增食欲素受体2在哺乳仔猪空肠中的表达规律

采食状况是影响猪早期生长发育的一个主要因素。增食欲素在调节食欲上具有重要作用,但其发挥作用的前提是必须与其受体结合。为研究增食欲素受体2(HCRTR2)在哺乳仔猪肠道是否表达及其表达规律,本研究采用实时荧光定量PCR方法,检测其在0、3、8、14、21日龄大约克仔猪空肠中的表达。结果表明:HCRTR2能在哺乳仔猪空肠中表达,与0日龄相比,HCRTR2在3、8、14、21日龄表达水平均明显上升,其中在3日龄的表达量达到最高水平,而后逐渐下降趋于平稳状态,增加幅度分别为5.2、3.5、2.9、2.7倍。这表明HCRTR2在哺乳仔猪空肠中有表达,且在3日龄达到高峰。据此可以推测,该基因在仔猪肠道生长发育过程中具有调节作用。

不同蛋白源饲粮下断奶仔猪小肠中增食欲素受体2的表达特征

为探讨不同蛋白源饲粮对断奶仔猪小肠中增食欲素受体2(HCRTR2)的表达特征,研究采用实时荧光定量PCR方法检测HCRTR2的mRNA在断奶后分别饲喂动物蛋白替代30%总蛋白饲粮(处理1)及全植物性蛋白饲粮(处理2)0、3、7、14日龄大约克猪空肠中的表达特征。结果表明,不同蛋白源饲粮对HCRTR2基因mRNA的表达均有影响;与断奶0日龄相比,在处理1中,断奶3、7和14日龄时,HCRTR2的表达分别上升了4.30、6.60和4.12倍;处理2中,断奶3、7、14日龄HCRTR2基因mRNA的表达量分别为断奶0日龄时的0.71、1.44和4.50倍。结论:不同蛋白源饲粮对HCRTR2基因mRNA的表达均有影响。

鹅食欲素及其受体2基因克隆、序列和组织表达分析

旨在根据GenBank公布的人、原鸡、绿头鸭等物种HCRT和HCRTR2基因序列设计特异性引物克隆扩增鹅HCRT和HCRTR2基因编码区序列,并进行生物信息学分析;同时应用RT-qPCR技术检测HCRT和HCRTR2mRNA在四川白鹅19个组织中的表达情况。成功获得鹅HCRT和HCRTR2基因完整编码区序列,分别为456,1506bp,各自编码151,501个氨基酸。其中,HCRT基因编码的前体食欲素蛋白水解后可产生OXA和OXB2种多肽;序列分析表明,鹅OXA和OXB分别为含34,28个氨基酸的残留肽。序列比对结果显示,鹅OXA、OXB和HCRTR2氨基酸序列在近源物种间呈高度保守,提示OXA、OXB和HCRTR2可能在物种的进化中扮演着重要的角色;但各物种间食欲素蛋白的信号肽保守性较低,暗示其信号肽序列可能对于各物种的功能特性具有重要的意义。进化树分析表明,HCRT和HCRTR2两者进化较为相似,其中,鹅与鸡的亲缘关系最近,而与斑马鱼的亲缘关系最远。RT-qPCR结果显示,鹅HCRT和HCRTR2基因在下丘脑中的表达量均达到最高,且在其他组织中也有不同程度的表达,推测食欲素系统可能通过下丘脑-垂体-性腺轴(HPG)参与动物生殖机能的调节。为进一步研究HCRT和HCRTR2基因在鹅繁殖活动中的作用奠定了基础。

食欲素改善大鼠抑郁样行为及其受体机制研究

目的探讨食欲素对抑郁症模型大鼠抑郁样行为的影响及其受体机制。方法将70只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(A组),模型组(B组),食欲素低、中、高剂量组(C1组,C2组,C3组),食欲素+食欲素1型受体阻断剂组(D组),食欲素+食欲素2型受体阻断剂组(E组),每组10只。A组大鼠正常饲养,B组与C1组、C2组、C3组、D组、E组动物孤养结合慢性应激刺激构建抑郁症大鼠模型。建模成功后,C1组、C2组和C3组分别侧脑室给予10,50,100μg/kg食欲素,D组侧脑室给予100μg/kg食欲素和15 mg/kg食欲素1型受体阻断剂,E组侧脑室给予100μg/kg食欲素和15 mg/kg食欲素2型受体阻断剂,A组和B组给予等量生理盐水,每天1次,均连续给药1周。通过体质量变化、旷场试验及糖水偏好试验检测模型大鼠抑郁样行为的变化,以及Morris水迷宫检测大鼠学习记忆功能的变化进行行为学检测。结果与B组比较,C组大鼠体质量增加、自主活动和糖水偏爱率显著增加,Morris水迷宫中的学习记忆能力显著改善(P <0. 05),且具有浓度依赖性;D组大鼠给予食欲素1型受体阻断剂后,食欲素不能改善模型大鼠的抑郁样行为及学习记忆能力(P>0. 05);但E组大鼠给予食欲素2型受体阻断剂后,食欲素仍能改善抑郁样行为和学习记忆能力(P <0. 05)。结论食欲素可能通过激活1型受体改善抑郁模型大鼠的抑郁样行为和学习记忆能力。

左归丸对去卵巢大鼠下丘脑Orexin及其受体mRNA表达的影响

目的:观察去卵巢骨质疏松症大鼠下丘脑食欲素(Orexin)及其受体mRNA水平,探讨绝经后骨质疏松症(PMOP)的发病机制以及左归丸的作用机制。方法:去势法建立骨质疏松症模型,32只雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇组和左归丸组,每组8只。灌胃给药12周后,通过显微CT(μ-CT)检测股骨骨密度(BMD)和骨小梁微观三维形态结构,苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠骨组织形态学变化,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠血清骨转换标志物骨钙素(OCN),I型前胶原氨基端前肽(PINP),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠下丘脑Orexin,食欲素受体1(OX1R)和食欲素受体2(OX2R) mRNA表达水平。结果:与假手术组比较,μ-CT示模型组大鼠BMD,骨体积分数(BV/TV),骨小梁厚度(Tb. Th)和骨小梁数量(Tb. N)显著下降(P <0. 01)而骨小梁间隙(Tb. Sp)升高(P <0. 01),骨小梁明显稀疏,间距加宽,结构出现较大的空白区域;HE染色示骨小梁明显稀少,结构不完整,排列疏松,间距变宽;ELISA示血清OCN,PINP含量降低,TRAP含量升高(P <0. 01);下丘脑Orexin,OX1R,OX2R mRNA表达下调(P <0. 01)。经左归丸治疗后,大鼠BMD,BV/TV,Tb. Th,Tb. N升高(P <0. 05,P <0. 01),Tb. Sp降低(P <0. 01),骨小梁变密,空隙率下降,分布均匀,排列尚可,微观结构明显改善;血清OCN,PINP含量增加(P <0. 05,P <0. 01)而TRAP含量降低(P <0. 01);下丘脑Orexin,OX1R,OX2R mRNA表达明显上调(P <0. 05,P <0. 01)。结论:下丘脑Orexin及其受体mRNA水平降低可能是PMOP发病的机制之一。左归丸可通过上调下丘脑Orexin及其受体mRNA表达,从而纠正骨代谢失衡,改善骨小梁微结构,提高骨密度,发挥治疗PMOP的作用。