新疆额尔齐斯河沿岸野生牛肝菌菌种的分离与鉴定

[目的]采集新疆额尔齐斯河沿岸野生牛肝菌进行分离和鉴定,为该野生大型食用菌的保护和利用提供科学依据。[方法]观察野生牛肝菌的生长环境、表现形态以及生长分布情况,进行形态学鉴定。分离培养采用菌根菌培养基,通过rDNA ITS区段的PCR扩增菌体子实体和培养的菌丝进行分子生物学鉴定。[结果]通过形态学鉴定成熟牛肝菌的菌盖直径在6-13 cm,初期球形菌盖紧包菌柄顶端后期成扁半球形,菌肉白色,微带粉色,菌柄顶部也为白色,菌管由白色逐渐变为褐色带暗土黄色,管孔小。菌柄长4-12 cm,粗2-6cm,近圆柱形,淡褐色或淡黄褐色,表面具黑色疣状突起,内部实心,基部稍膨大。孢子印圆形呈褐色。该野生牛肝菌菌盖、菌柄及两者交接处均能分离出菌丝。利用rDNA上的ITS区段对野生牛肝菌及其分离菌株进行分子生物学辅助鉴定,子实体及其分离菌株的ITS片段长度基本一致,在1000 bp左右二者的相似性达到96%。采用DNAStar软件中的MegAlign-ClustalW模型计算出牛肝菌的进化分歧矩阵,并构建系统进化树。[结论]从形态学观察,野生牛肝菌与隶属于伞菌目(Agaricases)、牛肝菌科(Boletaceae)、疣柄牛肝菌属(Leccinum)的皱皮疣柄牛肝菌Leccinum duriusculum最为近似,从分子生物学鉴定该野生牛肝菌与Genebank中AF484445.1序列即皱皮疣柄牛肝菌Leccinum duriusculum是同一来源,一致性高达98.4%。