出血性大肠杆菌H_7鞭毛抗原的诱导恢复及鉴定

从进口冻鸡翅中分离获得一株发酵山梨醇、缺失H7鞭毛抗原的出血性大肠杆菌O157:H7变异株,采用0.4%强营养软琼脂对该菌进行连续5代诱导培养,使其H7鞭毛抗原成功恢复。综合该菌的生物学特性、血清学及毒理实验结果确证为大肠杆菌O157:H7。该菌的检出为大肠杆菌O157:H7变异株的鉴定提供了有益参考。

抗乙型副伤寒沙门菌鞭毛抗原McAb的特性分析与初步应用

目的:通过对抗乙型副伤寒沙门菌鞭毛抗原单克隆抗体的特性分析,研制检测乙型副伤寒沙门菌的ELISA法,对副伤寒传染病进行早期诊断。方法:用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并进行鉴定,用双抗体夹心ELISA建立检测乙型副伤寒沙门菌鞭毛抗原ELISA方法,对临床标本进行检测。结果:7株抗乙型副伤寒沙门菌鞭毛抗原的单克隆抗体IgG15株、IgG2 a 1株、IgG2b 1株,均不与相关沙门菌、肠道菌反应,用菌体免疫制备的M cAb 3B5、3G12、7H1、2B5,与乙型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌鞭毛抗原反应,而用纯化的鞭毛抗原免疫制备的单克隆抗体1F4、5D3、3H7,只与乙型副伤寒沙门菌鞭毛抗原,3B5与7H1识别同一抗原表位,3B5、7H1与3G12、2B5相互识别不同抗原表位,1F4、5D3、3H7相互识别不同抗原表位。3B5包被、过氧化物酶(HRP)标记3G12建立双抗体夹心ELISA,鞭毛抗原、菌体的最低检出量分别为5 ng/m l、105个/m l。检测159份献血员血清及70份发热待查血清为阴性,1份发热待查血清、9份血培养阳性患者血清为阳性。结论:用纯化的鞭毛抗原免疫制备的单克隆抗体不适于检测乙型副伤寒沙门菌,菌体免疫制备的单克隆抗体特异性强,建立的双抗体夹心ELISA法,可对乙型副伤寒进行早期诊断。

鞭毛抗原与细菌的群集运动

群集运动是指在培养基表面某些运动细菌依赖鞭毛的群体迁移行为,涉及繁殖体细胞分化成群集细胞,发生形态、代谢以及蛋白表达等显著变化。菌细胞密度、表面接触和生理学信号均可成为群集运动的刺激因素。群集运动的关键是鞭毛的生物合成,flhDC鞭毛操纵子是支配分化和迁移的细菌调控网络的焦点。

苏芸金杆菌血清型1中存在鞭毛抗原亚因子

近年来我们从四川、河北、吉林、云南、广西等地的土壤及死虫中分离到苏芸金杆菌百余株。用菌的鞭毛抗原与生化反应特性鉴定证明,大部分菌株属于 H3及 H4,其中仅一个菌株 G 具有较特异的血清型,它属于 H1,但与标准 H1不同。有关 G 菌株的研究结果报道如下。

对4株失去鞭毛抗原的沙门氏菌实验观察

对４株失去鞭毛抗原的沙门氏菌实验观察李成欢（广东省粤北人民医院５１２０２６）细菌经多次培养，传代菌落由光滑型变为粗糙型，使菌体表面特异性多糖及鞭毛丧失。我室试验了４株经多次传代鞭毛抗原已消失的沙门氏菌。从血平板分离出来的菌落作血清学试验，Ａ－Ｆ多价，...

一种肠出血性大肠埃希菌O157∶H7鞭毛抗原检测新方法

目的 评价抗 -H7血清琼脂方法对大肠埃希菌O15 7∶H7鞭毛抗原的检测效果。方法 采用抗 -H7血清琼脂法对来自人、动物、环境水和食品中的 10 9株疑似O15 7∶H7菌株进行H7鞭毛抗原鉴定 ,并设鞭毛抗原阳性和阴性对照菌株 ,同时与试管凝集法和H 7特异性基因聚合酶链反应 (PCR)法进行比较。结果 3种方法对鞭毛抗原阳性和阴性对照菌株的检测结果均成立 ,抗 -H7血清琼脂法与试管凝集法比较其敏感性、特异性和符合率均为 10 0 % ;而与H7特异性基因PCR法比较其敏感性、特异性和符合率分别为 93 .75 %、95 .3 1%和 97.2 5 %。结论 抗 -H7血清琼脂法是简便快速、稳定可靠的H7鞭毛抗原鉴定方法 ,具有推广使用价值。

鼠抗伤寒杆菌鞭毛抗原血清的制备

将伤寒Ty2菌株接种伊红-美兰培养基,制备并纯化伤寒杆菌鞭毛抗原,以此抗原免疫清洁级小鼠,制备鼠抗伤寒杆菌鞭毛抗原血清.结果显示,所制得血清试管凝集效价高于1∶1 280,间接ELISA测得其效价高于1∶25 600.本研究中制备的抗伤寒杆菌免疫血清效价高,特异性好,可在伤寒的诊断中发挥重要作用.

沙门氏菌H鞭毛抗原纯培养和位相变异方法改进及效果的分析

目的探讨一种新的纯培养和一种新位相变异方法对沙门氏菌H鞭毛抗原表达的改进效果。方法(一)30株沙门氏菌同时用下述两种方法纯培养后,进行H鞭毛抗原血清学鉴定再比较:⑴依据GB4789.4-2016中方法,采用营养琼脂平板直接培养后,检测H鞭毛抗原;⑵采用改进的沙门氏菌H鞭毛抗原纯培养法(即PCA琼脂平板表面加布氏肉汤1.5ml挑菌涂抹直接培养),36℃24h后检测H鞭毛抗原。(二)22株沙门氏菌同时用下述两种方法做H鞭毛抗原位相变异培养后,进行H鞭毛抗原血清学鉴定再比较:⑴参考GB4789.4-2016中的“简易平板法”添加诱导血清,进行位相变异培养,检测H鞭毛抗原;⑵采用改进的沙门氏菌位相变异方法(即接种沙门氏菌在含有布氏肉汤1小滴和沙门氏菌诊断血清1小滴的液体中)诱导培养36℃24h,再检测H鞭毛抗原。结果(一)两种纯培养方法中,改进的沙门氏菌鞭毛抗原纯培养方法两相H鞭毛抗原都检出的比率高于常规的纯培养方法,经χ^(2)检验显示,P<0.01,差异有统计学意义;(二)两种位相变异方法中,改进的沙门氏菌H鞭毛抗原位相变异试验方法检出的阳性率高于传统的“简易平板”位相变异H鞭毛诱导方法,χ^(2)检验显示,P<0.01,差异有统计学意义。结论改进的沙门氏菌纯培养和位相变异方法鉴定沙门氏菌H鞭毛抗原检出率高、诱导所用时间短、诱导细菌繁殖快,且简单便捷、廉价高效,不受贵重仪器设备的限制。新方法可为基层实验室开展沙门氏菌的血清分型工作提供省时、简单、高效的新途径。

伤寒杆菌鞭毛抗原酶联免疫分析的建立及初步应用

作者利用纯化的伤寒杆菌鞭毛抗原，制备出抗伤寒杆菌鞭毛抗原单克隆抗体。实验发现，四株单抗与伤寒杆菌鞭毛抗原和伤寒杆菌发生免疫反应，与甲、乙、丙副伤寒杆菌、大肠杆菌及部分沙门氏菌无交叉反应。选用其中２株单抗分别作为包被抗体和标记抗体，建立了检测伤寒杆菌鞭毛抗原的夹心ＥＬＩＳＡ。３０名正常人和４２例非伤寒发热待查患者血清标本经检测为阴性，１２例伤寒患者血清标本为阳性。本方法可直接用血清进行检测，具有早期应用、快速、简便和特异性强等特点。

搭桥法诱导肠炎沙门氏菌鞭毛抗原及鉴定

目的：了解搭桥法对诱导肠炎沙门氏菌鞭毛的临床意义。方法：从2013年4-6月两次食物中毒事件中分离获得7株具有典型生化反应、O-抗原为D群但缺失鞭毛抗原的沙门氏菌。采用搭桥法对7株菌株进行诱导培养,使其鞭毛抗原成功恢复。结果：综合该菌的生物学特性、生化反应及血清学试验得到准确的种属及血清型鉴定。结论：该菌鞭毛抗原的成功诱导为肠炎沙门氏菌的血清型鉴定提供了参考,为基层实验室开展沙门氏菌的血清学检验鉴定提供省时、简单、高效的方法,具有积极意义。

我国首次分离出一株具有三相鞭毛抗原的沙门氏菌

具有三相鞭毛抗原的沙门氏菌,国内外尚未见报道,近来我们分离出一株,现报告如下。材料和方法一、菌株来源:南京动植物检疫所送检菌株(该所从蝮蛇肠道内分离所得)。

二株鞭毛抗原减弱的鸭沙门氏菌鉴定

所谓H-O变异是指有鞭毛的菌株变成无鞭毛的菌株,鞭毛抗原随之消失;而鞭毛抗原减弱是指鞭毛依然存在,但其抗原性减弱,不能和相应诊断血清发生凝集,如果同时不被O-I噬菌体裂解,往往被认为菌体抗原的凝集是交叉反应而被漏检。

出口蝮蛇中三相鞭毛抗原沙门氏菌的分离鉴定

1987年10月,我们从出口的蝮蛇中检出一株具有三相鞭毛抗原的波茨坦(S.Potsdan)沙门氏菌变种,这在国内外尚未见过报道,现将分离鉴定情况报告如下: 一、分离培养 活剖蝮蛇样品,无菌采取肠道,直接投入亚硒酸盐煌绿增菌液内增菌后,划线接种SS琼脂平板,37℃培养24小时,挑取园整。

单克隆抗体夹心酶标法检测鞭毛抗原快速诊断伤寒

目的建立一种早期、快速诊断伤寒的检验方法。方法用酸断裂法提取伤寒沙门菌鞭毛抗原免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠，用淋巴细胞杂交瘤技术制备得１Ｄ５、２Ｈ４、３Ａ６三株鞭毛抗原的单克隆抗体，以２Ｈ４、３Ａ６两株单抗标记辣根过氧化物酶，建立双抗体夹心酶联免疫吸附测定，用于定量检测血清中的可溶性伤寒沙门菌鞭毛抗原。结果检测灵敏度可达０．０７８ｎｇ／ｍｌ，批内及批间变异系数为４．９％和６．９％。检测血培养阳性的伤寒患者血清３４份，３２例阳性，符合率９４％。结论该方法可作为早期。

肠出血性大肠杆菌O26∶H11鞭毛抗原的诱导及鉴定研究

目的对肠出血性大肠杆菌(EHEC)O26∶H11鞭毛抗原诱导及鉴定进行研究,为日常检测提供可借鉴的方法。方法对疑似EHEC O26∶H11菌株进行生化鉴定和血清分型,比较37℃及28℃2种温度Swarm琼脂诱导鞭毛抗原的效果,并采用荧光定量PCR检测8种致泻性大肠杆菌毒力基因eae、stx1、stx2、lt、st、bfp A、aggR和ipa H。结果 28℃诱导鞭毛抗原H11血清凝集为阳性,37℃诱导鞭毛抗原血清凝集为阴性;毒力基因检测结果显示stx1和eae基因阳性,其余均为阴性;菌株鉴定为EHEC O26∶H11。结论 28℃Swarm琼脂可诱导鞭毛H11,肠出血性大肠杆菌O26∶H11鉴定时应检测相关毒力基因。

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在致泻性大肠埃希菌鞭毛抗原分型中的应用

目的利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)快速对致泻性大肠埃希菌鞭毛抗原进行分型。方法收集河南省食品安全风险监测网中分离出的致泻性大肠埃希菌84株,使用MALDI-TOF-MS对其鞭毛抗原进行分型,并与血清学分型结果相比较。结果 84株致泻性大肠埃希菌中76株(90.48%)与血清学分型结果一致,8株分型结果不一致,主要集中在H1和H19、H21和H11。结论 MALDI-TOF-MS分型方法与血清学分型方法相比,在诊断敏感性、诊断特异性、分析敏感性、分析特异性、结果判断、完成检测所需时间、检测粗糙型菌株的能力、稳定性和重现性、吞吐量、检测条件等10个方面均具有较大的优势,更加简便、快捷和准确。MALDI-TOF-MS可以作为一个快速、准确和价廉的工具,应用于致泻性大肠埃希菌鞭毛抗原的分型。

沙门菌鞭毛抗原的变异及检测方法的初探

目的了解沙门菌鞭毛抗原的变异及解决办法。方法从我们1988-2006年共收集的35株沙门菌中选出发生H-O变异的菌株4株进行试验。结果4株菌株用常规方法无法将沙门菌分到型,而用改进的试验方法可以鉴定到型,35株沙门菌检出4株H-O变异株,本次H-O变异率为11.4%。结论研究检测沙门菌H-O抗原的变异对追踪传染源、分析流行趋势有帮助。

固相反向间接血凝法检测伤寒患者血清H抗原的初步应用

本文首次采用围相反向间接血凝技术,检测87例伤寒患者血消H抗原,阳性率为91.95%,几何平均滴度为1:45.7。患病第一周,H抗原的检出率(100%)与滴度(GMT:1:102.3)最高,随病程延长,抗原滴度下降,阳性率相应减少。30例对照组中,无一例阳性。该法试剂制备简单、敏感、特异、快速,90分钟可得结果。