丙泊酚对缺氧大鼠海马脑片诱发电位的影响

目的采用离体海马脑片缺氧模型,观察丙泊酚对缺氧大鼠海马脑片诱发电位的影响。方法用细胞外记录方法,电极刺激海马CA3区谢弗侧支,在CAl锥体细胞层记录诱发电位。观察丙泊酚对缺氧海马脑片诱发电位———顺向群峰电位(OPS)和缺氧损伤电位(HIP)的影响。大鼠海马脑片随机分为4组,每组8个脑片。缺氧组:脑片用缺氧无糖的人工脑脊液(ACSFOGD)灌流14 min,实施缺氧过程;药物组分为P1、P5和P15组:在ACSFOGD灌流液中分别含1,5和15μmol.L-1的丙泊酚。结果缺氧组OPS消失时间为(186±26)s,在缺氧10 min左右,均出现HIP,持续时间为(113±16)s;恢复供氧后,OPS恢复率和恢复幅度分别为25%和(30±23)%。与缺氧组相比,P5及P15组OPS消失时间向后推迟,OPS恢复率和恢复幅度都有增加;并且HIP出现率下降,其出现时间明显延后、持续时间显著增加。而P1组各项指标与缺氧组相比,无明显差异。结论丙泊酚能改善缺氧海马脑片细胞外记录电生理指标,提示对脑缺氧损伤有保护作用。

海马脑片缺氧损伤电位的研究进展

现在对脑缺氧/缺血损伤的研究越来越多的采用海马脑片。在缺血/缺氧期间海马CAl区可记录到场电位的时相性变化。本文就这变化过程中出现的缺氧损伤电位的电生理特点、代表的意义、可能的机制以及它在实验中的运用作一综述。

七氟醚预处理对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用:线粒体K_(ATP)通道的作用

利用离体海马脑片缺氧无糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤模型,探讨七氟醚预处理对神经细胞的保护作用及陔作用与线粒体内膜ATP敏感钾通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channels,mitoK_(ATP)channels)的关系,随机将脑片用2%、4%、6%七氟醚,以及6%七氟醚复合mitoK_(ATP)通道阻滞剂5-羟基奎酸盐(5-hydroxydecanoic acid,5-HD)预处理30min,观察OGD损伤14min复氧1h期间顺向群峰电位(orthodromic population spike,OPS)的变化,并应用透射电镜观察细胞超微结构的改变。结果表明,与单纯OGD组相比,七氟醚预处理可使海马脑片OPS消失时间明显延长(P＜0．01),使OPS明显恢复,其中4%、6%七氟醚组的恢复率均为71．4%(P＜0．05 vs OGD),相应恢复程度为(61．0±42．3)%和(78．7±21．1)%(P＜0．01),而且6%七氟醚的保护作用可被5-HD取消。OGD组的海马CA1区锥体细胞明显水肿,核膜皱缩、破裂,染色质聚集,线粒体肿胀畸形,嵴断裂或消失,而4%和6%七氟醚组仅见海马CA1区锥体细胞轻度水肿,核膜皱缩不明显,染色质均匀,线粒体轻度肿胀。结果提示,七氟醚预处理对大鼠海马脑片OGD损伤有一定的保护作用,且七氟醚对神经细胞的保护作用与激活mitoK_(ATP)通道有关。

低温对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用及其与Glu受体的关系

目的:探讨低温对离体大鼠海马脑片缺氧无糖(oxygenandglucosedeprivation,OGD)损伤的保护作用及其机制。方法:①观察大鼠海马脑片在OGD条件下顺向群峰电位(orthodromicpopulationspike,OPS)的变化及温度对它的影响。②观察谷氨酸(Glu)对海马脑片OPS的影响及低温的抗Glu毒性作用。并在人工脑脊液(ACSF)中分别加入GABA R的特异性阻滞剂bicuculline(BMI)和NMDA R的特异性阻滞剂D()2Amino5phospho nopentanoicAcid(AP5)或加入BMI和非NMDA R阻滞剂6,7Dinitroquinoxaline2,3(1H,4H)dione(CNQX)来观察低温对海马脑片OGD损伤保护作用的突触后受体机制。③观察OGD1h后海马CA1区锥体细胞超微结构的变化及低温对其的影响。结果:①OGD可以使海马脑片OPS迅速降低并很快消失,14min后复氧供糖OPS极少恢复。低温(32℃、25℃)能使OPS消失时间明显延长,复氧供糖后OPS恢复良好。25℃其作用优于32℃。②2mmol/L Glu使海马脑片OPS迅速消失,洗出后难以恢复。低温(32℃、25℃)能显著改善去Glu1h后OPS的恢复。ACSF中加入BMI+CNQX和BMI+AP5均对25℃低温处理28min的脑保护作用没有影响。③OGD1h后CA1区锥体细胞水肿严重,胞浆内细胞器变性坏死脱失,线粒体肿胀,脊呈空泡状。低温(25℃)组细胞核膜规则,线粒体轻度肿胀。结论:低温有显?

人参皂甙Rb_1对大鼠海马脑片缺血损伤的保护作用

目的 研究人参皂甙 Rb1 对脑缺血损的保护作用及其机制。方法 实验利用离体海马脑片模型 ,结合电生理学技术进行研究 :(1)观察大鼠海马脑片在缺血条件下顺向群峰电位 (orthodrom ic population spike,OPS)的变化及人参皂甙 Rb1 对它的影响。 (2 )观察谷氨酸对海马脑片 OPS的影响及人参皂甙 Rb1 抗谷氨酸毒性作用。结果 (1)使用人参皂甙 Rb1 (6 0 0 μm ol/ L)后 ,可使缺氧损伤电位 (hypoxic injury potential,HIP)出现率明显减少 ,OPS恢复率和 OPS恢复程度与对照组比较有显著性差异。 (2 )使用人参皂甙 Rb1 (6 0 0 μm ol/ L)后 ,OPS恢复率和OPS恢复程度与对照组比较有显著性差异。结论 人参皂甙 Rb1 有明显的抗脑缺血损伤作用 ,其作用机制与抗谷氨酸的神经毒性作用有关。

钙蛋白酶抑制剂calpeptin对大鼠海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用

目的通过观察电生理学和神经元凋亡的变化,研究钙蛋白酶抑制剂calpeptin对大鼠离体海马脑片缺氧无糖损伤的保护作用。方法40片SD大鼠海马脑片随机分为两组:对照组和calpeptin组。根据人工脑脊液中calpeptin的浓度,再细分为1μmol.L-1组、10μmol.L-1组、100μmol.L-1组和200μmol.L-1组,每组8片脑片。采用细胞外记录技术观察calpeptin对大鼠离体海马脑片在缺氧无糖条件下顺向群峰电位(orthodromicpopulationspikes,OPS)及缺氧损伤电位(hypoxicinjurypotential,HIP)变化的影响,采用TUNEL法观察缺氧无糖损伤后海马脑片CA1区锥体细胞凋亡情况及calpeptin对它的影响。结果10μmol.L-1组、100μmol.L-1组和200μmol.L-1组HIP出现率及海马CA1区锥体细胞层凋亡细胞数减少,OPS恢复率和OPS恢复程度与对照组比较提高。而10μmol.L-1组、100μmol.L-1组和200μmol.L-1组之间各项指标差异无显著性。结论(10～200)μmol.L-1calpeptin可以减轻大鼠海马脑片的缺氧无糖损伤,其机制可能与calpeptin减少海马CA1区神经元凋亡有关。

人参皂甙Rb1抗脑缺血损伤作用的实验研究

目的研究人参皂甙Rb1对脑缺血损伤的保护作用。方法观察大鼠海马脑片在缺血条件下顺向群峰电位(orthodromic population spike，OPS)的变化及人参皂甙Rb1对它的影响。结果使用人参皂甙Rb1(600μmol／L)后，可使缺氧损伤电位(hypoxic injury potential，HIP)发生率明显减少(P<0．01)，OPS恢复率和OPS恢复程度与对照组比较有显著性差异(P<0．05)。结论人参皂甙Rb1有明显的抗脑缺血损伤作用。

藏药合剂抗脑缺血损伤作用的研究

目的 :观察藏药合剂对大鼠海马脑片缺血性损伤的保护作用。方法 :通过电刺激离体海马脑片 CA3区的 Schaffer侧支 ,记录 CA1区锥体细胞层的顺向群峰电位 (orthodromic population spikes,OPS) ,观察藏药合剂对缺血状态下 OPS的影响。结果 :藏药合剂组用药后 OPS恢复程度为 (6 4 .0± 19.5 ) % ,明显高于对照组 (P<0 .0 1)。结论 :在离体海马脑片模拟缺血损伤的研究中 ,藏药合剂对缺氧缺血性脑损伤有保护作用 ,而且效果较好。

银杏内酯对大鼠海马脑片缺血性损伤的保护作用

目的 :研究银杏内酯对海马脑片缺血性损伤的保护作用及其与剂量的关系。方法 :电刺激离体海马脑片诱发顺向群峰电位 (orthodromic population spikes,OPS)的方法 ,观察不同浓度的银杏内酯对缺血条件下 OPS变化的影响。结果 :银杏内酯 (37.5 mg/10 0 m l) OPS恢复幅度和恢复率分别为 (5 4 .8± 4 8.2 ) %、5 7.2 % ,与对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。而且银杏内酯组 OPS恢复幅度与其浓度呈正相关。结论 :银杏内酯对海马脑片缺血性损伤具有保护作用 。

人参皂甙Rb1抗脑缺血损伤作用的实验研究

目的研究人参皂甙Rb1对脑缺血损伤的保护作用.方法观察大鼠海马脑片在缺血条件下顺向群峰电位(orthodromic population spike,OPS)的变化及人参皂甙Rb1对它的影响.结果使用人参皂甙Rb1(600 μmol/L)后,可使缺氧损伤电位(hypoxic injury potential,HIP)发生率明显减少(P＜0.01),OPS恢复率和OPS恢复程度与对照组比较有显著性差异(P＜0.05).结论人参皂甙Rb1有明显的抗脑缺血损伤作用.

人参皂甙的抗鼠脑缺氧损伤作用

目的 用离体海马脑片缺氧实验 ,结合电生理学和超微结构两方面的变化 ,研究人参皂甙的抗脑缺氧作用。方法 (1)观察大鼠离体海马脑片缺氧条件下顺向群峰电位 (orthodromic populationspikes,OPS)的变化及人参茎叶总甙对它的影响 ;(2 )同时观察缺氧后海马脑片 CA1区锥体细胞层超微结构变化及人参茎叶总甙对它的影响。结果 (1)在对照组海马脑片 ,缺氧时缺氧损伤电位出现率为 71.4% ,缺氧后 OPS恢复率为 14.2 % ,恢复程度为 (2 4.8± 31.9) % ;而使用人参皂甙的海马脑片在缺氧前即见OPS减小 ,缺氧时未出现缺氧损伤电位 (hypoxic injury potential,HIP) ,缺氧后 OPS恢复率和恢复程度分别为 10 0 %及 (10 9.5± 37.3) %。与对照组比较均有显著性差异。 (2 )电镜观察显示 ,缺氧组海马脑片的神经细胞呈变性至坏死等不同程度的损伤 ,而人参皂甙组脑片神经细胞与正常细胞相似 ,损伤较轻 ,突触结构清晰 ,兴奋性神经递质小泡无明显耗竭。结论 (1)人参皂甙有明显的抗缺氧脑损伤作用 ;(2 )人参皂甙抗脑缺氧作用机制可能是 :降低神经元兴奋性 ,减少能耗 ,并保护线粒体 ,以维持胞内 ATP水平 ;抑制兴奋性神经递质释放 ,减轻其兴奋毒性。

二甲亚砜对大鼠海马脑片谷氨酸毒性损伤的影响

目的 观察二甲亚砜 (DMSO)对大鼠海马脑片谷氨酸 (Glu)兴奋性毒性损伤的影响 ,以探讨其保护作用与剂量的关系。方法 在离体海马脑片灌流液中加入 Glu造成兴奋性毒性损伤 ,用电生理记录技术观察不同浓度的 DMSO对海马脑片顺向群峰电位 (OPS)的影响。结果 去除 Glu 1h后 ,DM-SO (0 .0 7mol/ L )组 OPS恢复幅度和恢复率分别为 (88.2± 2 2 .9) % ,83.3% ,与对照组相比差异有显著性意义 (P<0 .0 5 ) ,而且 DMSO组 OPS恢复幅度具有剂量依赖性。结论 DMSO具有抗谷氨酸兴奋性神经毒性作用 ,且这一作用与所用剂量有关。

人参皂甙Rh2抗海马脑片H_2O_2损伤作用及与GABAA受体的关系

目的:研究人参皂甙Rh2对H_2O_2损伤保护作用及与GABAA受体的关系。方法:采用小鼠制备离体海马脑片,随机分为正常组、模型组、GABA组、人参皂甙Rh2(20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L)组、荷包牡丹碱组、荷包牡丹碱+人参皂甙Rh2组,每组20张脑片。采用碘化丙啶(PI)染色法测定H_2O_2损伤后海马CA1区细胞活力变化,免疫组化方法观察细胞色素C表达,电生理技术记录顺向群峰电位(OPS)观察突触传递变化。结果:人参皂甙Rh2(40μmol/L、60μmol/L)可明显提高H_2O_2损伤后海马CA1区细胞活力,降低海马CA1区细胞色素C表达,海马脑片OPS恢复率和OPS恢复程度亦明显提高。人参皂甙Rh2的保护作用和外源性GABA作用相似并可被GABAA受体抑制剂荷包牡丹碱所阻断。结论:人参皂甙Rh2可减轻H_2O_2对海马CA1区细胞损伤,促进神经元突触传递功能的恢复,其作用机制与激活GABAA受体而减少细胞色素C的释放有关。

丙泊酚对缺氧无糖损伤大鼠海马脑片的保护作用

目的探讨丙泊酚对缺氧无糖(OGD)损伤脑片的保护作用。方法采用缺氧无糖的人工脑脊液灌流离体大鼠海马脑片模拟缺血损伤,根据给药方式不同分为:OGD前给药组和OGD给药组,均给予1、10和20μmol·L-1的丙泊酚和脂肪乳(溶剂对照)。记录海马脑片顺向群峰电位(OPS)和缺氧损伤电位(HIP)的变化。结果OGD给药组应用10μmol·L-1的丙泊酚,与应用脂肪乳相比OPS消失时间推迟(P<0.05),OPS恢复率升高(P<0.05),HIP出现时间推迟(P<0.01),HIP出现率降低(P<0.05)。结论在缺氧过程中应用10μmol·L-1的丙泊酚对缺氧无糖损伤海马脑片具有保护作用。

丙泊酚抗N-甲基-D-天冬氨酸毒性作用及其与脑源性神经营养因子表达的关系

目的研究丙泊酚对N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)毒性损伤的保护作用及其机制。方法采用昆明小鼠制备离体海马脑片,随机分为对照组、损伤组和丙泊酚组(1、5、10μmol/L),每组10张脑片。2,3,5-氯化三苯四氮唑(TTC)染色法测定NMDA毒性损伤后脑片组织损伤率。细胞外记录技术观察顺向群峰电位(OPS)的变化。免疫组织化学方法观察海马CA1区脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达的变化。结果与损伤组比较,丙泊酚(5、10μmol/L)可明显减轻NMDA造成的脑片组织损伤(P<0.01),提高海马脑片OPS恢复程度(P<0.01),明显增强BDNF表达(P<0.05或P<0.01)。结论丙泊酚可通过增强BDNF的表达,减轻细胞损伤,促进神经元突触传递功能的恢复。