低氧环境下自噬对颏舌肌卫星细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨低氧环境下自噬对颏舌肌卫星细胞(Genioglossus muscle satellite cells,GG MuSCs)增殖能力与凋亡蛋白表达的影响。方法:体外培养大鼠颏舌肌卫星细胞,MTT法筛选自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)无毒剂量并检测细胞增殖能力。实验设常氧组、常氧+25μmol/L氯喹组、单纯低氧组、低氧+5μmol/L氯喹组、低氧+15μmol/L氯喹组、低氧+25μmol/L氯喹组。Western blot检测自噬标志蛋白LC3、促凋亡蛋白caspase-3及细胞色素c(cytochrome c,Cyt c)的表达水平。结果:1)Western blot结果显示:与常氧组相比,单纯低氧组LC3-Ⅱ/Ⅰ、caspase-3、Cyt c表达均增加;与单纯低氧组相比,低氧+氯喹组中随着给药浓度增加,LC3-Ⅱ/Ⅰ、caspase-3、Cyt c的表达水平呈递增趋势。2)MTT结果显示:与常氧组相比,单纯低氧组细胞增殖能力显著增强;而低氧+氯喹组中随着给药浓度增加,细胞增殖能力受到明显抑制。结论:低氧诱发的自噬促进颏舌肌卫星细胞存活,抑制自噬导致细胞增殖能力下降,凋亡蛋白表达显著增加。这提示自噬可能是颏舌肌卫星细胞抵御低氧损伤的重要机制。