苹果梨果皮中预存抗菌物质的提取、分离与鉴定

膨大期、采收期、采后100d的苹果梨果皮的乙醇(甲醇)-二氯甲烷粗提取液经TLC分离,以链格孢为指示菌进行生物活性分析均有不同比移值的抑菌带出现,采用气-质联用法(GC/MS)对其成分进一步分析表明,三个时期抑菌带成分存在差异。其中棕榈酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯、鱼鲨烯(三十碳六烯)在膨大期含量最高,随着成熟和衰老的进行,含量逐渐降低,至采后100d,其含量分别为膨大期的1.8%、7.3%、19%和26.6%。推测它们是生长期间苹果梨果皮中存在的主要抗菌物质。邻苯二甲酸酯类是采收期和采后100d果皮中含量相对较高的抗菌物质,其中采后100d检出了6种邻苯二甲酸酯,相对含量高达60%。它们可能为采后果皮中主要的抗菌物质。

厚皮甜瓜果皮中预合成抗菌物质的提取、分离和鉴定

利用TLC法分离不同发育期甜瓜果实果皮中的甲醇-二氯甲烷提取物,并以A.alternata为指示菌进行生物活性测定,发现各有一条带具有抗菌活性。经气相色谱-质谱(GC-MS)联用分析,鉴定出了邻苯二甲酸二-(2-乙基)-己酯、2,6-二叔丁基-4-甲基-酚、邻苯二甲酸二异丁酯、棕榈酸甲酯、角鲨烯等多种可能的预合成抗菌物质。体外实验表明,邻苯二甲酸二甲酯(500μL/100mL)和角鲨烯(4000μL/mL)能够直接抑制A.alternata菌丝的生长。在果实生长发育过程中,预合成抗菌物质的种类和含量均呈下降趋势,果实膨大期种类最多、含量最高,至成熟时有些物质很难检出。

Harpin或BTH诱导厚皮甜瓜抗菌物质的研究

以50mg/L Harpin或100mg/L BTH作为诱抗剂,分别研究两者对植物生长期间合成抗菌物质的影响,分布于叶片的抗菌物质以甲醇-二氯甲烷浸提,薄层层析色谱(TLC)分离,并以A.alternata为指示菌,对其抑菌带的抗菌物质进行气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析。结果表明:甜瓜叶片中存在着邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯、邻苯二甲酸二丁酯、9,12,15-三烯十八酸等多种预存抗菌物质;经Harpin或BTH诱抗剂诱导后,抗菌物质的种类和含量均显著增加;诱抗剂处理不仅可诱导甜瓜植株固有的抗菌物质如邻苯二甲酸二异丁酯、邻苯二甲酸二丁酯、1,3,5-环庚三烯、9,12,15-三烯十八酸等含量增加,而且可诱导合成新的棕榈酸、棕榈酸甲酯、9,12,16-三烯十八醛、邻苯二甲酸丁酯等多种可能的抗菌物质;Harpin或BTH诱抗剂限制了Erysiphe cichoracearum菌丝在叶片中的侵染,显著降低了甜瓜白粉病和霜霉病的田间病情指数。