CrPP2C蛋白影响衣藻细胞鞭毛过渡区结构

目的:在莱茵衣藻细胞中构建并筛选鞭毛组装缺陷突变体,克隆缺陷基因,探索其对鞭毛组装的影响。方法:使用带有巴龙霉素(Paromomycin)抗性的基因片段随机插入衣藻细胞基因组中,通过性状筛选和基因序列分析获得与Cr PP2C(Chlamydomonas reinhardtii type 2C protein phosphatase)基因相关的鞭毛异常突变体,根据突变体基本生物学性状和生化分析对Cr PP2C基因的功能进行分析。结果:采用电转法成功获得衣藻细胞鞭毛缺陷相关突变体,部分细胞具有短鞭毛,部分细胞则不具有鞭毛;通过RESDA-PCR(restriction enzyme site-directed amplification PCR)对突变体基因序列分析,鞭毛缺陷性状由Cr PP2C基因遭到破坏导致;把含有完整Cr PP2C基因的重组质粒通过电转法导入突变体后,其鞭毛几乎恢复为野生型长度,并可检测到PP2C-HA融合蛋白的表达;观察鞭毛再生,突变体鞭毛只能再生为原有长度;使用药物处理使鞭毛缩短,突变体鞭毛能正常解聚;电镜检测突变体的鞭毛显微结构,发现过渡区的Y形结构缺陷。结论:Cr PP2C基因的破坏导致鞭毛过渡区结构缺失,影响鞭毛组装过程,不组装鞭毛或组装短鞭毛。

等鞭金藻属(等鞭金藻目)1新种——湛江等鞭金藻(Isochrysis zhanjiangensis sp .nov)及其超微结构的观察

描述了从广东湛江南三岛沿岸采集、分离的等鞭金藻1新种——湛江等鞭金藻，应用电镜技术观察了湛江等鞭金藻运动细胞的超微结构．电镜观察证明，其运动细胞表面覆盖2～4层鳞片，鳞片有两种类型，一种较大，椭圆形；另一种较小，圆形．细胞顶端具有2条等长的平滑的鞭毛，两鞭毛间具有一条退化的定鞭（haptonema），很短，仅有1～2条微管．湛江等鞭金藻鞭毛过渡区中央轴丝与周边微管之间有5～6条螺旋条纹．两个金褐色色素体位于细胞两侧．3条类囊体为一组，无带片层．每个质体内侧具1个单层膜包裹的裸露的蛋白核．蛋白核内常具1对横列的类囊体．高尔基器位于鞭毛基体基部．线粒体长管状，具多个不分枝或分枝的脊．细胞中下部具1个至多个金藻昆布糖（Chrysolaminaran）颗粒．细胞核位于两质体之间、细胞基部．