基于Wnt信号通路分析葛根素对大鼠颈动脉球囊损伤术再狭窄的干预作用

目的:基于Wnt信号通路分析葛根素对大鼠颈动脉球囊损伤术再狭窄的干预作用。方法:取75只大鼠,将其中15只作为正常组(耳缘静脉注射等体积生理盐水),其余大鼠建立颈动脉球囊损伤术再狭窄模型,建模成功后随机分为模型组(耳缘静脉注射等体积生理盐水)、低剂量组(耳缘静脉注射葛根素30 mg)、中剂量组(耳缘静脉注射葛根素60 mg)、高剂量组(耳缘静脉注射葛根素100 mg),各15只。检测各组新生内膜面积、管腔面积;采用酶联免疫吸附法检测血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、硫化氢(H2S)、1型胶原(Collagen1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2),检测各组Wnt通路相关蛋白。结果:与中剂量组比较,高剂量组新生内膜面积、VEGF、TNF-α、Collagen1、MMP-2、Wnt1、Wnt3a水平表达降低(P<0.05),高剂量组管腔面积及H2S水平表达升高(P<0.05)。结论:葛根素可能通过调控Wnt信号通路中相关重要信号传导分子的蛋白表达,发挥改善颈动脉球囊损伤术再狭窄的作用,且呈剂量依赖性。

赤芍对球囊损伤术后血管内膜单核细胞趋化蛋白-1基因表达的影响

目的观察单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)在高脂喂养兔颈动脉球囊损伤术后内膜增生中的机制,以及赤芍的干预作用。方法将40只新西兰大白兔随机分为对照组、模型组及赤芍高、中、低剂量组。对照组兔喂饲普通饲料;其余各组喂饲高脂饲料(93%普通饲料+2%胆固醇+5%猪油);赤芍组按赤芍提取物不同剂量给药:高剂量组相当于生药3g·kg-1·d-1,中剂量组相当于生药2g·kg-1·d-1,低剂量组相当于生药1g·kg-1·d-1。各组动物喂饲8周后行颈动脉球囊损伤术制备颈总动脉内膜再狭窄模型。于10周末取各组兔耳静脉血,测定血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白B(Apo-B)水平;取血后活杀动物,取损伤血管做冰冻切片,观察血管内膜增生情况,用原位杂交、免疫组化分析及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCP-1 mRNA表达。结果与模型组比较,赤芍各剂量组TC、TG、LDL-C、Apo-B均明显降低,HDL-C则明显升高(P<0.05或P<0.01);内膜增生面积、内膜增生/中膜面积比值显著减小,MCP-1mRNA表达均减少,其中以赤芍高、中剂量组最为显著(P<0.05或P<0.01)。结论赤芍可减轻兔颈动脉球囊损伤术后内膜增生程度,抑制血管壁MCP-1 mRNA表达。

华夏小葱提取物对球囊损伤术后血管再狭窄的影响

目的观察华夏小葱提取物对球囊损伤术后血管再狭窄的影响。方法Wistar大鼠随机分为8组,即球囊损伤2周/4周组、华夏小葱提取物2周/4周组、缬沙坦2周/4周组及立普妥2周/4周组。球囊损伤术后,高脂饲料喂养2周或4周后观察血管形态学变化,免疫组织化学法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、增殖细胞核抗原(PCNA)和型胶原(CP)水平,并进行定量统计分析。结果各给药组较球囊损伤组管腔面积明显增大,新生内膜面积明显减小(P<0.05);各时间点PCNA、MMP-2和CP表达均降低,华夏小葱组最低(P<0.01)。结论华夏小葱对血管平滑肌细胞增殖有一定抑制作用,可以改善球囊损伤后再狭窄。

内皮型一氧化氮合酶基因体内转染对大鼠颈总动脉损伤后血管狭窄程度的影响

目的将内皮型一氧化氮合酶基因转染至球囊损伤后的大鼠颈总动脉中,观察其对血管狭窄程度的影响。方法将大鼠分为正常对照组、空白对照组、pcDNA3.1(-)组和内皮型一氧化氮合酶组。除正常对照组外均行颈总动脉内膜球囊损伤术,术中采用脂质体载体FuGENE6分别介导真核表达载体pcDNA3.1内皮型一氧化氮合酶和pcDNA3.1(-)转染至损伤后的内皮型一氧化氮合酶组和pcDNA3.1(-)组大鼠血管中。于术后2周处死大鼠,以逆转录—聚合酶链反应法检测转染后体外培养的血管平滑肌细胞中内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达,并于术后1月和2月处死大鼠,检测颈总动脉血管狭窄的程度。结果2周后转染pcDNA3.1内皮型一氧化氮合酶基因的血管平滑肌细胞中可以检测出内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达,1月和2月后转染pcDNA3.1内皮型一氧化氮合酶基因的颈总动脉狭窄程度明显小于空白对照组和pcDNA3.1(-)组(P<0.01)。结论内皮型一氧化氮合酶基因体内转染可以在血管平滑肌细胞中成功表达,且可以明显改善球囊损伤后颈总动脉狭窄的程度。