米诺环素对人牙周韧带细胞矿化能力的影响

目的探讨米诺环素对人牙周韧带细胞(periodontal Iigament cells,PDLCs)碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及矿化结节形成能力的影响。方法将不同浓度的米诺环素(0,1,5,20,100,200mg/L)加入体外培养的第4代HPDLcs中,孵育4天后,检测其对细胞ALP活性的影响;将第4代的PDLCs在体外进行长期培养,实验组加入矿化液和米诺环素(20mg/L或100mg/L),对照组只加矿化液。28天后用茜素红与VonKossa染色检测矿化结节的形成。结果20mg/L和100mg/L的米诺环素能显提高PDLCsS的ALP活性,其中20mg/L具有最大的促进效应,对体外矿化结节的形成,亦有一定程度的促进作用。结论米诺环素有促进牙周韧带细胞向成骨细胞方向转化的趋势,从而有助于牙周新附着的形成。

黄芩苷对人牙周韧带细胞超微结构的影响

目的 :观察黄芩苷对人牙周韧带细胞超微结构的影响。方法 :10ng/mL的黄芩苷孵育人牙周韧带细胞 5d ,采用透射电镜观察人牙周韧带细胞超微结构的变化。结果 :与对照组比较 ,用药组细胞的内质网、线粒体等明显增多。结论 :黄芩苷能促进细胞的代谢和蛋白质的合成 。

人牙周韧带细胞-聚羟基乙酸支架复合体修复牙周组织缺损

背景:近年来,组织工程技术作为新型组织再生模式,为牙周缺损修复提供了新的思路和方法。目的:观察人牙周韧带细胞-聚羟基乙酸支架复合体修复牙周组织缺损的效果。方法:采用多次沉淀法将第4代人牙周韧带细胞以1.5×109 L-1的浓度接种于聚羟基乙酸支架上,制备细胞-支架复合体。取10只杂种犬,建立牙周组织缺损模型后随机分组,实验组牙周组织缺损处植入细胞-支架复合体,对照组牙周组织缺损处直接直接龈瓣冠向复位缝合。术后4周内,检测两组牙周组织缺损处胶原组织、新生毛细血管、新生牙骨质、新生牙槽骨与新生牙周膜组织;术后8周,进行牙周组织缺损处苏木精-伊红染色。结果与结论:实验组术后1,2,3,4周的胶原含量、新生毛细血管数量、新生牙骨质、新生牙槽骨、新生牙周膜组织均显著多于对照组(P<0.05)。术后8周,实验组新生牙槽骨的结缔组织面存在较多血管排列,牙槽骨与牙周膜的链接呈锯齿状,可看见薄层牙骨质沉积;对照组仅见新生牙槽骨和牙骨质形成,部分位于切迹以下。结果表明,人牙周韧带细胞-聚羟基乙酸支架复合体可促进牙周组织再生。

人牙周韧带细胞在聚羟基乙酸支架上体外三维培养的实验研究

目的 :应用聚羟基乙酸 (polyglycolicacid ,PGA)作为人牙周韧带细胞 (periodontalligamentcell,PDLC)的三维体外培养支架 ,观察细胞的形态学特征和生物学性状。方法 :将人牙周韧带细胞与PGA三维支架进行体外复合培养 ,用倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞形态结构及其与支架的粘附性和组织相容性 ,并用Ⅰ型胶原抗体检测细胞的Ⅰ型胶原分泌情况。结果 :光镜和扫描电镜显示 ,人PDLC在PGA三维支架上粘附良好 ,分泌基质旺盛。免疫组化染色显示细胞支架复合物中Ⅰ型胶原表达阳性。结论 :人PDLC在PGA三维支架上能够维持其形态学特征及生物学性状。聚羟基乙酸具有良好的粘附性和生物相容性 。

人牙周韧带细胞成骨诱导分化后的超微结构观察

目的观察成骨诱导分化培养前后,人牙周韧带细胞超微结构的变化。方法对人牙周韧带细胞进行体外培养,并进行成骨诱导分化,14d后行透射电子显微镜观察。结果体外成骨诱导分化培养后,人牙周韧带细胞内细胞器发达,数目较常规培养条件下明显增多。细胞内可见大量的基质小泡、髓样结构及中、低电子密度的圆形和椭圆形小泡样结构。结论人牙周韧带细胞是一种具有成骨潜能的细胞,经成骨诱导分化培养后,其超微结构具有成骨细胞和成牙骨质细胞的特点。

组织块培养法和酶消化法分离髌韧带细胞的比较

背景:调动和激活韧带与肌腱细胞群是有效修复损伤韧带与肌腱的关键,通过对韧带与肌腱细胞可能存在的不同群进行分离,对韧带与肌腱组织正常结构的维护及损伤修复具有重要意义。目的:比较经组织块培养法和酶消化法分离出来的髌韧带细胞的形态、增殖,细胞复制性衰老与表面标记物表达。方法:分别用组织块培养法和酶消化法对成年SD大鼠的髌韧带细胞进行分离培养,比较该两种方法得到的髌韧带细胞的形态,生长曲线,表面标记物的表达,细胞复制性衰老等情况。结果与结论:经两种分离方法分离所得的髌韧带细胞的形态、增殖能力、表面标记物及复制性衰老均存在差异。提示髌韧带细胞可能存在不同群,且不同群的髌韧带细胞可能在髌韧带正常功能与修复中发挥不同的作用。

体外培养人黄韧带细胞系的建立及细胞学特性分析

目的为研究黄韧带骨化致椎管狭窄的机制打下基础。方法通过体外组织块培养的方法,建立起正常、退化和骨化黄韧带的细胞系共18株,对细胞的生长特点进行了初步分析。结果培养的黄韧带细胞可以在体外增殖和传代,细胞呈现多种形态,以梭形为主,特别是退变和骨化患者的韧带细胞可形成钙化结节。结论首次成功的培养出黄韧带细胞,为深入研究黄韧带骨化的相关机制提供一种有力的手段。

牙周韧带细胞体外矿化的研究——骨唾蛋白与骨桥素在矿化过程中的表达

目的 :研究骨唾蛋白与骨桥素在体外培养的人牙周韧带细胞矿化过程中的表达。方法 :体外培养的人牙周韧带细胞 ,经地塞米松矿化液诱导 ,分别于不同的时间在相差显微镜下观察其矿化结节的形成 ,采用免疫细胞化学的方法观察骨唾蛋白与骨桥素的表达情况。结果 :矿化培养 1周细胞呈复层生长 ,骨桥素呈阳性染色 ;两周细胞密集呈结节状 ,骨唾蛋白与骨桥素均为阳性 ,胞浆染成黄褐色 ;3周出现矿化结节 ,矿化以后骨唾蛋白与骨桥素保持稳定表达。结论 :牙周韧带细胞在适当的条件下可以向成骨细胞表型分化 ,表达矿化相关蛋白 ,形成矿化结节。

牵张应力对人黄韧带细胞成骨分化的影响

目的探讨牵张应力在胸椎黄韧带骨化症中的作用。方法牵张应力作用于胸椎黄韧带细胞后,通过PNPP法、Real-timePCR等实验方法,观察牵张应力对黄韧带细胞成骨分化的影响。结果牵张应力可以促进黄韧带细胞碱性磷酸酶活性增强,骨钙素的表达增高。结论牵张应力可促进胸椎黄韧带骨化症黄韧带细胞向成骨方向分化。

体外培养的人牙髓细胞、牙周韧带细胞几种基质表达和碱性磷酸酶分泌的研究

目的：研究并比较培养的５～７代人牙髓细胞和牙周韧带细胞几种基质表达和碱性磷酸酶分泌的情况。方法：细胞培养、免疫组化、碱性磷酸酶活性分析。结果：两种细胞均在培养的第９天进入生长静止期，两种细胞培养液中碱性磷酸酶活性在增殖期达到高峰，以后活性下降。两种细胞均表达ＦＮ、Ⅲ型胶原、ＢＭＰ。当培养的细胞密度较高时，ＦＮ和Ⅲ型胶原以纤维状结构覆盖于细胞表面。结论：传代的人牙髓细胞和牙周韧带细胞的上述几种基质表达方式、碱性磷酸酶活性相似。

人黄韧带细胞体外原代培养方法的比较

目的比较不同的人黄韧带细胞(LFCs)原代培养方法,优化培养条件,提高培养成功率。方法采集成年腰椎间盘突出症患者后路椎间盘摘除术中的黄韧带,分别采用组织块法、酶消化法、胶原酶消化加组织块法体外原代培养LFCs,传代培养;倒置相差显微镜下观察细胞从组织块内迁出时间、细胞形态和生长状态;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定其吸光度(OD)值,评价细胞增殖状况,绘制细胞生长曲线;用免疫荧光染色法检测传3代细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原的表达。结果胶原酶消化加组织块法中组织块解离、贴附和细胞游出状况均优于单纯组织块法或单纯酶消化法,成功率较高。原代培养细胞的波形蛋白和Ⅰ型胶原免疫荧光染色呈阳性。结论胶原酶消化加组织块法可提高LFCs原代培养的成功率。

骨桥蛋白及其受体在黄韧带骨化症黄韧带细胞中的表达及其意义

背景:黄韧带骨化症的机制尚不明确,骨桥蛋白可能是其骨化过程中重要的影响因素。目的:观察骨桥蛋白及其受体CD44、整合素β3在人黄韧带细胞及人骨化黄韧带细胞中的表达及其意义。方法:胸/腰椎后路减压术中取人骨化节段黄韧带组织和非黄韧带骨化黄韧带组织各8例,均来自成人,两组组织进行体外细胞分离、培养及鉴定,分别行骨桥蛋白、CD44、整合素β3免疫组织化学染色,用倒置相差显微镜观察结果,提取总RNA行半定量PCR检测。结果与结论:免疫细胞化学染色结果显示,黄韧带组织组中骨化节段黄韧带细胞骨桥蛋白、CD44、整合素β3表达强度均大于非黄韧带骨化组(P<0.01)。PCR检测结果显示,黄韧带组织组中骨化节段黄韧带细胞骨桥蛋白、CD44、整合素β3 m RNA表达强度明显强于非黄韧带骨化组(P<0.05)。结果表明,黄韧带骨化时黄韧带细胞中骨桥蛋白及其受体CD44、整合素β3基因表达均升高。

辛伐他汀对牙周韧带细胞增殖和分化能力影响的实验研究

目的:探讨辛伐他汀对牙周韧带(PDL)细胞增殖和分化能力的影响,为辛伐他汀用于牙周组织再生提供理论依据。方法:组织块法培养人牙周韧带细胞,采用MTT法和二辛可宁酸法分别检测不同浓度辛伐他汀对牙周韧带细胞增殖能力和分化功能的影响。结果:高浓度辛伐他汀对PDL细胞增殖活性有轻微抑制作用,低浓度的辛伐他汀对PDL细胞增殖能力的影响不明显,无统计学意义(P>0.05)。但辛伐他汀可以明显促进PDL细胞中碱性磷酸酶的活性,尤其以10-7mol/L浓度的辛伐他汀对ALP活性的促进作用最明显,结果具有统计学意义(P>0.05)。以10-7mol/L浓度为中心,随着辛伐他汀浓度增加或减少,其促进碱性磷酸酶(ALP)活性的作用逐渐减弱。结论:辛伐他汀可以促进PDL细胞的骨向分化,可能对牙周组织缺损的再生具有重要意义。

本体感觉训练促进膝关节损伤后韧带细胞增殖研究

膝关节损伤通常是体育运动中的接触性或非接触性损伤。膝关节损伤后,如果韧带愈合不良会导致关节不稳和继发性骨关节炎,而本体感觉能够直接影响韧带细胞增殖。为研究本体感觉训练对膝关节损伤后韧带细胞增殖的影响,将某医院骨科治疗的80例膝关节损伤患者作为研究对象,随机将受试者划分成对照组和本体感觉训练组,对照组患者进行常规康复训练,本体感觉训练组患者进行本体感觉训练。实验发现,进行长期训练后,本体感觉训练组韧带细胞增殖明显高于对照组,韧带细胞TGFβ1和TGFβRI阳性表达率及表达强度评分结果与对照组相比明显升高。

贮存介质对牙周韧带细胞乳酸脱氢酶活性的影响

通过测量乳酸脱氢酶的活性，对两种细胞培养液对牙周韧带细胞活性的保存作用进行了实验研究．结果表明，随着时间的延长，介质中乳酸脱氢酶含量逐渐增加，生理盐水对照组在不同时间乳酸脱氢酶含量均明显高于１６４０培养液组和ＤＭＥＭ培养液组（ｐ＜０．０５）；１６４０培养液组与ＤＭＥＭ培养液组乳酸脱氢酶含量之间无显著性差异（ｐ＞０．０５），提示１６４０培养液和ＤＭＥＭ培养液能够保存牙周韧带细胞的活性，是贮存脱位牙齿的良好介质．

维甲酸诱导牙周韧带细胞分化的研究

目的研究并比较维甲酸对牙周韧带细胞和牙龈成纤维细胞向成骨样细胞分化潜能的影响。方法体外培养牙周韧带细胞与牙龈成纤维细胞,通过生化法、原位杂交及RT-PCR分别检测维甲酸作用前后碱性磷酸酶(ALP)活性的变化及其mRNA的表达情况。结果正常牙周韧带细胞与牙龈成纤维细胞的ALP活性有明显差别,前者高于后者;原位杂交及RT-PCR均检测到牙周韧带细胞有mRNA表达而牙龈成纤维细胞无表达。维甲酸作用后牙周韧带细胞ALP活性明显升高,mRNA表达信号相应增强,且在5×10-6 mol/L组效果最明显;牙龈成纤维细胞ALP活性亦有升高,在mRNA水平仅RT-PCR检测到5×10-6mol/L组有较弱的表达,其他组及原位杂交均未见表达。结论牙周韧带细胞和牙龈成纤维细胞在向成骨方向的分化潜能上存在差异。

钛表面粗糙度对牙周韧带细胞早期附着影响的荧光观察(英文)

背景:种植体表面粗糙程度对组织细胞的增殖、分化及基因表达有直接影响。目的:观察牙周韧带细胞在不同纯钛表面粗糙度的早期附状态,以及材料表面性能对组织细胞分化的影响。设计、时间及地点:随机对照观察,多样本比较实验,于2005-01/2006-07在赣南医学院科研中心完成。材料:采用机床切割机将商业纯钛棒制备成直径为10mm厚2mm的钛片,共24个,分为4组:机械处理组,硝酸处理组,喷砂处理组,综合处理组,每组6个样品。方法:采用TR240便携式表面粗糙度仪测定表面粗糙度。机械处理组:进行单纯的机械处理。硝酸处理组:单纯的机械处理+65%的硝酸(100℃,1h)处理。喷砂处理组:单纯的机械处理+100μm的Al2O3喷砂处理。综合处理组:单纯的机械处理+100μm的Al2O3喷砂处理后+65%的硝酸(100℃,1h)处理。主要观察指标:样品在DMEM中预置30m后接种第3代的细胞,分别于30,60,120,240min,1,3,7d取出钛片,于荧光显微镜下观察各组纯钛表面的粗糙度和牙周韧带细胞在不同表面粗糙度的纯钛表面早期附着情况。结果:①定量分析:4组粗糙度分别为:机械处理组(599.5±8.3)nm、硝酸处理组(406.5±4.6)nm、喷砂处理组(358.8±11.8)nm、综合处理组(8.7±2.0)nm,机械处理组高于硝酸处理组、喷砂处理组和综合处理组(P<0.01),差异有显著性意义(P<0.01)。②定性分析:牙周韧带细胞在纯钛表面早期附着的荧光观察显示,随着时间的推移,各组早期附着在纯钛表面的牙周韧带细胞增多,细胞增殖良好。但粗糙度大的钛表面,细胞附着较少,粗糙度小的钛表面,细胞附着较致密些。结论:钛表面粗糙度越小,牙周韧带细胞早期附着越多,有利于细胞黏附和增殖。

人牙周韧带细胞和牙髓细胞表型特征的比较

目的研究人牙周韧带细胞(PDLCs)和牙髓细胞(DPCs)表型特征以及体外传代对其表型特征的影响,为选择适宜的表面标记分选生物性状同源性的细胞亚群提供依据。方法采用酶消化法体外培养PDLCs和DPCs,免疫组化检测和流式细胞仪分析细胞表面标记的表达。结果PDLCs和DPCs的STRO-1和CD146免疫组化染色阳性。流式细胞仪分析显示:获得的第1代PDLCs和DPCs表达间充质干细胞表面标记STRO-1、CD146、CD29、CD44和CD106,基本不表达CD34。PDLCs的STRO-1、CD29和CD44阳性表达百分比与DPCs间的差异无统计学意义(P>0.05),PDLCs的CD106阳性表达百分比高于DPCs,CD146阳性表达百分比低于DPCs,且差异有统计学意义(P<0.001)。PDLCs和DPCs表达STRO-1和CD146的阳性表达百分比随传代而逐渐减低。结论PDLCs表面抗原表达与DPCs相似,而且其中成体干细胞的成分随传代逐渐减少。

纯钛表面牙周韧带细胞形成物的组织学和免疫组织化学研究

目的 :探讨牙周韧带细胞在商用纯钛表面的增殖与分化。方法 :牙周韧带细胞在纯钛表面进行培养 ,14天后刮取形成物 ,进行HE染色及Ⅰ型胶原免疫组织化学分析。结果 :牙周韧带细胞在纯钛表面生长良好 ,14天后形成单层 ,形成大量细胞基质 ,其成份主要为Ⅰ型胶原。结论 :牙周韧带细胞能够在纯钛表面生长、增殖 ,并形成大量细胞外基质 ,细胞外基质的主要成份为Ⅰ型胶原。

维A酸对体外培养的人牙周韧带细胞的生物学作用

目的:探讨维A酸对体外培养的人牙周韧带细胞的生物学作用。方法:体外培养人牙周韧带细胞。分别以不同浓度的维A酸作用于细胞,在倒置显微镜下观察不同浓度的维A酸对细胞形态与排列的影响;并通过MTT法、酶动力学方法及考马斯亮蓝法检测维A酸对细胞增殖活性、碱性磷酸酶活性及蛋白质合成的影响。结果:维A酸能增强牙周韧带细胞的碱性磷酸酶活性,10-6mol／L浓度的维A酸对细胞的作用效果最明显(P<0.01);而对细胞形态与排列、增殖能力及总蛋白合成无影响。结论:维A酸可促进牙周韧带细胞向成骨样细胞方向分化。