Fibulin-5在盆腔器官脱垂患者主韧带组织中的表达及意义

目的:研究Fibulin-5在盆腔器官脱垂患者主韧带组织中的表达,分析其与盆腔器官脱垂程度之间的相关性。方法:选取我院妇科行子宫全切术的患者100例作为研究对象,根据手术病因不同分为观察组和对照组,其中观察组患者病因为盆腔器官脱垂,对照组病因为无盆底功能障碍性疾病的妇科疾病,收集所选患者的主韧带组织,采用实时定量PCR以及酶联免疫吸附法测定Fibulin-5的表达,比较两组患者Fibulin-5的表达情况并分析。结果:经过统计学分析,显示观察组患者的主韧带组织中Fibulin-5mRNA的表达明显低于对照组,血清Fibulin-5水平亦明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:患者主韧带组织中Fibulin-5表达的降低,可导致弹性蛋白合成障碍,无法形成稳定的弹性纤维或弹性纤维合成减少,盆底支持组织中细胞外基质弹性能力下降,与盆腔脏器脱垂发病有关。

强直性脊柱炎髋关节韧带组织培养模型的建立及腺病毒转染的实验研究

背景:强直性脊柱炎(AS)是一种与炎症紧密相关但病因尚未完全阐明的慢性进行性结缔组织疾病。目的:本研究拟通过构建和比较AS韧带组织体外原位(in situ)、2D细胞贴壁体外(in vitro)及3D水凝胶体外培养模型,旨在探索更适合模拟AS韧带体外的培养模型。方法:AS髋关节韧带组织取自我科4例重度AS拟行髋关节置换的患者,平均年龄(44.0±4.1)岁。髋关节组织块常规消化获得单细胞,并行倒置相差显微镜观察和抗vimentin免疫荧光染色(IFC)鉴定检查。对上述髋关节韧带组织与成纤维细胞分别行组织块原位、体外2D贴壁和3D海藻酸盐水凝胶法培养,重组腺病毒(rAd)5-lacZ转染上述标本14 d后,分别采用大体观察、HE染色、Hoechst 33258实验、X-gal染色、抗β-gal免疫组织化学染色和酶联免疫吸附实验(ELISA)等对细胞形态与增殖能力、病毒转染效率和致炎性细胞因子表达等进行检测。结果:第2代AS髋关节韧带细胞抗vimentin IFC检测均出现明显的红色荧光,结果阳性,表明分离培养的细胞为成纤维细胞。rAd5-lacZ转染上述3种模型14 d后,倒置相差显微镜下观察HE染色后的细胞形态并计数单位面积下的细胞数、Hoechst 33258检测细胞DNA含量和ELISA法检测细胞分泌功能提示,3种模型中以2D平面的细胞增殖效率和致炎性细胞因子分泌能力最强(F=12.21、14.91、282.67、350.18,P<0.05或0.01)、但细胞"去分化"现象亦最明显,而AS韧带组织原位培养和成纤维细胞3D海藻酸盐水凝胶培养条件下的细胞增殖效率和致炎性细胞因子表达能力相似(t=1.37、0.71、1.44、1.83,P>0.05),细胞形态前后无明显变化。抗β-gal免疫组织化学染色并计数阳性细胞数/光镜下的总细胞数得出rAd-lacZ转染3种模型效率相似,分别为65.84%、72.26%和75.39%(F=0.873,P>0.05)。结论:韧带组织原位培养和成纤维细胞3D水凝胶培养能更好地模拟AS韧带成纤维细胞体内生存环境,且rAd5-lacZ能在一定时间内有效转染以上模型。本实验结果为建立有效的AS韧带体外培养及基因修饰模型提供实验基础。

膝关节韧带组织工程的研究进展

目的:对目前膝关节组织工程韧带在体内外的研究进展,应用及价值进行综述。方法:查阅国内外近年来关于组织工程韧带构建治疗膝关节韧带损伤的相关应用文献,对包括种子细胞、生长因子和支架材料三大要素对构建膝关节组织工程化韧带的研究进展进行总结。结果:种子细胞、支架材料的筛选和适当的生长因子是构建膝关节组织工程韧带的核心和必要条件。种子细胞培养条件的优化和生长因子的浓度选择及配比是构建良好组织工程韧带的关键,而实现膝关节组织工程韧带在体内存活和更好发挥生物学效用,仍需进一步研究。随着生物医学及材料科学的发展,膝关节组织工程韧带的构建方法及方式在不断改进。

本刊组织构建栏目已出版“韧带组织工程”研究的相关文章

血管内皮细胞生长因子对兔异体重建后交叉韧带血管再生的影响孙英华,王莉,焦兆德2008,12(42):8225-8229[关键词]血管内皮细胞生长因子;重建;后交叉韧带;血管再生关节镜下同种异体韧带移植重建前交叉韧带513例郑小飞,黄华扬,张余,等.2009,13(24):4767-4770[关键词]同种异体组织移植;前交叉韧带;

韧带组织工程中物理环境影响干细胞分化的研究进展

韧带组织工程是目前治疗韧带损伤的一种新型的方法,其可以替代自体移植物的不足。韧带组织工程包括4个基本要素:种子细胞、纳米支架、生长因子、机械刺激。目前韧带组织工程存在的主要问题是如何更可控的使种子细胞向韧带细胞分化。研究发现天然生物韧带的每一个物理特性及机械刺刺激(单轴拉伸)在干细胞向韧带细胞分化中起十分重要的作用,所以纳米纤维支架的设计必须要考虑材料的弹性模量、材料的结构(材料的排列方式、孔隙率及直径等),不同范围内的弹性模量及材料结构会引导细胞向不同谱系分化。考虑到韧带是人体主要的受力组织,所以机械刺激对干细胞分化也是必不可少的,尤其是单轴拉伸,其最符合韧带在体内的受力情况,大量研究发现拉伸的频率、幅度及时间也会引导细胞向不同方向分化。RhoA/卷曲螺旋蛋白激酶对细胞骨架的重构和分化起调节作用,同时研究发现RhoA/卷曲螺旋蛋白激酶蛋白参与了纳米纤维排布及机单轴拉伸引导干细胞向韧带细胞分化的过程,具体是如何影响干细胞分化的,目前并不清楚,了解物理特性对干细胞分化的影响并且弄清RhoA/卷曲螺旋蛋白激酶蛋白的作用机制,将为进一步优化韧带组织工程提供了新的理论依据。

构建韧带组织工程脱细胞支架的可行性研究

背景:十二烷基磺酸钠脱细胞在脱细胞的同时对支架结构存在一定的损伤,降低了支架的生物学性能;胰酶等脱细胞方法较为温和,虽最大程度保留支架结构与生物学性能,但脱细胞效果并不彻底。目的:制备并分析脱细胞牛肌腱作为组织工程韧带支架的可行性。方法:取新鲜小牛跟腱,通过物理法去除肌腱表面腱膜、滑膜及软组织,制备50个跟腱,随机分为两组,均行冻干处理。实验组以Triton X-100行脱细胞处理,对照组不予脱细胞处理。两组均以PBS冲洗后室温干燥备用。行组织学、DNA含量、细胞增殖、生物力学(最大应力、弹性模量以及刚度)检测,比较两组的差异。结果:对照组和实验组的DNA残留量分别为(0.34±0.15)μg/mg和(0.7±0.03)μg/mg,实验组显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组与对照组支架DNA含量对比显示,支架脱细胞效果彻底,无显著的免疫原性。两组在组织形态结构上无明显差异。细胞增殖显示脱细胞支架对细胞增殖无明显影响。实验组的最大应力小于对照组,弹性模量无统计学差异,刚度试验显示两组无明显差异。结论:脱细胞支架在保留天然支架生物学性能的基础上可作为组织工程支架的选择。

新鲜骨髓吸出物直接种植于支架构建组织工程韧带

背景:有关于应用新鲜骨髓吸出物直接局部注射修复韧带部分损伤的报道,少有提及应用新鲜骨髓吸出物直接种植于支架构建组织工程韧带的研究报道。目的:评价将新鲜骨髓吸出物直接种植于支架构建组织工程韧带的可行性。方法:构建丝素纤维/小肠黏膜下层复合支架后,骨髓种植组将骨髓吸出物直接种植于复合支架上;细胞种植组将骨髓间充质干细胞种植于复合支架上;以未接种任何物质的复合支架作为空白对照,检测各组细胞黏附密度、细胞增殖活性及细胞外基质分泌情况。将骨髓种植组复合物植入兔前交叉韧带横断处,12周后取材评价骨髓种植组材料体内生物相容性。结果与结论:骨髓种植组孵育4 h后的细胞黏附密度、不同时间点细胞增殖率显著高于细胞种植组(P<0.05)。骨髓种植组及细胞种植组Ⅰ型、Ⅲ型胶原分泌量均显著高于空白对照组(P<0.05),但骨髓种植组及细胞种植组两组间Ⅰ型、Ⅲ型胶原分泌量差异无显著性意义。骨髓种植组材料植入兔体内未引起致死性免疫排斥反应及严重炎症反应,未见明显韧带再生及血管化。说明新鲜骨髓吸出物直接种植于支架可构建组织工程韧带,并且体内短期生物相容性良好。

内侧髌股韧带重建的研究进展

髌股关节不稳是一种常见的膝关节损伤,主要见于年轻患者,明显影响患者的日常生活和运动功能。内侧髌股韧带(MPFL)是髌骨内侧限制髌骨外向脱位的主要稳定结构,也是髌骨不稳发生时必然要损坏的结构。因此,通过MPFL重建恢复髌骨的稳定性为必要措施。虽然MPFL重建在临床上应用较为广泛,但部分手术细节,如股骨隧道和髌骨隧道定位、移植物材料选择、移植物固定角度、移植物张力选择等方面是否影响疗效仍存在争议。近年来,生物力学研究和临床研究的不断深入为术式的优化提供了可靠的循证依据。本文笔者将对MPFL重建的研究新进展进行综述。

韧带组织工程仿生性支架的研究进展

韧带是致密的纤维结缔组织,通过骨间连接维持关节的稳定性。运动损伤或组织老化引起的韧带撕裂通常需要手术干预,目前使用自体、异体或人工韧带作为移植物进行重建是治疗该类疾病的金标准,但这些移植物都存在诸多弊端。随着材料学和制造技术的发展,以生物支架为基础的工程化韧带组织有望成为新的组织供体,通过模拟天然组织的结构、成分和生物力学性能来达到再生组织的目的。本综述根据近期韧带组织工程的体外和动物实验研究,评估了以仿生性为设计原则,使用不同材料、制造技术和生物因素制造的纤维结构支架、多相界面支架和生物组织衍生支架的各项性能以及在促进韧带修复和重建中的效果。最后,总结并展望未来韧带组织工程研究中生物支架的发展方向。

目前人工韧带与组织工程韧带的研究现状

交叉韧带损伤后,由于其愈合能力较差,因此长期以来,对重建交叉韧带使用材料的研究从未停止过。本文主要对细胞因子在组织工程学韧带中的应用、基因转染技术在组织工程韧带研究中的应用、组织工程韧带附丽的基础研究,骨和组织工程韧带之间的愈合关系作了较详细介绍。另外,对人工合成韧带、胶原支架韧带也作了概述。

中国组织工程韧带研究

韧带由束状致密结缔组织组成,能介导正常的关节运动及维持关节的稳定,韧带损伤后的瘢痕愈合或根本不愈合常导致明显的关节功能丧失,愈合能力较差,学者们对重建交叉韧带的研究从未停止,细胞因子生物材料在韧带修复重建过程中也发挥着重要作用,基因转染是组织工程韧带研究的新技术,这些都为组织工程韧带研究提供的基础依据,人工韧带、胶原支架韧带也为组织工程韧带研究提供更广的思路。

软组织韧带样型纤维瘤病的CT影像学特征与生物学特征

目的:探讨软组织韧带样型纤维瘤病的CT影像学特征与生物学特征。方法:回顾性分析42例软组织韧带样型纤维瘤病患者的CT影像学资料与临床资料,分析软组织韧带样型纤维瘤病的CT影像学特征与生物学特征。结果:病灶平扫密度主要呈低密度,病灶边界主要呈部分不清或完全不清,病灶形态主要呈分叶状或不规则状,病灶未见钙化,增强扫描均表现为不均匀强化,随着不同时相逐步强化,跨解剖间室生长、累及神经血管束、累及骨质均较为多见;病灶均无包膜,病灶主要由梭形细胞和胶原纤维束构成,病灶有侵袭性生长倾向,病灶内无囊性变、坏死区;原发性与复发性软组织韧带样型纤维瘤病的边缘、形态、累及神经血管束、累及骨质、病灶平扫密度的构成比比较,差异均无统计学意义(P>0.05);原发性软组织韧带样型纤维瘤病的跨解剖间室生长的构成比显著低于复发性软组织韧带样型纤维瘤病,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:软组织韧带样型纤维瘤病具有一定的生物学特征,能反映在CT像学表现上。

组织工程韧带相关研究进展

前交叉韧带（anterior cruciate ligament,ACL）连接股骨与胫骨,主要作用是限制胫骨向前过度移位,维持膝关节的稳定性。ACL极容易部分撕裂或完全断裂而导致疼痛、不适、膝关节不稳和关节松弛,最终引起创伤性骨关节炎[1]。文献研究表明,ACL损伤发生率为35/100000人,其中女性运动员的发生率是男性运动员的2~8倍[2-4]。

组织工程韧带/肌腱支架材料的研究进展

理想的组织工程韧带和肌腱的支架材料需具备耐受持续的高强度张力、耐磨损性好、无免疫原性、良好的生物相容性及降解性。目前应用于组织工程韧带及肌腱的支架材料主要可分为两大类,天然高分子材料与合成高分子材料。选择合适的支架材料非常关键,它必须具有一定的机械强度及合适的降解速度,才能在完成支架的使命后为正常组织的生长留出空间。本文对这两种材料制备的韧带和肌腱的研究进展作如下综述。

软组织韧带样纤维瘤的MRI表现

目的:探讨软组织韧带样纤维瘤的临床及MRI特点,旨在提高对本病的认识及诊断水平。方法:回顾性分析经病理证实的3例原发和4例复发软组织韧带样纤维瘤的临床和MRI资料。结果:发病年龄5～35岁,中位年龄13.3岁。发病部位:臀部4例,下肢1例,颈部1例,胸壁1例。MRI表现:T1WI与肌肉相比,呈均匀等信号4例,不均匀混杂等低信号3例;T2WI 7例均以高信号为主,其内可见斑点状低信号区域;增强扫描后病灶明显不均匀强化。结论:软组织韧带样纤维瘤的MRI表现具有一定的特征性,MRI检查能为肿瘤的定性及定位提供重要价值。

CRTER杂志“软组织工程”栏目关于“组织工程韧带”研究的组稿内容

不同来源的组织工程韧带种子细胞研究 人工韧带与组织工程韧带的研究 组织工程韧带应用于前交叉韧带重建的研究

不同浓度富血小板血浆与前交叉韧带重建后的隧道扩大

背景:富血小板血浆内含有的生长因子能够促进骨-腱愈合,从而减少了前交叉韧带重建后骨隧道扩大的发生;不同浓度的富血小板血浆对骨隧道的扩大有一定的影响,但是目前尚不清楚何种浓度更佳。目的:观察富血小板血浆对前交叉韧带重建后隧道扩大的影响。方法:将20只新西兰大白兔,参照Martinek等的方法进行兔的双侧前交叉韧带重建。在一侧肢体的肌腱移植物给予10 mg富血小板血浆凝胶预处理作为观察组,对侧肢体移植物给予5 mg富血小板血浆凝胶预处理为对照组。处理后12周进行影像学观察以及测量骨隧道的宽度,计算隧道扩大率。结果与结论:在前交叉韧带重建后的8周、12周的时间点上,10 mg富血小板血浆组隧道扩大的宽度小于5 mg富血小板血浆组(P<0.05);10 mg富血小板血浆组的腱-骨结合部位的骨密度值大于5 mg富血小板血浆组(P<0.05)。提示富血小板血浆能够促进兔前交叉韧带重建后腱-骨界面骨密度的提高,有效预防骨隧道的扩大,且以富血小板血浆浓度10 mg为佳。

隐匿型Lisfranc损伤的诊断与微创手术治疗研究进展

Lisfranc损伤是指发生在跖跗关节(Lisfranc关节)的损伤,包括涉及跖跗关节的骨性或韧带组织损伤。隐匿型Lisfranc损伤(subtle Lisfranc injury,SLI)是Lisfranc损伤的重要类型,指由运动造成跖跗关节的低能量损伤,多以纯韧带损伤为主,并出现骨结构在静态下的不稳定。SLI多见于间接受力的低能量损伤,也可为直接受力的高能量损伤。