栀子苷抑制HSP70释放改善风湿热痹证胶原性关节炎大鼠血管新生的作用研究

目的探讨栀子苷(geniposide,GE)改善风湿热痹证胶原性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠血管新生的作用是否与调控热休克蛋白70(heat shock proteins 70,HSP70)的释放有关。方法在大鼠背部和尾根部多点皮内注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)与鸡Ⅱ型胶原蛋白(chicken type II collagen,CCII)等体积混合物,构建CIA模型,在此基础上,给予风湿热刺激,建立风湿热痹证CIA大鼠(CIA rats with moist heat arthralgia spasm syndrome,CIA-S)模型。造模成功后随机分组,给药组分别用GE(60、120 mg·kg^(-1)·d^(-1))、MTX(0.5 mg·kg^(-1)·3d^(-1))灌胃两周,取材。观察大鼠体质量、关节炎指数(arthritis index,AI)等评价模型情况,关节表面温度和血流变指标评价热痹模型热属性,HE染色观察大鼠滑膜病理,多普勒彩超检测血流信号,免疫组化和Westren blot法检测滑膜组织HSP70、CD31、VEGF含量,ELISA法检测大鼠血清HSP70含量。EdU染色、细胞划痕和Transwell迁移实验以及成管实验探究HSP70对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilic vein endothelial cells,HUVECs)的增殖、迁移、成管能力的影响。结果与空白组相比,CIA-S组关节肿胀,热属性明显,血管新生强烈,滑膜组织异常增生,炎性细胞浸润,可见微血管形成;CIA-S组与CIA组比较,关节红肿程度加重,炎症峰值提前、持续时间延长,消退缓慢,血管新生与HSP70表达更为强烈。GE给药组呈剂量依赖性,有效改善关节炎症状,减少HSP70含量。细胞实验结果表明,GE抑制HSP70的表达和释放,进而抑制HSP70诱导的HUVECs增殖、迁移和成管能力增强。结论GE有可能通过抑制HSP70的释放改善风湿热痹证CIA大鼠血管新生,进而改善关节炎。

清热逐风合剂联合西药及康复综合疗法治疗膝骨关节炎发作期风湿热痹证临床研究

目的观察清热逐风合剂联合西药及康复综合疗法对膝骨关节炎(KOA)发作期风湿热痹证的临床疗效。方法将112例患者分层、分区组随机分为观察组和对照组各56例。对照组予依托考昔片,60 mg/次,1次/d,口服;硫酸氨基葡萄糖片,0.628g/次,3次/d,口服;康复训练,每日2组。观察组在对照组基础上予清热逐风合剂,50 mL/次,3次/d,口服。2组均连续治疗2周。观察2组临床疗效,比较2组治疗前后中医症状评分、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数量表(WOMAC)评分、视觉模拟评分法(VAS)评分、压痛指数及血液流变学指标(纤维蛋白原、红细胞沉降率、红细胞聚集指数)、血清炎症因子(白细胞介素-1β、白细胞介素-6、血管内皮生长因子、肿瘤坏死因子-α)、骨代谢指标(骨钙素、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b、骨特异性碱性磷酸酶)水平,并对2组进行安全性评价。结果观察期间对照组、观察组分别脱落5、6例。观察组总有效率为88.0%(44/50),对照组为78.4%(40/51),2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后中医症状评分、WOMAC评分、VAS评分、压痛指数明显下降(P<0.05);2组治疗后比较,观察组上述各项评分均明显低于对照组(P<0.05)。与本组治疗前比较,2组治疗后血液流变学指标、血清炎症因子水平、骨代谢指标明显改善(P<0.05);2组治疗后比较,观察组上述实验室指标改善明显优于对照组(P<0.05)。2组均未见不良反应。结论清热逐风合剂联合西药及康复综合疗法能有效减轻KOA发作期风湿热痹证患者临床症状,控制血液流变学指标和炎症指标,改善骨代谢指标,提高疗效。

白虎桂枝汤加味灌肠治疗类风湿性关节炎风湿热痹证30例

目的:观察白虎桂枝汤加味灌肠治疗类风湿性关节炎风湿热痹证的临床疗效。方法:将60例类风湿性关节炎风湿热痹证患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组各30例,对照组给予雷公藤多苷片治疗,治疗组在对照组的基础上给予白虎桂枝汤加味灌肠治疗。结果:治疗组总有效率87%,对照组总有效率63%,治疗组优于对照组(p<0.05);两组症状、体征及实验室指标等方面比较,治疗组均优于对照组(P<0.05)。结论:白虎桂枝汤加味灌肠治疗类风湿性关节炎风湿热痹证疗效显著。

风湿热痹证从肝脾论治

根据中医理论结合临床经验 ,认为肝脾失调可导致风湿热痹的发生 ,情志因素可影响病情的发展 ,其主要病机为痰瘀阻络。提出疏肝清热、健脾除湿或平肝熄风、清热化湿 ,佐以活血化痰通络法治之。

桃红四物汤合二妙散治疗风湿热痹证

1 一般资料 本组30例均为住院病人,其中男13例,女17例;年龄30～60岁之间;病程最长者30年,最短者1年.患者四肢关节均有不同程度的灼热红肿、游走疼痛、关节屈伸障碍等,血沉、抗"O"检测均增高,其中类风湿因子阳性者3例.

当归拈痛汤加减内服外洗治疗膝骨性关节炎风湿热痹证的近期疗效观察研究

观察当归拈痛汤加减内服外洗治疗膝骨性关节炎风湿热痹证的近期疗效。方法:选取我院膝骨性关节炎风湿热痹证患者80例(2019年1月至2020年1月),随机分为当归拈痛汤加减内服外洗治疗的观察组(40例)与常规治疗的对照组(40例),观察治疗情况。结果:与对照组相比,观察组风湿热痹证评分低,治疗有效率高,P<0.05。结论:在膝骨性关节炎风湿热痹证患者治疗中,当归拈痛汤加减内服外洗治疗能提高治疗效果,有效改善患者症状,值得借鉴。

海洋中药厚藤水提物对风湿寒痹证和风湿热痹证大鼠足跖肿的作用研究

目的:探讨厚藤对风湿寒、热痹证大鼠足跖肿的作用,并初步探讨其作用机制。方法:取64只SD大鼠随机分为正常对照组、Ⅱ型胶原模型组、风湿寒痹组、风湿热痹组、风湿寒痹+厚藤13.5 g/kg组、风湿热痹+厚藤13.5 g/kg组、独活9.0 g/kg组、防己9.0 g/kg组,每组8只。采用天然牛II型胶原(CII)诱导加风湿寒、热环境因素刺激制备风湿寒、热痹证类风湿关节炎(RA)大鼠模型,造模结束后各给药组分别灌胃给予对应药液。实验中测量大鼠体质量、足跖肿胀度、关节炎指数评分;酶联免疫法测定各组大鼠血清中白细胞介素1β(1L-1β)、前列腺素E2(PGE2)水平;采用HE染色法,观察踝关节病理切片组织形态变化。结果:与正常对照组比较,Ⅱ型胶原模型组和风湿寒、热痹组大鼠足跖肿胀度、AI评分、血清1L-1β、PGE2水平显著升高(P<0.01);与风湿寒痹组比较,独活9.0 g/kg组、风湿寒痹+厚藤13.5 g/kg组大鼠足跖肿胀度、AI评分、血清1L-1β、PGE2水平均显著降低(P<0.01);与风湿热痹组比较,防己9.0 g/kg组、风湿热痹+厚藤13.5 g/kg组大鼠足跖肿胀度、AI评分、血清1L-1β、PGE2水平均显著降低(P<0.01),踝关节病理学显示,各给药组踝关节炎症细胞浸润、软骨及骨破坏减轻。结论:海洋中药厚藤水提物对风湿寒、热痹大鼠均具有一定的治疗作用,其抗炎作用机制可能与降低血清1L-1β、PGE2水平,减轻关节软骨破坏有关。

当归拈痛汤治疗风湿热痹型膝关节骨性关节炎的临床观察

膝关节骨性关节炎（knee joint osteoarthritis,KOA）是临床骨科较为常见的一种膝关节病变,以中老年人群为主要发病群。早期症状主要是膝关节肿胀、疼痛、活动受限,发展到晚期则可能造成关节畸形、僵硬,严重者可致膝关节功能完全丧失,给患者的健康和生活带来极大影响。

黄芪桂枝汤治疗风湿痹证

目的探讨黄芪桂枝汤对于风湿痹证的治疗效果。方法对60例风湿热痹证患者通过加减黄芪桂枝汤进行治疗,比较疗效。结果 8名治愈,治愈率为13.3%;好转48例,为80%;未愈4例,为6.7%;总有效率为93.3%。结论黄芪桂枝四物汤治疗对于风湿热痹证有显著的治疗效果,具有扶正祛邪、标本兼治的特点。

基于16S rDNA测序研究当归拈痛汤对风湿热痹佐剂性关节炎大鼠肠道菌群的影响

目的:从肠道菌群变化研究当归拈痛汤治疗风湿热痹佐剂性关节炎(AA)大鼠的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为6组:正常组、风湿热痹模型组(FSR组)、当归拈痛汤(DGNTT)低、中、高剂量组(5.67、11.34、22.68 g·kg^(-1)),甲氨蝶呤组(MTX,1.35 mg·kg^(-1)),每组10只,除正常组外,其余各组均注射灭活结核分支杆菌(Mtb)佐剂进行免疫,置于风湿热环境的人工气候箱中进行64 h干预造模。初次免疫当天起,给予大鼠灌胃给药,连续灌胃28 d。对大鼠进行关节炎指数(AI)检测,使用足趾容积测量仪检测大鼠足趾容积变化及苏木素-伊红(HE)染色观察膝关节滑膜组织形态改变,并且采用16S rDNA高通量基因测序法分析给药治疗前后大鼠的肠道菌群变化。结果:当归拈痛汤能够减轻风湿热痹证AA大鼠滑膜组织增生和炎症程度及血管翳形成,并且16S rDNA测序结果显示,与正常组比较,FSR组厚壁菌门、乳酸杆菌属、普雷沃氏菌属9、拟普雷沃氏菌属的相对丰度明显降低(P<0.05,P<0.01),拟杆菌门、拟杆菌属的相对丰度显著升高(P<0.01);与FSR组比较,当归拈痛汤各剂量组和MTX组中乳酸杆菌属均明显升高(P<0.05,P<0.01),拟杆菌门显著降低(P<0.01),当归拈痛汤中、高剂量组和MTX组中厚壁菌门、普雷沃氏菌属9、拟普雷沃氏菌属显著增加,拟杆菌属明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Spearman相关性分析显示,拟杆菌属、螺杆菌属与AI呈正相关(P<0.05),普雷沃氏菌属9、候选单胞生糖菌属与AI呈负相关(P<0.05,P<0.01);普雷沃氏菌属9与足趾容积呈负相关(P<0.01);瘤胃球菌科NK4A214群、克里斯滕森菌科R-7、拟杆菌属与脾脏指数呈正相关(P<0.05),普雷沃氏菌属9与脾脏指数呈负相关(P<0.01)。结论:当归拈痛汤治疗风湿热痹类风湿关节炎具有明显疗效,能够改善AA大鼠菌群结构,提升益生菌的丰度,抑制致病菌生长,促使肠道菌群恢复至正常水平,其作用机制可能与改善肠道免疫代谢功能,维持肠道稳态相关。

基于定量蛋白质组学研究当归拈痛汤对风湿热痹佐剂性关节炎大鼠的作用机制

目的:应用定量蛋白质组学研究当归拈痛汤对风湿热痹佐剂性关节炎(AA)大鼠的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、当归拈痛汤低、中、高剂量组及甲氨蝶呤(MTX)组,每组10只,大鼠尾根部皮下注射灭活结核分支杆菌佐剂(Mtb)进行AA的造模,人工气候箱干预16 d建立风湿热痹证模型,造模当天开始给药干预,持续干预28 d。提取大鼠滑膜组织蛋白质,使用4D非标记定量(4D-LFQ)蛋白质组学研究当归拈痛汤中剂量组与风湿热痹证模型组之间的差异蛋白情况,采用免疫组化及蛋白免疫印迹法(Western blot)验证与线粒体途径细胞凋亡相关的差异蛋白。结果:从滑膜组织中检测出4756个蛋白质,其中4234个蛋白质包含定量信息。当归拈痛汤与模型组差异蛋白为814个。基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析显示,当归拈痛汤对风湿热痹证AA大鼠的滑膜蛋白质组确有影响,且差异蛋白集中在对免疫系统的调控、急性炎症的反应和凋亡水平的调节。免疫组织化学与蛋白免疫印迹法验证发现,与模型组比较,当归拈痛汤各剂量组及MTX组滑膜组织中B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)及细胞色素C(Cyt C)蛋白表达水平明显升高(P<0.05,P<0.01),Bcl-2的表达水平明显下降(P<0.05,P<0.01),剪切型胱天蛋白酶-9(cleaved Caspase-9)/胱天蛋白酶-9(Caspase-9)显著升高(P<0.01),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)/蛋白激酶B(Akt)明显下降(P<0.05,P<0.01)。结论:当归拈痛汤对风湿热痹证类风湿关节炎的治疗涉及多靶点,其可能通过调节Akt/Bax/Bcl-2通路,促进线粒体途径细胞凋亡,从而发挥其对风湿热痹证类风湿关节炎的防治作用。

膝关节骨性关节炎中医证候分型与血清中MDA、SOD、NO含量相关性研究

目的:探讨膝关节骨性关节炎(knee osteoarthritis,KOA)中医证候分型与患者血清中丙二醛(maledic diadehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、硝酸还原酶法测定一氧化氮(nitric Oxide,NO)含量之间的相互关系。方法:将符合KOA诊断标准的96例患者按中医学证候分型标准分为风湿热痹证组30例,风寒湿痹证组24例,肝肾亏虚证组24例和瘀血痹阻证组18例。抽取各组对象的晨起空腹血液,硫代巴比妥法测MDA,黄嘌呤氧化酶法测定SOD,硝酸还原酶法测定NO。结果:各证型MDA含量比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。风湿热痹证组和风寒湿痹证SOD值低于肝肾亏虚证组,差异具有统计学意义(P<0.05)。NO含量和风湿热痹证组、风寒湿痹证组及瘀血痹阻证组NO含量低于肝肾亏虚证组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:KOA患者血清中MDA、SOD、NO的含量变化为反应自由基变化情况指标和反应软骨细胞凋亡的相关指标,可以作为中医膝关节骨性关节炎宏观辨证分型的依据。