水貂铜绿假单胞菌鞭毛分型及分离株flic基因的克隆与序列分析

为分析铜绿假单胞菌(PA)分离株鞭毛蛋白基因(flic)之间的差异,本研究通过PCR方法扩增由山东地区发病水貂的肺脏组织中分离的29株分离株flic基因的部分片段,根据其片段长度确定PA的鞭毛类型。选取两种类型代表株(PASD01、PASD03),采用PCR方法扩增flic全基因进行序列分析。结果表明,PASD01分离株与国外A型PA flic基因序列同源性为99.6%～99.7%,PASD03分离株与B型PA flic基因的序列同源性为98.9%～99.5%,而两个分离株之间的序列同源性为76%。本研究首次从水貂病变组织中克隆得到两种鞭毛蛋白类型的flic基因,该基因在各型鞭毛菌株中高度保守,为进一步研制鞭毛亚单位疫苗提供实验依据。

铜绿假单胞菌的血清分型、鞭毛分型和脉冲场凝胶电泳分型

铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）是一种重要的人畜共患病原菌，给人畜健康带来威胁。细菌分型是揭示病原菌流行规律、传播机制以及制定相应防控措施的基础。选取水貂、人和羊源PA共78株分别进行O-抗原血清分型、H-抗原鞭毛分型以及脉冲场凝胶电泳（PFGE）分型。结果显示，60株水貂源PA主要流行血清型为G型（73．3%），其次为I，M，B，E型；鞭毛A型和B型分别占91．7％和8．3％。16株人源PA以血清型E型（25％）为主，其他型别G，M，I，B，D，F，H零散分布，鞭毛A，B型分别占68．8％和31．2％。2株羊源PA血清型为I型（100％），且均为鞭毛B型。PFGE分子分型共分为14个谱型，24个亚型，其中B1、F3、G1、H1这4个亚型的菌株同源性达到100％。结果表明，水貂源PA感染与血清G型和鞭毛A型高度相关（P〈0．01）；人源PA感染优势血清型为E型且与鞭毛A型显著相关（P〈0．01）；2株羊源PA感染均为血清I型和鞭毛B型；不同来源的PA菌株其PF—GE分型呈现多样化和复杂性，相同来源的菌株其PFGE谱型有的完全相同，显示同一个克隆传播的可能，有的差异很大，显示不同分子克隆传播。本试验有助于阐明山东省3种来源PA的分子流行特征，为开展PA相关风险评估、控制及疾病诊治提供依据。