酸性鞘磷脂酶样磷酸二酯酶3b在足细胞损伤相关肾病中的研究进展

足细胞在维持肾小球滤过屏障的结构和功能方面发挥重要作用,足细胞损伤可导致临床蛋白尿的发生、肾小球硬化及肾功能损害。酸性鞘磷脂酶样磷酸二酯酶3b(SMPDL3b)是足细胞膜上与鞘磷脂代谢相关的糖基磷脂酰肌醇锚定酶,是足细胞功能的重要调节因子,可通过与可溶性尿激酶纤溶酶原激活物受体相互作用,影响整合素活性,导致足细胞表型转变;还与糖尿病肾病胰岛素受体信号通路密切相关,在多种蛋白尿相关性肾脏疾病发病机制中起重要作用。通过稳定体内SMPDL3b水平调控脂类代谢可能成为足细胞相关肾病定向治疗的新靶点。

家兔实验性动脉粥样硬化时主动脉鞘磷脂酶活性与神经酰胺含量变化及大黄素的影响

目的观察家兔实验性动脉粥样硬化时主动脉鞘磷脂酶活性与神经酰胺含量的变化及大黄素的影响作用。方法在合格家兔上,按文献报道的用喂饲含胆固醇、猪油饲料的方法复制模型,1%的胆固醇配5%的猪油,复制期为10周。用酶法测定血胆固醇含量,用微量快速测定法测定血浆超氧化物歧化酶活性,用改良八木国夫法测定血丙二醛含量,用放射酶法测定主动脉鞘磷脂酶活性,用薄层扫描法测定主动脉神经酰胺含量。结果家兔实验性动脉粥样硬化时主动脉鞘磷脂酶活性及神经酰胺含量明显高于对照组,相关性分析显示主动脉鞘磷脂酶活性及神经酰胺含量与血总胆固醇(TC)含量、血丙二醛(MDA)含量呈正相关,与血超氧化物歧化酶(SOD)活性呈负相关;大黄素各组主动脉内膜脂质斑块面积小于模型组,机体抗氧化酶(超氧化物歧化酶)活性高于模型组,主动脉鞘磷脂酶活性及神经酰胺含量低于模型组,以大黄素Ⅱ组作用更明显。结论家兔实验性动脉粥样硬化的发生可能与高胆固醇血症状态下氧化应激等因素激活神经酰胺信号转导途径有关,大黄素有一定的调节作用。

酸性鞘磷脂酶与帕金森病

酸性鞘磷脂酶(ASMase)不仅介导溶酶体代谢,参与膜结构的调节和信号转导,而且对鞘磷脂转化为神经酰胺起关键作用。ASMase由鞘磷脂磷酸二酯酶1(SMPD1)基因编码。最近有研究显示SMPD1及ASMase与神经退行性疾病如帕金森病的发病和进展相关。该文就SMPD1及ASMase与帕金森病的相关研究进行介绍,以供同行们参考。

抑制中性鞘磷脂酶-2通路保护脑缺血再灌注大鼠

目的 探讨抑制中性鞘磷脂酶-2（neutral sphingomyelinase 2,nSMase2）通路对脑缺血再灌注大鼠脑水肿和脑损伤的影响.方法 将76只雄性成年SD大鼠按随机数字表法分为假手术组（n=12）、模型组（n=16）、赋形剂组（n=16）、SB203580[p38丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase,MAPK）抑制剂]处理组（n=16）和MRS1754[选择性腺苷A2B受体（A2B adenosine receptor,A2BAR）拮抗剂]处理组（n=16）.应用线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,赋形剂、SB203580和MRS1754均在模型制作前30 min侧脑室注射.缺血再灌注24 h后进行神经功能评分,2,3,5-三苯四氮唑染色检测脑梗死体积,干湿重法检测脑组织含水量.应用蛋白质印迹分析检测缺血脑组织内nSMase2和p38 MAPK表达,应用免疫组化染色法检测缺血脑组织nSMase2表达.结果 MRS1754可显著降低大鼠神经行为学评分（P〈0.05）和缩小脑梗死体积（P〈0.05）.MRS1754和SB203580均可显著降低缺血脑组织含水量（P均〈0.05）.此外,MRS1754还能显著降低缺血再灌注后p38 MAPK磷酸化水平（P〈0.05）并降低nSMase2表达水平（P〈0.01）.结论 调控nSMase上游的A2BAR和p38 MAPK可能在脑缺血再灌注损伤后起到神经保护作用.

酸性鞘磷脂酶缺乏症诊断进展

酸性鞘磷脂酶缺乏症(ASMD)又称为A型及B型尼曼匹克病,是一组由于鞘磷脂磷酸二酯酶-1(SMPD1)基因突变使酸性鞘磷脂酶活性下降甚至缺失,从而导致鞘磷脂异常沉积的溶酶体内脂质贮积病。本病可通过骨髓穿刺、病理活检、酸性鞘磷脂酶活性测定及SMPD1基因检测等检查手段确诊。近年来随着分子诊断技术的快速进展,对ASMD分子遗传学检测手段、生物标志物及酸性鞘磷脂酶活性测定等实验室诊断方面有了新的认识。本文将对ASMD的诊断进展作一综述,旨在减少该病误诊漏诊,提高临床医生对该病的认识。

ASM真核表达载体的构建与鉴定

目的:构建含有酸性鞘磷脂酶(Acid sphingomyelinase,ASM)融合基因片段的质粒,并在真核细胞中表达、鉴定。方法:由人淋巴结cDNA文库中扩增基因片段,将ASM基因插入真核表达载体pEGFP-N1中,获得融合基因构建真核表达载体ASM-pEGFP-N1。以其瞬时转染Hela细胞,应用免疫印迹与流式细胞术检测融合蛋白与绿色荧光蛋白的表达。结果:正确获得ASM融合基因,DNA序列分析表明所构建的含ASM融合基因的质粒与设计相同,融合蛋白与绿色荧光蛋白均正确表达。结论:成功构建了含有ASM融合基因的真核表达载体,并在真核细胞中正确表达,为进一步研究肿瘤与ASM表达之间的关系奠定了基础。

过表达骨形态发生蛋白2对骨折大鼠的骨愈合和成骨能力的影响及其可能机制

目的探讨过表达骨形态发生蛋白(BMP)-2对骨折大鼠的骨愈合和成骨能力的影响及其可能机制。方法将60只SD大鼠随机分为模型组、BMP-2过表达的阴性质粒组(pcDNA/NC组)和BMP-2过表达质粒组(pcDNA/BMP-2组),各20只。每组均通过横行切断大鼠股骨中段建立大鼠骨折模型。造模24 h后,给予模型组、pcDNA/NC组、cDNA/BMP-2组大鼠经尾静脉分别注射磷酸缓冲盐溶液、BMP-2过表达的阴性质粒溶液、BMP-2过表达质粒溶液。49 d后,处死所有大鼠,X线片观察各组大鼠骨折线的变化及达到骨性愈合的时间;micro-CT检测各组大鼠的骨密度、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁密度(Tb.Th)和骨小梁数量(Tb.N);蕃红O染色后观察各组大鼠股骨组织病理变化;检测各组大鼠血清中白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10和ALP水平,以及骨组织BMP-2、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、鞘磷脂磷酸二酯酶(Smpd)3、Smad1和Runx2蛋白的表达情况。结果pcDNA/BMP-2组大鼠在第7周时骨折完全愈合。与其他两组比较,pcDNA/BMP-2组骨密度、BV/TV、Tb.Th和Tb.N均升高,血清IL-6、TNF-α水平均下降,血清IL-10水平及ALP活性升高,骨组织BMP2、Smad1、Runx2、p38 MAPK和Smpd3的蛋白表达水平均升高(均P<0.05)。结论过表达BMP-2可加快大鼠骨折愈合,这可能与BMP-2降低炎症因子的表达,上调Smad1和Runx2的表达以促进骨细胞中胶原蛋白的形成,以及通过p38 MAPK调节Smpd3的表达有关。

利妥昔单抗治疗局灶节段性肾小球硬化症机制的研究进展

利妥昔单抗(rituximab,RTX)作为一种作用于B细胞表位CD20的单抗,自2005年被应用于肾脏领域以来,已成为众多肾小球肾炎疾病临床治疗的研究热点。目前对于RTX的研究,除集中在其临床治疗安全性及有效性之外,部分学者仍致力于探讨其对肾脏病治疗的作用机制,试图寻找其在肾脏组织中存在的特异性靶点。该文就RTX在治疗局灶节段性肾小球硬化症中的作用机制研究进展进行综述。

利妥昔单抗治疗特发性局灶节段肾小球硬化的机制和疗效

局灶节段性肾小球硬化(FSGS)是导致终末期肾病的常见肾小球疾病,足细胞损伤是其发病的主要因素。特发性FSGS的足细胞损伤致病机制仍不详,除糖皮质激素、钙调神经蛋白抑制剂外,目前缺乏有效、特异的治疗方法,易复发,部分患者总体预后差。已有多个文献报道利妥昔单抗在特发性FSGS中有效。作为一种B细胞耗竭剂,利妥昔单抗如何在特发性FSGS患者发挥作用,其免疫学药效和细胞保护作用机制仍在研究和观察中。本文将从利妥昔单抗的药物特点出发,复习近年来主要的临床研究和足细胞损伤治疗领域的主要相关研究报道,就利妥昔单抗治疗特发性FSGS的免疫机制和足细胞保护机制作一综述。

SMPD3在肿瘤中生物学作用的研究进展

鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)编码的中性鞘磷脂酶2(nSMase2)作为调节细胞生长变异、诱导细胞凋亡的重要信使分子神经酰胺的关键酶,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。一方面常见的表观遗传学改变SMPD3甲基化通过调控细胞增殖、分化及凋亡等过程使基因表达紊乱介导癌症发生,同时SMPD3还通过其水解产物诱导肿瘤细胞凋亡与生长周期停滞。另一方面,SMPD3还与外泌体分泌、炎症反应及肿瘤细胞增殖等促癌过程密切相关。主要对SMPD3在肿瘤疾病中生物学作用的研究进展进行综述,以期加强对SMPD3在不同肿瘤发生发展中扮演角色的认识,为肿瘤疾病的基础研究与临床诊疗提供更广阔的思路。