预知子籽对多种肝癌细胞恶性增殖的抑制作用研究

目的:观察预知子籽及其联合G418对SMMC7721、HEPG2、HuH7 3种肝癌细胞恶性增殖的抑制作用。方法:采用MTT法及倒置镜相显微镜技术,观察预知子籽75%乙醇提取物及联合细胞毒抗生素G418用药对3种肝癌细胞恶性增殖的抑制作用,及对细胞形态学影响的异同。结果:预知子籽乙醇提取物对SMMC7721、HEPG2及HuH73种肝癌细胞的恶性增殖均具有显著地抑制作用(P<0.01),及量效关系,其中剂量(1.88 mg生药/m L)与G418(0.45 mg/m L)半量联合用药对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用具有明显地减量增效作用(P<0.01)。细胞形态学检查显示,预知子籽小剂量(1.25 mg生药/m L)用药后,SMMC7721、HEPG2及HuH7肝癌细胞内均出现空泡,诱导出严重的内质网应激;中剂量(1.88 mg生药/m L)用药后,内质网应激更为显著,尤以SMMC7721细胞最为突出;至大剂量(2.5 mg生药/m L),3种肝癌细胞均呈现固缩脱胞浆现象。与预知子籽中剂量与细胞毒抗生素G418各自半量联合用药后,所有肝癌细胞均见固缩脱胞浆现象,或凋亡、死亡,尚存活细胞内仍见内质网应激现象。结论:预知子籽乙醇提取物具有选择性地诱导不同肝癌细胞严重的内质网应激,并抑制其恶性增殖,与G418联合用药对肝癌细胞恶性增殖的抑制具有减量增效作用。

预知子籽及预知子抑制肝癌细胞恶性增殖的研究

目的:观察预知子籽、预知子、预知子非籽皮囊部分,及其联合细胞毒抗生素G418对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用。方法:采用MTT法、细胞形态学等技术,观察预知子籽、预知子、预知子非籽皮囊部分乙醇提取物,及其联合G418对SMMC7721肝癌细胞恶性增殖的抑制作用。结果:预知子籽、预知子非籽皮囊部分,以及预知子饮片乙醇提取物对肝癌细胞恶性增殖均具有显著的抑制作用;无论是单独用药还是联合G418,预知子籽对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用均显著强于预知子及预知子非籽部分(P<0.01)。预知子籽给药后肝癌细胞内即充满空泡,发生了内质网应激。预知子籽及预知子各自联合G418用药,均显示出对肝癌细胞停药后反跳性增殖的抵御作用(P<0.05)。结论:预知子籽、预知子和预知子非籽皮囊部分均可有效抑制原发性肝癌细胞的恶性增殖,其中预知子籽是预知子全果实饮片抑制肝癌细胞恶性增殖的主要有效部位,其作用与其选择性造成肝癌细胞内质网应激有关。预知子籽、预知子对肝癌细胞中细胞器的选择性应激,给中西医联合用药的减量增效、缓解停药后肝癌细胞反跳性增殖等创造了机会,具有广阔的开发前景。

预知子籽提取物抑制HepG2肝癌细胞增殖作用及对SEPP1等分子表达的影响

目的:观察中药预知子籽乙醇提取物(ATKS)对HepG2肝癌细胞增殖及对SEPP1等分子表达的影响。方法:将不同浓度ATKS作用于HepG2细胞24h、48h、72h,MTT法检测HepG2细胞的细胞存活率;相差倒置显微镜下观察药物作用72h后的细胞形态;RT-qPCR方法检测SEPP1等6个基因表达量的变化;Western Blot方法检测SEPP1蛋白水平变化。结果:ATKS作用后,HepG2细胞增殖被抑制,并存在量效和时效关系,其中72h细胞半数抑制浓度为2.0mg/ml;较低浓度对细胞形态影响较小,随着浓度增加细胞数量逐渐减少,2.4 mg/ml以上细胞数量锐减,状态变差,药物细胞毒作用凸显;2.0 mg/ml作用72h后,SEPP1基因表达被显著下调,其上游基因CAPNS1、ITGA2、ITGAV、ITGB1、ITGB5却一致上调;SEPP1蛋白表达量也出现显著下降。结论:ATKS能抑制HepG2肝癌细胞增殖,并具有量效和时效关系;SEPP1等基因和蛋白表达量发生变化,可能与ATKS的抑制作用有关。

不同种源预知子籽的油脂含量及其油脂脂肪酸组成分析

分析11省(市)18个产地不同种源预知子籽的油脂含量,通过气相色谱-质谱联用仪分析其油脂脂肪酸组成,并采用欧氏距离、ward法进行聚类分析,为更好地筛选和培育优良油用预知子提供实验数据。结果表明:不同种源预知子籽的油脂含量在36.84%48.68%之间;预知子籽油中脂肪酸均以不饱和脂肪酸为主,各脂肪酸的相对含量差异较大,其中油酸和亚油酸含量变化范围分别为21.09%44.21%和18.43%37.07%,除湖北襄阳预知子籽(三叶木通种子)油未检出亚麻酸外,其他地区亚麻酸含量变化范围为2.55%24.63%;聚类分析将预知子分为4类。表明不同种源预知子营养价值存在差异。