番茄颈腐根腐病病原菌鉴定及抗性品种筛选

番茄颈腐根腐病是设施番茄冬春生产中最严重的病害之一,严重威胁我国设施番茄的安全生产。近年来番茄颈腐根腐病在我国番茄主产区发生日益严重,培育抗病品种是防治该病最经济有效的方法。本试验采集典型症状的发病植株进行病原菌分离纯化,综合运用形态学观察、分子生物学鉴定和致病性测定方法,确定病原菌为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型(Fusarium oxysporum f.sp.radicis-lycopersici,Forl)。之后利用分离的病原菌通过苗期人工接种鉴定结合抗性基因分子标记方法,对32个番茄商品种进行抗颈腐根腐病鉴定分析,结果显示有18个表现抗病,与分子标记Frl-ZL的鉴定结果一致,可用于番茄抗颈腐根腐病育种或生产。

山东省番茄颈腐根腐病病原菌鉴定

以山东省6个地区的番茄颈腐根腐病(Fusarium crown and root rot,FCRR)8份发病植株为试验材料,对病原菌进行分离纯化。利用真菌通用引物、多聚半乳糖醛酸酶(PG)基因特异标记、特定指示性番茄材料、无毒基因特异引物及尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐专化型特异引物等多种方法对该病原菌进行鉴定。研究结果表明,尖孢镰刀菌通用引物鉴定结果显示8份FCRR病原菌均为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum,Fo);PG酶基因特异标记鉴定结果表明所有病原菌均为番茄枯萎病病原菌生理小种3(Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici race 3,Fol3);而指示性番茄材料鉴定结果表明所有病原菌并非番茄枯萎病病原菌生理小种Fol1、Fol2或Fol3;无毒基因特异性引物鉴定结果初步显示所有病原菌均为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐专化型(Fusarium oxysporum f.sp.radicis-lycopersici,Forl);尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐专化型特异性引物FrlDel30F/R进一步确定所有菌株均为番茄颈腐根腐专化型。因此,引起山东省6个地区的番茄FCRR的病原菌为Forl。

番茄颈腐根腐病病原鉴定及2种接种方法的评价

为了确定引起河北省丰南区发现的一种植株青枯、维管束褐变的番茄病害的病原菌,进行了病原菌分离培养纯化、致病性测定、田间接种后再分离、菌落和形态学观察结合分子鉴定,确定该病害为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型引起的番茄颈腐根腐病。确定病原菌为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型。对茎基接种和浸根接种进行了评价,结果表明,茎基接种发病率和死亡率均高于浸根接种。为接种完成该病害的抗病育种和防治药剂筛选的研究提供了理论依据。

与番茄颈腐根腐病抗病基因Frl连锁的标记及应用

利用与番茄颈腐根腐病抗病基因Frl紧密连锁的分子标记SCAR_(200)和C2-25在已知抗病材料和感病材料中进行验证,进而结合接种鉴定方法在抗病商品品种凯文F2代群体中加以应用。结果表明,SCAR_(200)和C2-25均为共显性标记,可以用于已知抗病和感病材料中的分子标记辅助鉴定;SCAR_(200)和C2-25在凯文F2代群体24个单株中均检测到7个纯合抗病单株、5个感病单株和12个杂合抗病单株;接种鉴定结果显示,有1个单株与分子鉴定结果存在出入,即分子标记辅助鉴定的准确率为95. 83%。

番茄颈腐根腐病病原菌及抗病育种研究进展

由尖孢镰刀菌FORL引起的番茄颈腐根腐病是近年来最具破坏性的番茄土传病害之一,该病害严重威胁我国设施番茄的安全生产。综述了番茄颈腐根腐病病原菌生物学特性、发病规律、为害特征及抗病育种等相关研究进展,以期为我国番茄颈腐根腐病的抗病育种提供借鉴。

番茄颈腐根腐病的发生、传播与防治

为了有效地识别和防治番茄颈腐根腐病,在介绍番茄颈腐根腐病的发生与危害、致病菌生物学特性、发病症状与侵染传播的基础上,从农业防治、物理防治、化学防治、生物防治等方面综述防治措施研究进展,最后进行了展望,提出集合抗病育种、农艺治理、土壤消毒、生化防治等防控措施的综合防治方法是符合“科学、绿色、高效”农业发展要求的理想选择,是未来的研究方向。

番茄颈腐根腐病病原鉴定及其品种抗性鉴定

【目的】明确甘肃省番茄颈腐根腐病病原菌,为其防治奠定基础.【方法】于2016年对甘肃省番茄颈腐根腐病进行调查并采集样品,采用常规组织分离法分离病原,单孢分离法进行纯化,结合其形态和分子特征进行鉴定,通过盆栽法测定各菌株的致病性及筛选抗性品种,柯赫氏法则验证确定番茄颈腐根腐病的病原.【结果】共分离得到6株病原菌,鉴定为尖孢镰孢菌(Fusarium oxysporum),其致病性较强,发病率85%左右,病情指数为63左右.通过抗性鉴定,筛选出‘精品红美女’‘花绣球’‘元明粉玉女’和‘红色樱桃’ 4个抗性品种.【结论】尖孢镰孢菌是引起番茄颈腐根腐病的病原,选育抗病品种是防治番茄颈腐根腐病最经济有效的方法.

番茄颈腐根腐病抗性鉴定技术的建立及抗性种质资源筛选

【目的】探索番茄颈腐根腐病(Fusarium crown and root rot,FCRR)苗期抗性鉴定技术,并对番茄种质资源及品种进行抗性鉴定分析,挖掘和丰富可利用的抗性资源,为培育抗颈腐根腐病番茄品种打下基础。【方法】以尖镰孢番茄颈腐根腐病专化型病原菌(Fusarium oxysporum f. sp. radicis-lycopersici,Forl)和感病栽培番茄Heinz 1706为材料,研究接种菌液浓度、接种寄主苗龄、接种后管理温度和不同接种方法对番茄颈腐根腐病人工接种鉴定效果的影响。随后通过苗期人工接种鉴定方法结合文献中已报道的与抗性基因连锁的分子标记,对100份番茄种质材料进行颈腐根腐病抗性鉴定分析。【结果】在一定范围内,番茄颈腐根腐病发病率及病情指数随着接种菌液浓度的升高而增大,接种菌液浓度为107个孢子/mL时,发病率及病情指数分别为100%和89.2,可以反映寄主真实的抗性水平;接种寄主苗龄为2—5叶期均能使植株发病,不同苗龄间病情指数无显著差异;接种后不同的管理温度对番茄颈腐根腐病的病情指数影响显著不同,其中较低的管理温度(20℃)有利于番茄颈腐根腐病的发生;使用浸根法和灌根法进行鉴定,番茄颈腐根腐病发病率和病情指数较高且效果稳定,显著优于茎注射法。对100份番茄种质材料进行分析,接种鉴定结果显示有38份材料表现抗病,这些材料可用于番茄抗颈腐根腐病育种或生产。在已报道的与Frl连锁的分子标记中,SCARFrl的准确率最低,仅为51%,C2-25的准确率为59%,而PNU-D4的准确率为83%,该标记可用于番茄抗颈腐根腐病辅助选择。【结论】建立的苗期抗性鉴定技术能客观反映供试材料的实际抗性水平,可用于番茄抗颈腐根腐病材料的鉴定筛选。

番茄颈腐根腐病的发生及其防治研究进展

番茄颈腐根腐病是近年来冬春大棚番茄上发病最严重的土传病害之一,其由尖孢镰刀菌FORL所引起,该病害给我国的番茄生产造成了极大的损失。尖孢镰刀菌FORL与番茄枯萎病菌为同种尖孢镰刀菌的不同专化型,但其比仅侵染番茄的番茄枯萎病菌的寄主范围更广、危害性更大。综述了番茄颈腐根腐病的发生、病原菌形态学和检测方法、发病规律及其防治研究进展,并对番茄颈腐根腐病的研究进行了展望,以期为我国番茄颈腐根腐病防治提供有益的参考。

与番茄颈腐根腐病紧密连锁的SCAR标记开发

利用与番茄颈腐根腐病抗性基因Frl紧密连锁的CAPS标记C2-25,开发设计了新的SCAR标记,用于快速检测Frl抗性材料。使用C2-25引物,在25份已知表型的番茄材料中进行PCR,产物单克隆测序后发现,19份纯合抗病材料存在1条完全相同的抗病序列;4份纯合感病材料存在1条完全相同的感病序列;2份杂合抗病材料均存在前述的抗病序列和感病序列。根据抗病、感病序列SNP差异设计引物,最终筛选得到可扩增出370 bp抗病特异片段和520 bp感病特异片段的番茄颈腐根腐病连锁标记R-6F/2R、S-3F/4R。在500株F2材料中进行验证,检测到122株纯合抗病单株、257株杂合抗病单株和121株纯合感病单株。F2材料人工接种鉴定结果显示,473株单株抗性与分子鉴定结果一致,分子标记辅助鉴定的准确率达到94.6%。开发的SCAR标记准确度高、成本低、操作简便,可用于Frl基因的分子标记辅助育种。

吡唑醚菌酯及三唑类杀菌剂对番茄颈腐根腐病的防治效果

目的】评价吡唑醚菌酯与戊唑醇、丙环唑、氟硅唑等防治番茄颈腐根腐病的应用潜力。【方法】采用菌丝生长速率法和孢子萌发法分别测定吡唑醚菌酯、戊唑醇、丙环唑、氟硅唑4种杀菌剂抑制番茄颈腐根腐病菌(Fusarium oxysporum f.sp.radicis-lycopersici)菌丝生长、分生孢子萌发及芽管伸长的毒力。通过温室盆栽试验,采用灌根处理法,于施药后7、15 d测定番茄幼苗株高和茎粗的增加量,评价杀菌剂对番茄植株生长的安全性;在室内,利用盆栽番茄,采用先接菌后施药的方法,测定施药后7、15和30 d药剂对番茄颈腐根腐病的防治效果;在田间,同样采用灌根处理,分别于施药后60、90和150 d调查番茄颈腐根腐病发病情况及最终番茄产量,评价不同杀菌剂对番茄颈腐根腐病的防治效果以及对番茄产量的影响。【结果】吡唑醚菌酯对番茄颈腐根腐病菌菌丝生长、孢子萌发及芽管伸长均表现出较高的毒力,EC_(50)分别为0.055、0.012、0.010μg·m L^(-1),其次为丙环唑,EC_(50)分别为0.058、0.060、0.011μg·m L^(-1)。戊唑醇抑制菌丝生长的作用强,对孢子萌发及芽管伸长的毒力较低,EC_(50)分别为0.075、0.255、0.455μg·m L^(-1);氟硅唑抑制分生孢子芽管伸长的毒力高,而抑制菌丝生长与孢子萌发毒力相对较低,EC_(50)分别为0.013、0.078、0.457μg·mL^(-1)。戊唑醇25、50 mg a.i./株、丙环唑5、10 mg a.i./株、氟硅唑5、10 mg a.i./株均显著抑制番茄幼苗株高,增加茎粗,吡唑醚菌酯30、60 mg a.i./株处理则均无影响。温室盆栽接种试验中,药后30 d,吡唑醚菌酯60 mg a.i./株防治效果最高,为87.12%,丙环唑10 mg a.i./株次之,防治效果为82.17%,戊唑醇50 mg a.i./株与氟硅唑10 mg a.i./株的防治效果分别为79.40%与71.67%。田间施药后90 d,吡唑醚菌酯60 mg a.i./株防治效果最高,为90.36%,戊唑醇50 mg a.i./株与丙环唑10 mg a.i./株次之,分别为84.20%与82.55%,氟硅唑5 mg a.i./株防治效果最低,为65.06%。而至施药后150 d,各处理防治效果均显著降低,戊唑醇50 mg a.i./株最高,为40.40%。最终产量统计,吡唑醚菌酯60 mg a.i./株处理增产率最高,为50.63%,丙环唑5 mg a.i./株最低,为-2.61%。【结论】吡唑醚菌酯、戊唑醇、丙环唑、氟硅唑4种杀菌剂抑制番茄颈腐根腐病菌菌丝生长的毒力相近,吡唑醚菌酯对孢子萌发及芽管伸长的毒力高于3种三唑类药剂。吡唑醚菌酯、丙环唑及戊唑醇均可用于设施内番茄颈腐根腐病的防治,吡唑醚菌酯60 mg a.i./株的防治效果最高,对植株安全且增产显著,而丙环唑与戊唑醇应注意控制使用剂量。

番茄颈腐根腐病菌分离鉴定与生物学特性研究

近年山东温室大棚中番茄发生大面积颈腐根腐病病害,对其产量和品质影响严重。文章采用形态学、分子生物学及柯赫氏证病法分离鉴定病株病原菌,证实这一病害为番茄颈腐根腐病,病原菌为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型(Fusarium oxysporum f.sp.radicis-lycopersici)。采用单因素变量法研究不同环境条件对病原菌生长影响。结果表明,病原菌致死温度为63℃,菌丝生长最适温为28℃,最适pH为9,最适光照为12h光照12h黑暗,最适培养基为燕麦培养基,碳源为乳糖,氮源为甘氨酸。产孢最适温为25℃,最适pH为8,最适光照为24h黑暗,最适培养基为PDA,碳源为葡萄糖,在PDA基础上添加不同氮源不利于产孢。研究可为抗病种质资源筛选提供科学依据。

番茄颈腐根腐病研究进展

番茄颈腐根腐病是由尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型(Fusarium oxysporum f.sp.radicis-lycopersici,Forl)侵染引起的土传性真菌病害,在世界范围内均有发生,设施栽培发生尤为严重,已成为威胁我国设施番茄冬春季生产的重要病害之一。本文结合国内外研究进展,从番茄颈腐根腐病的发生情况、发病症状、病原菌鉴定、抗病性鉴定以及抗性基因遗传定位等方面进行综述,以期为番茄颈腐根腐病鉴定与防治、抗病育种、抗病基因的定位与克隆、分子标记开发等提供借鉴。

山东温室番茄颈腐根腐病发生规律及其防治技术

番茄颈腐根腐病是近年来温室栽培番茄上发病最严重的土传病害之一,由土传真菌尖孢镰刀菌所引起,该病害的发生给我国的番茄生产造成了极大的威胁。近几年,随着乡村振兴战略深入推进,山东地区温室栽培番茄种植面积持续扩大,番茄颈腐根腐病有不断扩展和加重趋势。本文作者介绍了山东地区温室栽培番茄颈腐根腐病的发病规律,并提出了切实有效的防治措施,以期为番茄颈腐根腐病防治提供参考和依据。

番茄抗颈腐根腐病基因Frl的定位分析

以含有番茄颈腐根腐病抗病基因Frl的番茄材料19912与感病材料Moneymaker构建F2群体,采用父母本的重测序技术结合BSA的关联分析方法,进一步对番茄颈腐根腐病抗病基因Frl候选区间关联分析,以期筛选得到抗性基因的候选区间。结果表明:通过对父母本的重测序及BSA混池关联分析,将Frl基因定位于1号染色体的2.63~81.19 Mb区间;利用SNP分型技术,结合BSA的测序结果,将区间缩小至17.4~23.5 Mb。该研究不仅可以为抗病基因的克隆及应用提供参考依据,还将为解析番茄颈腐根腐病抗性机制奠定基础。

番茄颈腐根腐病病原鉴定及不同条件对其生长的影响

作者于2007年在北京郊区大棚内发现番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)颈腐根腐病。为了促进我国开展番茄颈腐根腐病的防治研究和抗病品种培育工作,有效控制番茄颈腐根腐病的危害,采集表现典型症状的发病植株进行病原分离、纯化,结合传统的形态学方法和rDNA-ITS序列分析方法,并进行了该病原菌的适宜发病土壤温度测定和致病范围试验,在此基础之上对病原菌进行了鉴定。本论文还对该病原菌生长的影响条件进行了研究,确定该病由尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐专化型(Fusarium oxysporum f.sp.radicis-lycopersici)侵染所致;该病原菌在PDA培养基上生长适宜温度为25℃,最适pH为8;其较适宜的氮源是有机氮和硝态氮,铵态氮不适宜其生长;菌丝致死温度为63℃、10 min;分生孢子萌发的最适相对湿度是100%,最适温度为25℃,分生孢子致死温度为61℃、10 min。这是首次关于尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐专化型导致番茄病害在我国发生和研究的报道。

番茄颈腐根腐病病原菌鉴定与抗病种质材料的筛选

2014年在山东寿光农户种植番茄的日光温室内采集典型颈腐根腐病症状的发病植株进行病原分离、纯化,结合形态学观察及rDNA-ITS序列分析,确定病原菌为尖孢镰刀菌番茄颈腐根腐病专化型(Fusarium oxysporum f.sp.radicis-lycopersici)。利用源自秘鲁番茄颈腐根腐病抗性基因Frl的共显性标记C2-25,对田间未表现典型颈腐根腐病症状的25份种质材料进行鉴定,鉴定出19份纯合抗病材料,2份杂合抗病材料,4份纯合感病材料,此结果与人工接种病原菌鉴定方法相一致。

茉莉酸甲酯对番茄颈腐根腐病抑制效果

以易感FCRR番茄品种‘鲜阳草莓’为试材,在幼苗两叶一心时采用苯莉酯甲酯(MeJA)、颈腐根腐病病原菌(FORL)及MeJA+FORL处理植株,并进行幼苗生长指标、抗病指数及生理指标的检测,研究了MeJA诱导番茄提高颈腐根腐病(FCRR)抗性的可能性与活性氧代谢相关酶的关系,以期为该病防治提供参考依据。结果表明:MeJA处理有利于‘鲜阳草莓’幼苗生长;MeJA+FORL和FORL处理的过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性及脯氨酸、丙二醛含量随着接种天数的增加呈现先上升后下降的趋势,并且MeJA+FORL可显著降低病情指数。外源喷施MeJA可以诱导番茄对FORL的抗性。

接种Forl对番茄幼苗生长、根系保护性酶及防御相关基因表达的影响

以番茄品种‘Moneymaker’幼苗为试材,采用人工接种番茄颈腐根腐病病原菌的方法,研究了接种该病原菌后番茄幼苗形态、生理及相关基因的相对表达量,病原菌对番茄幼苗生长、根系保护性酶活性及防御相关基因表达的影响,以期为该病防治提供参考依据。结果表明:与对照相比,接种12 d后,番茄幼苗主要生长指标显著低于对照,病情指数高达62.3%。随着接种天数增加,接种和对照处理幼苗根系活力均呈上升趋势,但接种处理增幅较为缓慢,且接种后6 d和12 d均显著低于对照;而超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均显著高于对照。另外,随着接种天数增加,接种处理幼苗根系中乙烯信号标记基因ETR4与Pti4相对表达量均显著升高;水杨酸合成关键基因ICS的相对表达量显著增加,而PAL的相对表达变化幅度较小;防御信号基因PR1a的响应较为强烈,相对表达量最高升至200倍左右;而蛋白酶抑制剂基因PI-1的相对表达量变化较小。