酸性鞘磷脂酶在瘦素抵抗调控中的应用

瘦素是脂肪细胞分泌的一种激素,在食物摄取和维持体重中具有重要作用,对能量摄入具有负反馈调节作用。目前,已知大多数饮食诱导的肥胖(DIO)个体与瘦素抵抗相关,表现为瘦素敏感性降低和高瘦素血症。酸性鞘磷脂酶(ASM)是催化鞘磷脂水解成神经酰胺的关键酶,在多种疾病的发展中起着关键作用。迄今为止,虽然已有各种研究来解释ASM对各种疾病的致病机制,但是人们对ASM和瘦素抵抗的关系知之甚少。因此,探讨ASM和瘦素抵抗之间的关系可能为瘦素抵抗和瘦素抵抗相关疾病的治疗提供新的策略。

鞘磷脂合成酶2通过Wnt/β-catenin通路调控卵巢癌TOV-21G细胞的恶性生物学行为

目的:探讨鞘磷脂合成酶2(SMS2)是否通过Wnt/β-catenin信号通路调控卵巢癌(OC)TOV-21G细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及其机制。方法:收集武汉市第三医院2022年7月至2023年5月间确诊的21例OC患者的癌及癌旁组织标本,免疫组化法检测OC组织SMS2表达水平。体外培养TOV-21G细胞,将细胞分为对照组、shRNA慢病毒阴性对照组(sh-NC组)、SMS2 shRNA慢病毒组(sh-SMS2组)、Wnt/β-catenin通路激活剂组LiCl(LiCl组)和sh-SMS2+LiCl组。Edu染色法、Transwell法、流式细胞术分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力及凋亡水平,WB法检测细胞中SMS2、Ki67、cyclin D1、BAX、c-caspase3、Bcl-2及Wnt/β-catenin通路蛋白(β-catenin、c-Myc、MMP-9)的表达。构建TOV-21G细胞裸鼠移植瘤模型,观察敲低SMS2对移植瘤生长和SMS2、β-catenin表达的影响。结果:与癌旁组织比较,OC组织中SMS2呈高表达(P<0.01)。转染sh-SMS2后,TOV-21G细胞中SMS2表达水平显著降低(P<0.05),细胞的增殖、迁移和侵袭能力及Bcl-2、β-catenin、c-Myc、MMP-9蛋白表达均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率、BAX、c-caspase3蛋白表达均显著升高(均P<0.05);LiCl处理能逆转敲低SMS2对TOV-21G细胞增殖、迁移和侵袭及Wnt/β-catenin通路的抑制作用(均P<0.05)。体内成瘤实验显示,敲低SMS2抑制裸鼠移植瘤的生长及SMS2、β-catenin蛋白的表达(均P<0.05)。结论:敲低SMS2表达通过Wnt/β-catenin信号通路抑制OC TOV-21G细胞的增殖、迁移、侵袭并促进细胞凋亡,同时LiCl处理则能逆转敲低SMS2对TOV-21G细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用。

成年女性抑郁症患者血浆鞘磷脂组成特点与抑郁症状的相关性分析

目的分析成年女性抑郁症患者血浆鞘磷脂(SM)组成特点与抑郁症状的相关性。方法选取2020年5月至2021年3月我院收治的28例女性抑郁症患者作为观察组,同期招募25名健康女性作为对照组。采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)评估抑郁、焦虑严重程度,采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)检测血浆中SM水平,分析SM组成特点与抑郁症状的相关性。结果观察组的HAMD、HAMA评分高于对照组(P<0.001)。观察组的SM总量水平显著低于对照组(P=0.018)。观察组的SM(t40∶1)+HCOO、SM(d40∶0)+H、SM(d36∶4)+H、SM(d30∶2)+H水平显著低于对照组(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,SM差异分子与HAMA、HAMD评分呈负相关(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线结果显示,SM(d40∶0)+H、SM(t40∶1)+HCOO、SM(d36∶4)+H、SM(d30∶2)+H的曲线下面积(AUC)分别为0.903、0.807、0.803、0.727。结论抑郁症患者的血浆SM组成特点与抑郁症状呈负相关,SM(d40∶0)+H、SM(t40∶1)+HCOO、SM(d36∶4)+H、SM(d30∶2)+H分子可能是诊断女性抑郁症的潜在生物学标志物。

肾虚肝郁型多囊卵巢综合征患者LncRNA SRA和鞘磷脂的表达及其对疾病的诊断意义

目的:探讨肾虚肝郁型多囊卵巢综合征(PCOS)患者与正常对照组患者的临床特征及血清LncRNA SRA和鞘磷脂(SM)水平的差异。方法:纳入30例肾虚肝郁型PCOS妇女作为病例组,30例正常的妇女作为对照组,测定临床指标和血清LncRNA SRA、SM水平,应用SPSS软件进行数据统计分析。结果:肾虚肝郁型PCOS患者T、DHEAS、GS、LncRNA SRA、SM、LH、PRL、E_(2)、AND、CHO、FAI、LH/FSH等水平明显高于对照组(P<0.05);LncRNA SRA的ROC曲线下面积(AUC)为0.733,敏感性和特异性分别为70%和73%。SM的AUC为0.691,敏感性和特异性分别为57%和80%。结论:肾虚肝郁型PCOS患者血清中LncRNA SRA和SM水平增高,LncRNA SRA和SM水平可以作为肾虚肝郁型PCOS的诊断标志物,为肾虚肝郁型PCOS疾病的诊断提供依据,同时可以为PCOS的药物治疗提供靶点。

酸性鞘磷脂酶对非酒精性脂肪肝病的作用及PPARα-PGC-1α通路的影响

目的观察酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASMase)在高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝病中的作用及对PPARα-PGC-1α通路的调控作用。方法构建基于C57BL/6背景的ASMase敲除小鼠,与野生型小鼠杂交后,获得封闭群杂合子(ASMase^(+/-))用于制备NAFLD模型。实验分4组,野生型正常对照组(WT+Chow)、野生型高脂组(WT+HFD)、ASMase杂合子正常对照组(ASMase^(+/-)+Chow)、ASMase杂合子高脂组(ASMase^(+/-)+HFD)。对照组给予基础饲料饲养12周,高脂组给予高脂饲料饲养12周。实验结束后,生化法检测血清和肝脏脂质水平及肝功能变化;油红染色、HE染色、Masson染色和天狼星红染色分别观察肝脏中脂肪堆积和形态学变化;采用Amplex TM Red Sphingomyelinase试剂盒检测ASMase活性;Western blot检测ASMase、PPARα及其辅激活因子PGC-1α、下游基因CPT1的蛋白表达。结果WT+HFD组小鼠出现高胆固醇血症和肝功能异常,肝脏甘油三酯(TG)水平较WT+Chow组小鼠明显升高(P<0.05或P<0.01),肝细胞出现脂肪变性、空泡样变和肝纤维化,同时肝脏ASMase蛋白表达和活性升高(P<0.01或P<0.001),但CPT1、PPARα和PGC-1α蛋白表达较WT+Chow组无统计学意义;ASMase^(+/-)+HFD组小鼠肝脏TG含量较WT+HFD组明显降低,空泡样变和肝纤维化程度改善,并上调PPARα及其靶基因PGC-1α和CPT1的蛋白表达。结论ASMase促进肝脂肪变性和肝纤维化,可能与其抑制PPARα-PGC-1α通路有关。

鞘磷脂合酶的生物学功能及与动脉粥样硬化的关系

鞘磷脂是细胞膜及血浆脂蛋白中的重要脂质,有着广泛而重要的生物学功能,并与动脉粥样硬化的发生发展密切相关,其含量改变已成为动脉粥样硬化的独立危险因素之一;而鞘磷脂合酶是鞘磷脂合成的关键酶,其表达水平及活性高低直接影响到动脉粥样硬化的病理过程,有可能成为动脉粥样硬化治疗的新靶点。该文就鞘磷脂合酶的结构、生物学功能、在动脉粥样硬化形成过程中的作用,及其作为AS治疗潜在靶点的研究近况进行了全面的综述。

丙泊酚对不同发育时期斑马鱼鞘磷脂蛋白表达的影响

目的探讨丙泊酚对斑马鱼鞘磷脂蛋白(MBP)表达的影响及相关机制。方法将受精后6~48 h胚胎(共180个)采用随机数字表法分别浸泡于新鲜养鱼水(对照组)、含二甲基亚砜养鱼水(二甲基亚砜组)和含30μg/mL丙泊酚养鱼水(丙泊酚组)中,每组60个胚胎。于受精后3、4、5、6、7、10 d收集幼鱼,通过RT-qPCR法和Western blot法检测不同发育时期mbp mRNA及蛋白表达。采用TUNEL、免疫荧光法检测3 d少突胶质细胞的凋亡情况。采用RT-qPCR和Western blot法检测凋亡相关因子caspase-8、caspase-9和caspase-3的表达。结果与对照组相比,丙泊酚组出生后3~7 d幼鱼mbp mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05);丙泊酚组少突胶质细胞凋亡增多,并伴随caspase-8、caspase-9和caspase-3 mRNA和蛋白的表达上调。结论丙泊酚抑制MBP表达具有短期持续性,其机制可能与少突胶质细胞凋亡相关。

酸性鞘磷脂酶和铁死亡在乳腺癌中的研究进展

女性乳腺癌发病率已经超过肺癌成为最常见的恶性肿瘤,2020年的数据显示女性乳腺癌发病人数230万,占癌症新发病例的11.7%[1]。乳腺癌的高发病率导致其全球负担越来越严峻,乳腺癌的发病率和死亡率在发展中国家呈快速上升趋势[2]。乳腺癌疾病负担及其次生社会问题急待解决,尤其在年轻乳腺癌患者中尤为突出。年轻乳腺癌患者(年龄<40岁)需面对如生育、生殖器官功能的保留等特定的社会问题。加之年轻乳腺癌患者有不同的风险因素、临床特点及肿瘤生物学特征[3].

ABCA7转运鞘磷脂功能障碍与阿尔茨海默病进展及严重程度的关系

目的探究三磷酸腺苷结合盒转运子(ABC)A7转运鞘磷脂功能障碍与阿尔次海默病(AD)病程进展及病情严重程度的关系。方法160例AD患者,筛选患者鞘磷脂代谢异常和ABCA7变异情况,并将患者分为A组(同时具备鞘磷脂代谢异常和ABCA7变异)、B组(仅有鞘磷脂代谢异常无ABCA7变异)、C组(仅有ABCA7变异无鞘磷脂代谢异常)和D组(均无鞘磷脂代谢异常和ABCA7变异),比较各组简易智力状态检查(MMSE)量表评分和日常生活能力(ADL)量表评分,另外通过对筛出鞘磷脂代谢异常和ABCA7变异的病例(A组)进行基因测序,检出ABCA7的单核苷酸多态性(SNP)位点rs3764650、rs115550680、rs3752246和rs4147929,分别培养这些SNP的细胞株和ABCA7正常的细胞株(对照组),并检测鞘磷脂代谢水平。结果A组、B组MMSE评分、ADL评分显著低于C组、D组(P<0.05);细胞实验结果显示,ABCA7 rs3764650组鞘磷脂含量显著低于对照组(P<0.05)。结论AD相关基因ABCA7具有转运鞘磷脂的功能,ABCA7转运鞘磷脂功能障碍与AD病程进展及病情严重程度有关。

酸性鞘磷脂酶/神经酰胺通路在神经系统疾病中的研究进展

研究表明酸性鞘磷脂酶/神经酰胺(ASMase/Cer)通路可介导细胞免疫调节、炎症、凋亡等细胞活动,与多种神经系统疾病,如缺血性脑卒中、阿尔兹海默病、a-突触核蛋白病等的发生、发展密切相关,ASMase/Cer通路有可能成为它们治疗的靶点。本文综述了ASMase/Cer通路在缺血性脑卒中、阿尔兹海默病、a-突触核蛋白病等神经系统疾病的生物学功能及调节机制的最新研究进展。

鞘磷脂酶在消化道恶性肿瘤中的研究进展

鞘磷脂酶(SMPD)是一种可以将鞘磷脂水解为神经酰胺和磷酸胆碱的水解酶,在鞘磷脂代谢中起主要作用。相关研究显示,SMPD家族在多种类型肿瘤中异常表达,并且在肿瘤发生、发展、耐药等方面发挥重要调控作用。因此SMPD有望成为肿瘤诊断和预后预测的标志物及治疗靶点,具有重要的临床转化价值。本文集中阐述了SMPD全家族分子的结构和功能特点,并综述SMPD在消化道恶性肿瘤中的作用及其机制研究进展,从而为消化道恶性肿瘤的靶向治疗及患者预后评估提供新的研究思路和策略。

神经鞘磷脂合成酶基因沉默对细胞凋亡的影响

以HEK293细胞为模型,利用RNA干扰技术,将神经鞘磷脂合成酶(SMS)的同工酶(SMS1和SMS2)的siRNA分别联合、转染HEK293细胞.通过薄层层析法评价SMS酶活性,同时测神经酰胺(Cer)、卵磷脂(PC)及神经鞘磷脂(SM)的水平,并以流式细胞仪和AnnexinV-FITC、PI双染法检测细胞凋亡.结果显示,与对照组相比,SMS基因沉默后SMS表达水平降低(分别降低17%,20%,49%);SM水平显著性降低(P<0.05);Cer水平显著性升高(P<0.05);TNF-α诱导的凋亡显著性升高[分别为58%(P<0.01),24%(P<0.05),77%(P<0.01)].这些结果提示,SMS基因沉默能降低SM水平并升高Cer水平,明显增加TNF-α诱导的HEK293细胞凋亡.由于SM是动脉粥样硬化形成的独立危险因子,因此本研究有可能为动脉粥样硬化的治疗找到新的靶点和有效途径.

长期酒精暴露诱导胰岛素抵抗及视网膜微血管损伤:神经鞘磷脂的可能作用

目的探讨长期酒精暴露诱导胰岛素抵抗对小鼠血视网膜屏障的损伤以及神经鞘磷脂(SM)可能的作用。方法选取神经鞘磷脂合成酶2(SMS2)基因敲除(SMS2-/-)和野生型(WT)小鼠76只,酒精暴露建立动物模型。用血糖仪测定血糖浓度,酶联免疫法(ELISA)测定血胰岛素浓度,并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),利用免疫荧光染色、HE和电子显微镜观察血视网膜屏障的损伤。结果长期酒精暴露引起小鼠胰岛素抵抗(P<0.05),并出现血视网膜屏障的损伤,如无细胞毛细血管数增多(P<0.05),星形胶质细胞数量减少(P<0.05),内皮细胞和周细胞线粒体肿胀,嵴消失,基底膜欠清晰,呈剂量依赖性。和WT小鼠相比,SMS2-/-小鼠胰岛素抵抗指数较小和血视网膜屏障损伤程度较轻(P<0.05),提示SMS2-/-小鼠有延缓胰岛素抵抗形成和减少血视网膜屏障损伤的作用。结论长期酒精暴露可以诱导胰岛素抵抗,并造成血视网膜屏障损伤,具有剂量依赖性;SMS2基因的缺失有延缓胰岛素抵抗的产生和减少血视网膜屏障损伤的作用。

鞘磷脂类信号通路在大鼠心脏缺血再灌注损伤中的作用及机制探讨

目的探讨鞘磷脂类信号通路在大鼠心脏缺血再灌注损伤中的作用及作用机制。方法 40只SD级大鼠随机分为对照组、缺血再灌注组(研究1组)、神经酰胺酶预适应组(研究2组)和神经酰胺酶后适应组(研究3组),每组各10只,4组大鼠离体心脏,并置于离体心脏灌流系统中持续灌注Kerbs-Henseleit缓冲液30 min,其中对照组持续灌注150 min,研究1组停止灌注30 min后,Kerbs-Henseleit缓冲液再灌注120 min;研究2组用含有神经酰胺酶的Kerbs-Henseleit缓冲液灌注10 min,停止灌注30 min后,再灌注120 min;研究3组停止灌注30 min后,用含有神经酰胺酶的Kerbs-Henseleit缓冲液灌注10 min,再用常规Kerbs-Henseleit缓冲液灌注110 min。记录各组心脏冠脉流出液CK、LDH水平、心肌梗死面积,并检测组织匀浆中酸性鞘磷脂酶(ASMase)、中性鞘磷脂酶(NSMase)、中性神经酰胺(NCDase)水平。结果研究1组、研究2组、研究3组大鼠心脏灌流液中CK、LDH显著高于对照组,研究1组CK、LDH又显著高于研究2组和研究3组(P<0.05);对照组大鼠未见心肌梗死组织,研究1组心肌梗死比例显著高于研究2组和研究3组(P<0.05),研究2组和研究3组组间CK、LDH水平及心肌梗死比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,研究1组织匀浆中ASMase、NSMase显著升高,NCDase显著降低,研究2组、研究3组ASMase、NSMase、NCDase均显著升高(P<0.05);其中研究2组、研究3组ASMase、NSMase显著低于研究1组,NCDase显著高于研究1组(P<0.05),研究2组和研究3组组间ASMase、NSMase、NCDase水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论缺血再灌注损伤能够激活ASMase、NSMase和抑制NCDase,使心肌细胞神经酰胺释放增加,导致心肌损伤;采用鞘磷脂酶预适应和后适应能够逆转或改善缺血再灌注损伤,证实鞘磷脂类信号途径在调节心脏缺血再灌注损伤中发挥重要作用。

碱性鞘磷脂酶与脂类代谢相关疾病的研究进展

碱性鞘磷脂酶(Alk-SMase)存在于肠道和人的胆汁中,是消化道中水解鞘磷脂的关键酶。鞘磷脂的消化水解作用减弱,代谢活性产物减少,将导致细胞增生、凋亡、炎症等失去调控,最终导致癌症的发生。脂类代谢是人类体内重要的代谢过程,Alk-SMase及其代谢产物也能影响肠道中磷脂、胆固醇和三酰甘油等脂类的代谢,最终导致肝胆疾病、肠道炎症以及结肠肿瘤的发生。本文将重点讨论Alk-SMase与脂类代谢的关系,对近年来AlkSMase与脂类代谢相关疾病的研究进展作一简要综述。

酸性神经鞘磷脂酶的生物学特性及其功能

神经鞘磷脂酶(SMase)可水解鞘磷脂产生神经酰胺,在人体内发挥重要作用。酸性神经鞘磷脂酶(ASMase)作为SMase最重要的一个亚型,在辐射诱导细胞凋亡、调节肿瘤细胞生长、参与Fas信号系统传递等方面均可发挥重要作用。

碱性鞘磷脂酶在结肠癌中作用研究进展

碱性鞘磷脂酶(alkaline sphingomyelinase,alk-SMase)是消化肠道中鞘磷脂的关键酶。当碱性鞘磷脂酶基因突变或去糖基化蛋白结构变化时其活性下降,鞘磷脂消化水解作用减弱,代谢活性产物减少,导致细胞增生、凋亡、炎症等失去调控,最终诱导癌症发生。有望通过对碱性鞘磷脂酶深入研究,能鉴定和确认突变型碱性鞘磷脂酶作为一种特异性更强、灵敏度更高的肿瘤标记,为结肠癌的早期诊断、早期治疗、疗效评价及预后判断提供更有效方法。

HEK293、COS7、7721、HepG2和PC12细胞内神经鞘磷脂合成酶活性比较

目的:分析比较HEK293、COS7、7721、HepG2和PC12的细胞内神经鞘磷脂合成酶(SMS)的活性。方法:收集处于对数生长期的HEK293、COS7、7721、HepG2和PC12细胞,每种细胞的细胞浓度相同;5种细胞均建立2个酶促反应体系,反应时间分别是2 h和3.5 h;薄层层析和灰度扫描分析比较SMS活性强弱。结果:HEK293细胞内的SMS活性较强。结论:建立了有效检测不同来源细胞SMS活性比较的方法,发现HEK293细胞具有较强的SMS活性,可以更好的用于神经鞘磷脂代谢的研究。

酸性鞘磷脂酶在环境健康中的潜在作用(英文)

酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase,ASM)是一种通过水解鞘磷脂产生酰胺的重要溶酶体酶。最近的调查结果显示,在酰胺诱导细胞凋亡的启动以及许多常见疾病(如心血管疾病,糖尿病,肺部疾病,神经系统疾病)的病理生理过程中,ASM都起着重要介导和调节作用。其他研究也表明,活性氧和活性氮的产生,以及环境和职业应激所致的炎症反应都可以激活ASM。ASM的激活会产生大量的酰胺,并引起细胞膜上的酰胺分布异常,这可能导致相应组织和器官(包括肺,肝,肾和神经系统)的损伤。本文综述ASM的基础生物学,重点讨论ASM在环境应激反应过程中的调控和作用。笔者认为ASM激活是环境健康中的一个重要因素,基于ASM的疗法对预防和治疗相应环境因素诱导的组织损伤可能有重要作用。

鞘磷脂代谢物与肺癌关系的研究进展

近年对鞘磷脂及其代谢产物的研究越来越多,鞘磷脂是细胞膜的主要组成成分,其代谢产物如神经酰胺（ceramide,Cer）、鞘氨醇（sphingosine,Sph）、1-磷酸鞘氨醇（sphingosine-1-phosphate,S1 P）是具有生物活性的信号分子,可作为第一和（或）第二信使调控细胞的生命活动,如细胞的生长、分化、衰老和凋亡等许多重要的信号转导过程.近年研究表明,Cer、Sph、S1 P可调控肿瘤细胞代谢的多个环节,由此本文针对鞘磷脂代谢产物在肺癌中的研究作如下综述.