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BMMYA'平板-Fast blue RR顶层琼脂法高效筛选高酶活脂肪酶
1
作者
王睿
喻晓蔚
+1 位作者
沙冲
徐岩
《工业微生物》
CAS
CSCD
2012年第1期23-27,共5页
摘建立了一种高效筛选高酶活或高产脂肪酶菌株的平板方法。该方法以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)脂肪酶基因proRCL在毕赤酵母中构建的基因突变文库为筛选对象,利用BMMYA'平板-FastblueRR顶层琼脂法对其中高酶活或高产...
摘建立了一种高效筛选高酶活或高产脂肪酶菌株的平板方法。该方法以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)脂肪酶基因proRCL在毕赤酵母中构建的基因突变文库为筛选对象,利用BMMYA'平板-FastblueRR顶层琼脂法对其中高酶活或高产的脂肪酶突变株进行筛选,将待筛菌株接种至含有2%甲醇的BMMYA'平板上,30℃生长并诱导4~5 d后,平板经脂肪酶致死温度65℃处理1 h,冰浴、室温平衡后,向平板中倾入Fast blue RR顶层琼脂。2 min内周围显示出明显的黑褐色的菌株为高酶活或高产突变株。该方法简便,快速,高效而且准确,筛选阳性率可达到90%。
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关键词
FAST
BLUE
RR
顶层琼脂法
BMMYA’平板
高温处理
脂肪酶平板筛选
下载PDF
职称材料
一种AHL降解菌株的高效筛选方法
被引量:
2
2
作者
史晓
宫倩红
+2 位作者
于文功
王为善
魏岚
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期728-732,共5页
酰化高丝氨酸内酯化合物(acyl-homoserine lactone,AHL)是革兰氏阴性细菌(G-)群体感应的信号分子。本文建立1种从环境微生物中高效地筛选AHL降解菌株的方法。首先利用AHL作为唯一能源对环境微生物进行初筛,再利用顶层琼脂法和报告菌株Ch...
酰化高丝氨酸内酯化合物(acyl-homoserine lactone,AHL)是革兰氏阴性细菌(G-)群体感应的信号分子。本文建立1种从环境微生物中高效地筛选AHL降解菌株的方法。首先利用AHL作为唯一能源对环境微生物进行初筛,再利用顶层琼脂法和报告菌株Chromobacterium violaceumATCC 12472、Agrobacterium tumefaciensA136等进行复筛,共筛选得到21株具有AHL降解活性的菌株。对其中活性最高的菌株A11进行初步的菌种鉴定,通过形态观察、16S ribosomal RNA(16S rDNA)基因分析最终确定为假单胞菌属细菌Pseudomonassp.A11。
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关键词
群体感应
AHL降解酶
唯一能源
法
顶层琼脂法
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职称材料
题名
BMMYA'平板-Fast blue RR顶层琼脂法高效筛选高酶活脂肪酶
1
作者
王睿
喻晓蔚
沙冲
徐岩
机构
江南大学工业生物技术教育部重点实验室
江南大学医药学院
出处
《工业微生物》
CAS
CSCD
2012年第1期23-27,共5页
基金
国家自然科学基金(No.20802027)
国家高科技研究发展项目(863计划)(No.2010AA101501
+3 种基金
No.2008AA10Z304)
十一五支撑计划(No.2008BAI63B07)
长江学者和创新团队发展计划(No.IRT0532)
中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP11014)
文摘
摘建立了一种高效筛选高酶活或高产脂肪酶菌株的平板方法。该方法以华根霉(Rhizopus chinensis CCTCCM201021)脂肪酶基因proRCL在毕赤酵母中构建的基因突变文库为筛选对象,利用BMMYA'平板-FastblueRR顶层琼脂法对其中高酶活或高产的脂肪酶突变株进行筛选,将待筛菌株接种至含有2%甲醇的BMMYA'平板上,30℃生长并诱导4~5 d后,平板经脂肪酶致死温度65℃处理1 h,冰浴、室温平衡后,向平板中倾入Fast blue RR顶层琼脂。2 min内周围显示出明显的黑褐色的菌株为高酶活或高产突变株。该方法简便,快速,高效而且准确,筛选阳性率可达到90%。
关键词
FAST
BLUE
RR
顶层琼脂法
BMMYA’平板
高温处理
脂肪酶平板筛选
Keywords
Fast blue RR top agar
BMMYA' plate
heat-treatment
plate screening of lipase
分类号
TQ925.6 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
一种AHL降解菌株的高效筛选方法
被引量:
2
2
作者
史晓
宫倩红
于文功
王为善
魏岚
机构
中国海洋大学医药学院海洋药物教育部重点实验室
出处
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期728-732,共5页
基金
国家高技术研究发展计划项目(2007AA09Z418)资助
文摘
酰化高丝氨酸内酯化合物(acyl-homoserine lactone,AHL)是革兰氏阴性细菌(G-)群体感应的信号分子。本文建立1种从环境微生物中高效地筛选AHL降解菌株的方法。首先利用AHL作为唯一能源对环境微生物进行初筛,再利用顶层琼脂法和报告菌株Chromobacterium violaceumATCC 12472、Agrobacterium tumefaciensA136等进行复筛,共筛选得到21株具有AHL降解活性的菌株。对其中活性最高的菌株A11进行初步的菌种鉴定,通过形态观察、16S ribosomal RNA(16S rDNA)基因分析最终确定为假单胞菌属细菌Pseudomonassp.A11。
关键词
群体感应
AHL降解酶
唯一能源
法
顶层琼脂法
Keywords
quorum sensing
AHL quenching enzyme
unique energy source of method
soft agar overlay protocol
分类号
R915 [医药卫生—微生物与生化药学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
BMMYA'平板-Fast blue RR顶层琼脂法高效筛选高酶活脂肪酶
王睿
喻晓蔚
沙冲
徐岩
《工业微生物》
CAS
CSCD
2012
0
下载PDF
职称材料
2
一种AHL降解菌株的高效筛选方法
史晓
宫倩红
于文功
王为善
魏岚
《中国海洋大学学报(自然科学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
下载PDF
职称材料
已选择
0
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参考文献
引证文献
统计分析
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