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题名额外拷贝ERG6基因对烟曲霉的影响
被引量:3
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作者
乔建军
刘伟
曹存巍
万哲
李若瑜
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机构
北京大学第一医院皮肤科北京大学真菌和真菌病研究中心
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出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第1期191-194,共4页
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基金
国家自然科学基金(No.30500027)
教育部留学归国人员科研启动基金的资助
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文摘
通过构建烟曲霉ERG6基因额外拷贝株.研究该基因对烟曲霉生长速度、抗药物敏感性的影响。在烟曲霉基因组找出烟曲霉可能的ERG6基因的开放读码框(ORF),PCR扩增ERG6的ORF连同其上下游各约1 kb的DNA片段,利用DNA重组的方法将该片段克隆到载体pRG-AMA1-NotI。用重组后的质粒转化烟曲霉尿嘧啶营养缺陷株AF293.1。在MM和YAG培养基上观察转化子的生长速度。采用纸片扩散法和微量液基稀释法测定转化子对抗真菌药物敏感性。烟曲霉基因组中存在一个拷贝的ERG6基因,ORF大小为1,256 bp。其编码的蛋白与白念珠菌、酿酒酵母固醇甲基转移酶(Ers6p)的氨基酸相同率分别为57%和50%,相似率分别为70%和63%。烟曲霉中ERG6基因被成功克隆到了pRG-AMA1-Not I,产生了质粒pERG6。用pERG6和空载体pRG-AMA1-Not I转化AF293.1后,分别得到转化子AF-pERG6和AF-empty。AF-pERG6在MM和YAG培养基上的生长速度均比AF-empty慢。AF-pERG6和AF-empty对伊曲康唑、伏力康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性没有差异。ERG6基因额外拷贝不影响烟曲霉对伊曲康唑、伏力康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性,但是能使烟曲霉的生长速度减慢。
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关键词
烟曲霉
ERG6基因
额外拷贝
抗真菌药物敏感性
生长速度
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Keywords
Aspergillus fumigatus, ERG6 gene, Extra copies, Antifungal susceptibility testing, Radial growth
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分类号
R519
[医药卫生—内科学]
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题名含额外拷贝ERG3B基因烟曲霉的表型分析
被引量:2
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作者
乔建军
刘伟
李若瑜
万喆
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机构
北京大学第一医院皮肤性病科北京大学真菌和真菌病研究中心
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出处
《中国皮肤性病学杂志》
CAS
北大核心
2008年第1期19-22,共4页
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基金
国家自然科学基金资助项目(编号30500027)
教育部留学归国人员启动基金资助项目
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文摘
目的克隆烟曲霉ERG3B基因,并构建烟曲霉ERG3B基因额外拷贝株,了解该基因对烟曲霉表型的影响。方法通过同源性比对,在烟曲霉基因组找出烟曲霉可能的ERG3基因的开放读码框(ORF),PCR扩增ERG3B基因ORF连同其上下游各约1kb的DNA片段,将该片段重组到穿梭质粒pRG-AMA1-NotI。用重组后的质粒转化嘧啶营养缺陷株烟曲霉AF293.1。观察转化子的生长速度并测定转化子对抗真菌药物敏感性。结果①烟曲霉ERG3基因有3个拷贝(ERG3A,ERG3B,ERG3C)。Erg3Ap和Erg3Bp与其他真菌的Erg3同源性高。②烟曲霉ERG3B基因被重组到了pRG-AMA1-NotI,产生质粒pERG3B。用pERG3B和空载体pRG-AMA1-NotI转化AF293.1后,分别得到转化子AF-pERG3B和AF-empty。AF-pERG3B与AF-empty的生长速度无差异;两者对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性也无差异。结论额外拷贝的ERG3B基因不影响烟曲霉的生长速度及对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性。
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关键词
烟曲霉
ERG3B基因
额外拷贝
抗真菌药物敏感性
菌丝生长
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Keywords
Aspergillus fumigatus
ERG3 B gene
Extra copies
Antifungal Susceptibility testing
Radial growth
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分类号
R392.13
[医药卫生—免疫学]
R379
[医药卫生—病原生物学]
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