA-766-3p靶向调控SIRT6抑制肝癌进展的实验研究

目的:探究miR-766-3p是否可通过调节靶基因SIRT6影响肝细胞癌(HCC)的发生与发展进程。方法:RT-PCR及Western blot检测miR-766-3p及SIRT6在HCC组织及癌旁组织中的表达;CCK-8、流式凋亡检测技术、划痕实验及Trans well小室检测miR-766-3p/SIRT6对HCC细胞生长、凋亡、转移及侵袭能力的影响;荧光报告基因实验及western blot技术检测miR-766-3p对SIRT6表达的影响。结果:miR-766-3p在HCC组织中低表达,而SIRT6高表达。过表达miR-766-3p通过与SIRT6的3’UTR区结合降低SIRT6的表达。上调miR-766-3p明显抑制HepG2细胞增殖、转移及侵袭能力,促进细胞凋亡;但SIRT6过表达后终止miR-766-3p的以上作用。结论:miR-766-3p通过靶向负调控SIRT6的表达抑制HCC进展。

流式细胞术检测外周血白细胞产生的巨噬细胞趋化抑制因子

越来越多的证据表明，氧化还原酶趋化抑制因子(MIF)是调节内毒素以及核转录因子产生的重要因子，因此在严重脓毒症患者免疫治疗中有可能成为一种新的靶因子。而迄今为止，MIF主要采用酶联免疫吸附法检测，对不同白细胞亚群MIF的表达则无法进行分析。最近，德国学者报道了高灵敏的流式细胞术用于MIF细胞内水平检测的方法。这种方法既能应用于经体外培养全血白细胞内MIF的测定，也能用于未经培养的人全血白细胞亚群分析，对T淋巴细胞、B淋巴细胞、