新疆榅桲中的鞣质类化合物及其生物活性

榅桲是传统的中药之一,富含具有药用价值的化学成分,如鞣质类、有机酸、氨基酸、挥发油和黄酮等。鞣质类物质主要包括没食子酸鞣质、矢车菊苷配质、儿茶精、表儿茶精等,具有抗菌、抗病毒、抗突变、抗肿瘤、抗脂质过氧化、抑制酶活性,以及抗溃疡、止血、收敛、解毒等功效,对心脏和心血管也有一定的效应。

鞣质类化合物研究的进展情况

鞣质又称丹宁或鞣酸,是一类广泛存在于植物中的能与蛋白质或生物碱结合成沉淀的多元酚类化合物。因其能与生兽皮中的蛋白质结合而形成致密、柔韧、不易腐败、有良好透气性和透水性的皮革,因此称其为鞣质。目前世界上形成了以日本冈山大学奥田拓男等为代表的鞣质专门研究室,使得鞣质成为十分活耀的研究领域。至今已分离鉴定鞣质化合物400多种,新发现的化合物数量之多,类型之广,都超过了以往的总和。鞣质的研究之所以受到重视,这是由其重要性所决定的,本文主要介绍当前鞣质研究的进展情况,对鞣质的各种结构类型、提取分离方法、鉴定、含量测定方法及生物活性和临床应用等做一综述,重点对鞣质的生物活性和临床应用进行了探讨。

鞣质类化合物的分析方法

本文根据近十年来对药用植物中可水解鞣质研究所取得的成就。分别对结构测定方法和提取分离方法进行了综述。结构测定方法包括 IR、UV、~1HNMR、^(13)CNMR、FAB—MS、CD 谱及化学方法,提取分离方法包括总鞣质的丙酮—水提取法、凝胶柱层析法、液滴逆流层析、高效液相层析及分配层析。

大黄鞣质类及蒽醌类化合物的三项生物活性比较研究

应用DPPH(α,α-diphenyl-β-Picryl-hydrazyl)分析法、蘑菇酪氨酸酶多巴速率氧化法和细胞增殖/毒性检测法(CCK-8)测定自由基清除率、酪氨酸酶活性和UVB辐射后细胞存活率比较研究大黄鞣质类及蒽醌类主要化合物的相应生物活性。结果显示:(1)鞣质类没食子酸、儿茶素DPPH清除力高于对照Vit C;(2)两类主要化合物均可抑制酪氨酸酶活性,而中、低浓度(2.5 m M、1.25 m M)芦荟大黄素起抑制作用,高浓度(5 m M)起激活作用;(3)芦荟大黄素、大黄素、大黄酚均可降低UVB辐射后细胞存活率。

中药五倍子鞣质类化合物促进早期龋再矿化的偏振光显微镜研究

目的利用偏振光显微镜研究中药五倍子鞣质类化合物对人工早期釉质龋的再矿化作用。方法应用离体牛切牙制备人工釉质龋标本60例,随机分为6组:(a)去离子水组(阴性对照)、(b)GCE组、(c)GCE-B组、(d)GCE-B1组、(e)GCE-B2组和(f)NaF组(阳性对照),进行体外pH循环实验后,通过偏光显微镜观察早期釉质龋损再矿化前后的病理学改变。结果偏光显微镜下,pH循环后GCE、GCE-B和GCE-B1三组表层明显增厚,密度增加,病损体部出现呈负性双折射的再矿化条带,病损深度也明显变浅,与NaF组相同;而GCE-B2组和阴性对照组(去离子水组)除了龋损表层密度稍有增加,与再矿化前比变化不甚明显。结论五倍子鞣质类化合物:GCE、GCE-B和GCE-B1具有潜在的促进早期龋再矿化的功效。

基于UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS结合诊断离子过滤技术快速分析石榴皮的鞣质类成分

目的应用UPLC-Q-Exactive Orbitrap MS结合诊断离子过滤技术,对石榴皮鞣质类化学成分进行快速鉴定。方法色谱条件为Agilent ZORBAX SB-Aq C18色谱柱(3.0 mm×100 mm,1.8μm);以乙腈(A)-0.05%甲酸水(B)为流动相进行梯度洗脱(0~0.5 min,95%B;0.5~7 min,95%→75%B;7~15 min,75%B;15~30 min,75%→5%B;30~31 min,5%B;31~31.1 min,5%→95%B;31.1~35 min,95%B),流速0.3 mL·min-1,柱温30℃;质谱分析采用加热电喷雾离子源(H-ESI),正、负离子模式扫描,扫描模式为Full MS/dd-MS2,扫描范围m/z 100~1500,碰撞能20、40、60 eV。进而采用质谱数据采集-诊断离子过滤(DIF)-化合物推测及验证的研究流程对鞣质类化合物结构进行鉴定。结果石榴皮中共鉴定出61种鞣质类化合物,含鞣花酸鞣质类43种,没食子酸鞣质类10种,缩合鞣质类8种,其他鞣质类前体化合物8种。其中12种鞣质类成分首次在石榴皮中发现,包括二没食子酰葡萄糖苷及其同分异构体、三没食子酰葡萄糖苷及其同分异构体、(表)没食子儿茶素没食子酸酯、Methyl-3,4,5-trihydroxy-2-(2,3,7,8-tetrahydroxy-5,10-dioxo-5,10-dihydrochromeno[5,4,3-cde]chromen-1-yl)benzoat、(7S,8R,10R,11R,17R)-2,3,15,16,17-pentahydroxy-8-(hydroxymethyl)-5,13-dioxo-5,7,8,10,11,13-hexahydro-1,6,9,12-tetraoxa-7,11-methanocyclotrideca[def]fluoren-10-yl 3,4,5-trihydroxybenzoate、4-Rhamnopyranosyl-ellagic acid、四没食子酰葡萄糖苷及其同分异构体。结论该方法可系统、准确、快速地对石榴皮的鞣质类成分进行表征,为石榴皮药效物质研究和质量评价的进一步研究奠定基础。

UPLC法测定地榆乙酸乙酯部位中4个鞣质类成分

目的建立UPLC法同时测定地榆乙酸乙酯部位中没食子酸、儿茶素、没食子儿茶素没食子酸酯和鞣花酸4种鞣质类成分。方法地榆70%乙醇提取液再经乙酸乙酯萃取,甲醇溶解并定容,分析采用shim-pack XR-ODSIII色谱柱（2.0mm×75mm,1.6μm）,以甲醇-0.5%醋酸水溶液为流动相梯度洗脱,体积流量0.4mL/min,柱温30℃,PDA检测器于274nm波长下对各成分进行定量测定。结果没食子酸、儿茶素、没食子儿茶素没食子酸酯和鞣花酸在18min内均达到基线分离,各成分在其线性范围内均呈现良好的线性关系,线性范围分别为0.048-0.287μg（r^2=0.999 6）,0.151-0.905μg（r^2=0.999 7）,0.169-1.014μg（r^2=0.999 4）,0.040-0.239μg（r^2=0.999 4）。平均加样回收率分别为98.5%（RSD 1.3%）,99.0%（RSD 1.5%）,101.2%（RSD 2.1%）,99.6%（RSD 1.3%）。结论分析表明内蒙古所产地榆中没食子酸和鞣花酸这两类可水解鞣质的含有量大于其他地区。吉林所产地榆中儿茶素类缩合鞣质的含有量较高。

掌叶大黄鞣质类化学成分研究

目的研究掌叶大黄Rheum palmatum根中鞣质类化学成分。方法采用硅胶柱色谱、中压柱色谱及半制备高效液相色谱等多种色谱分离方法对鞣质类成分进行分离,根据波谱数据分析鉴定化合物结构。结果从掌叶大黄的70%乙醇提取物中分离得到4个鞣质类化合物,分别鉴定为3-O-桂皮酰基-1-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖苷(1)、2-O-桂皮酰基-1-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖苷(2)、2-O-桂皮酰基-1,6-O-二没食子酰基-β-D-葡萄糖苷(3)、6-O-桂皮酰基-1-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖苷(4)。结论化合物1为新化合物,命名为掌叶大黄苷。