延边黄牛与韩延牛血液Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响

［目的］从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome（外胞体），研究2种外胞体对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响。［方法］通过超高速离心等方法，从延边黄牛和韩延牛血液中分离Exosome，并以100 ng/mL的浓度分别转染给原代培养的延边黄牛垂体细胞培养12、24和48 h，对细胞上清液中GH含量进行检测。［结果］ 电镜下延边黄牛与韩延牛血液Exosome均呈圆形或椭圆形的双层膜小囊泡，直径均为30~100 nm，膜结构完整。韩延牛Exosome处理组的延边黄牛垂体细胞GH mRNA表达显著高于延边黄牛Exosome处理组（P〉0.05）。韩延牛血液Exosome处理组垂体中GH的含量显著高于延边黄牛血液Exosome处理组（P〉0.05）。［结论］延边黄牛和韩延牛血液中的Exosome对延边黄牛垂体细胞中GH含量的影响有明显差异。

延边黄牛和韩延牛血液外胞体中miRNA的差异表达分析

为进一步探讨Exosome中miRNA对延边黄牛和韩延牛生长发育的分子调控差异。本研究从延边黄牛和韩延牛血液Exosome中分离出miRNA,通过RNASEQ测序和生物信息学技术分析了延边黄牛及韩延牛血液Exosome中miRNA的表达特点。结果表明,在延边黄牛和韩延牛血液Exosome中获得差异表达miRNA有524个,其中上调表达的271个,下调表达的253个,其中已知miRNA382个,新miRNA142个;差异表达miRNA的靶基因预测结果说明,在两个品种牛中共预测到52348个靶基因。GO富集分析可知,这些靶基因被富集到3473条生物学过程,394条细胞组分以及879条分子功能。KEGG分析可知,这些预测得到的miRNA的靶基因总共被注释到326条信号通路中,其中最显著富集的通路为mTOR信号传导通路。其中显著差异表达的miR-9-5p和miR-99b调控的一些靶基因都与mTOR信号通路有密切的关系。结论:血液Exosome中的miR-9-5p和miR-99b在延边黄牛和韩延牛生长发育差异的过程中可能发挥重要的作用。将为下一步在分子水平上探讨关键差异表miRNA影响边黄牛和韩延牛生长发育差异的分子机制提供试验基础。