亲和ELISA法和溶血带形分析法对风疹病毒疫苗免疫后抗体IgG亲和力成熟变化的研究

风疹疫苗免疫后抗体成熟变化采用两种方法研究，亲和力—酶联免疫吸附（Avidity—ELISA）定量试验法以抗原洗提特征来区分风疹病毒的初次感染和以往已感染；溶血带形分析法（半定量分析法），在放射状溶血试验中，以溶血带形的差异来区分风疹—IgG抗体亲和力的高低。用上述二法对两株（Cendhill或RA27／3）减毒风疹病毒免疫接种前后所采集的血清作了研究，发现初次免疫接种风疹病毒后头2月中合成的IgG，其亲和力极低；随后4个月中合成的亲和力明显上升；在免疫后第6～12个月中合成的IgG，其亲和力不明显。与此相反，以往接受过免疫接种者，其IgG亲和力一直维持起始的高水平。这些结果提示判断风疹病毒的近期初次感染或免疫疫苗的接种反应的依据，特异IgG亲和力也可将其与风疹病毒再感染相区别。

BRD-Ⅱ风疹病毒疫苗株的连续传代及其基因稳定性

目的观察上海生物制品研究所有限责任公司BRD-Ⅱ风疹病毒株(S-BRD-Ⅱ株)在MRC-5细胞中连续传代的基因稳定性,并比较该毒株与其他上市风疹毒株E1基因的差异。方法将S-BRD-Ⅱ株病毒在MRC-5细胞中连续传10代,检测每代病毒的培养特性和E1基因序列,第28、29、33和38代病毒的ORF序列及第28、38代病毒的5′-和3′-末端序列,同时测定B-BRD-Ⅱ株(北京天坛)及进口疫苗风疹病毒株(RA 27/3)E1基因,并对各基因的核苷酸及其相应的氨基酸序列进行分析。结果 S-BRD-Ⅱ株病毒在MRC-5细胞上连续传10代,其培养特性、细胞病变(CPE)程度及病毒滴度基本稳定,S-BRD-Ⅱ株病毒E1基因未发生变异,与Gen Bank中登录的BRD-Ⅱ株比较,有一个特异性的沉默突变,与RA 27/3疫苗株病毒比较,有122个核苷酸位点及其相应6个氨基酸发生突变。第28、29、33、38代S-BRD-Ⅱ株病毒的ORFⅠ和ORFⅡ基因区域与Gen Bank登录的BRD-Ⅱ株病毒比较,有5个位点发生变异,且P150非结构蛋白编码区域基因出现大片缺失。第28和38代S-BRD-Ⅱ株病毒的5′-末端与Gen Bank中登录的BRD-Ⅱ株序列的5′-末端一致,而3′-末端有一个氨基酸发生突变。结论 BRD-Ⅱ风疹病毒疫苗株在MRC-5细胞中具有良好的传代稳定性,所有上市风疹病毒株的E1基因氨基酸序列差异不大。

风疹病毒减毒活疫苗猴体神经毒力试验

目的评价风疹病毒减毒活疫苗的潜在神经毒力。方法普通级恒河猴随机分为2组,风疹病毒减毒活疫苗组10只,对照组2只,采用猴脑定位的方法将风疹病毒减毒活疫苗接种于猴两侧丘脑,对照组接种等体积生理盐水;检测血清抗体效价;并观察动物是否产生抽搐、癫痫、共济失调、震颤等神经毒力症状,以及风疹病毒减毒活疫苗对一般体征、饮食、体温的影响;风疹病毒减毒活疫苗组疫苗接种后20 d、对照组接种后31 d进行脑部及脊髓大体解剖和组织病理学检查,以评价该疫苗的神经毒力。结果猴丘脑注射疫苗后,风疹病毒减毒活疫苗组动物血清抗体效价呈阳性,免疫应答较好,对照组均呈阴性;动物未出现情绪激怒、呕吐、颈强直、抽风惊厥等神经毒力症状;动物外观、行为活动、饮食情况、体温等各方面均未见明显异常;组织病理学检查未见药物引起脑及脊髓的明显病理学改变。结论风疹病毒减毒活疫苗在猴体中不具有神经毒力。