Chelex100法从贮存食管拉网脱落细胞涂片中提取DNA并作PCR分析的应用和意义

目的 探讨从贮存 2 0年的食管拉网脱落细胞涂片的微量细胞中抽提DNA的方法和可行性 ;比较p5 3基因在正常食管上皮和重度不典型增生上皮中的突变差异。方法 利用螯合型离子交换树脂Chelex10 0作为介质 ,一步法从食管拉网脱落细胞中提取用作PCR分析的DNA ,共提取食管正常上皮与重度不典型增生上皮细胞涂片各 2 4例 ,采用PCR SSCP分析法进行p5 3基因第 7外显子的突变检测。结果 所有 48例标本中微量细胞的DNA抽提均获成功 ;正常食管组p5 3基因第 7外显子均未发生突变 ,重度不典型增生组 5例发生突变 ,其中 3例在 10年、12年、14年后转变为食管癌。结论 Chelex10 0法简便、高效 ,能从微量细胞中抽提DNA ,使对 2 0年前食管拉网细胞涂片进行分子水平的检测成为可能 ;p5 3基因第 7外显子的突变使食管上皮重度不典型增生细胞具有了癌变趋势。

食管拉网细胞学诊断172例近癌的随诊

目的 探讨食管癌前病变近癌的癌变危险度和细胞学整体疗效。方法 以细胞学诊断的 172例近癌为观察对象 ,随机分为治疗组和对照组 ,治疗组口服中药增生平 ,对照组服用安慰剂 ,服药 3 8个月做细胞学复查。疗效统计采用Ridit分析和RR。结果 RR =0 76,95 %CI=(0 2 4～ 2 44 )。Ridit=0 5 ,95 %CI =(0 3 7～ 0 62 )。结论 细胞学诊断的近癌RR高 。

食管拉网细胞端粒酶活性检测及临床应用研究

目的检测食管拉网细胞中端粒酶活性,探讨其在食管癌诊断及预后评判中的临床应用价值.方法30例食管拉网细胞标本均取自本院1998-09/1998-12住院患者.采用双腔网囊食管细胞采取器,收集脱落细胞,一部分做涂片固定,巴士染色细胞学诊断,另一部分细胞于PBS缓冲液中离心弃上清液,采用PCR-端粒重复序列扩增法检测端粒酶活性,检测时以肿瘤细胞K562作阳性对照,裂解缓冲液为阴性对照.30例食管癌患者均经手术后病理学证实.同时术后检测30例食管癌癌组织的端粒酶活性和14例癌旁正常食管粘膜组织的端粒酶活性.结果30例食管拉网标本中端粒酶活性阳性率为83.3%(25/30),相应癌组织的阳性率为96.7%(29/30).14例癌旁正常粘膜组织的阳性率为14.3%(2/14).食管拉网细胞学、癌组织与癌旁正常粘膜组织相比较,其端粒酶活性阳性率具有显著性差异(P<0.005).本组标本共30例,细胞学检查阳性18例,可疑阳性4例,阳性率为73.3%,小于食管拉网细胞学端粒酶活性检测的阳性率(83.3%),经统计学处理,两者之间无显著相关性(P<0.05).另外研究结果证实,食管拉网细胞端粒酶活性检测与各病理因素之间无差异.结论食管拉网细胞端粒酶活性检测结合细胞学检查将有助于食管癌的早期诊断.

283例食管拉网体会

食管拉网检查是食管癌、贲门癌的定性诊断方法之一。不仅能明确食管病变性质,而且能正确分出细胞学类型。本文对283例经x线诊断为食管癌的患者行拉网检查 上段27例、由段203例、下段53例。结果:阳性者241例。占95.6%鳞癌185例、腺癌47例、腺鳞癌4例,未分化癌5例其结果与文献报导相符。42例阴性组中,13例因管腔狭窄,网球不能通过呈阴性。阴性者于拉网后均行食管镜检查。证实13例狭窄者中有11例癌。1例平滑肌瘤1例炎症。余均为慢性非特异性炎症。通过本组结果看出,对早、中期食管癌有较高的诊断价值。对食管癌(?)°狭窄者,阳性率较低,配合食管镜检查,能进一步减少假阴性问题,更好的服务于临床。

X 线监视下低张力食管拉网在诊断食管癌中的应用研究

从１９９２年１０月至１９９５年４月，我们对５８例食管癌常规拉网检查失败者应用改进后的食管细胞采集器在Ｘ线监视下应用低张方法行食管拉网细胞学检查，一次拉网阳性者５６例，占９６．６％，２次阳性２例，占３．４％，总成攻率为１００％。我们认为本方法有以下优点：①改进后的细胞采取器能在Ｘ线下监视操作，准确定位，并能增加导管的硬度，它能通过不同程度食管病变的狭窄，因此提高了细胞学检查的阳性率。②低张力检查方法能扩张、展平食管粘膜，有助检查成功，能够发现早期病变。

食管癌70例内镜分析

从1983年～1993年9月,9610例病人中检出上消化道肿瘤234例(2.43％),其中食管癌70例,贲门癌18例,胃癌46例。本文将经病理或手术证实的食管癌70例内镜材料小结如下。 临床资料 一、一般资料:男61例,女9例,男女之比为6.78∶1,年龄33～88岁,平均年龄61.7岁,工人28例,干部7例,农民35例。 二。

C57BL/6小鼠食管鳞状细胞癌早期病变的形态学改变

目的:了解食管癌发生过程中的炎症改变.方法:采用100?g/mL的4NQO通过饮水作用于C57BL/6小鼠,分别通过食管拉网脱落细胞法、碘染色法及病理组织学观察第12、16、20、24周等时间段的C57BL/6小鼠食管鳞状细胞癌建模病理的改变.结果:食管拉网脱落细胞法、碘染色法均未观察到小鼠早期食管病变,在实验第12周,纵向解剖食管,通过病理组织学观察到食管上皮不典型增生,第16、20、24周分别观察到原位癌、浸润性鳞癌的发生,在整个肿瘤的发生、发展过程中伴随炎症细胞浸润.结论:食管拉网脱落细胞法、碘染色法不适用于C57BL/6小鼠食管鳞癌建模形态学观察,只能通过病理组织学才能够在不同的时间段观察到食管癌的发生、发展及其炎症改变过程.

食管细胞学检查3424例的临床分析

本文对3424例进行了食管拉网细胞学检查,发现细胞学阳性2616例,阳性率76.4％;其中1318例患者同时作了拉网细胞学检查和X线检查,并对这两种检查作了比较,拉网细胞学检查阳性率明显高于X线检查。在食管拉网细胞学检查的方法上我们进行了部分改进,采用连续两次拉网法及95％酒精洗涤网套沉淀法,从而使阳性率提高达87.5％。

食管鳞状细胞癌脾脏转移1例

患者女,63岁,因腹壁疝术后腹痛一月余,持续加重3天入院,于24年前曾患食管癌(河南林县医院食管拉网病理确诊),行放射治疗,“治愈”至今无症状。查体T36.5℃,P 80次/min,R 20次/min,Bp18/10kPa,左第9～11肋骨腋后线处变形。腹平坦,左腹壁有一约15cm线状瘢痕。左腹部触压痛,未触及包块肿物,肠鸣音弱,余正常,Hb110g/L,WBC6.0×10~9/L,

从贮存20年的微量细胞中提取DNA并做PCR分析的实验研究

目的:探讨从二十年前贮存的食管拉网微量细胞涂片中提取DNA并进行食管癌基因检测的方法和可行性,比较P53基因的突变在食管癌前期病变和正常食管上皮中的差异。方法:利用螯合型的离子交换树脂Chelex100作为介质,一步法从食管拉网脱落细胞提取DNA,应用PCR-SSCP方法和PCR-RFLP方法进行p53基因第5外显子及第7外显子的突变检测。结果:48例标本P53基因检测均获成功。食管上皮重度不典型增生细胞中发现有5例突变发生,均为p53基因第7外显子,而第5外显子未发现突变;正常食管鳞状上皮拉网脱落细胞中均未发现突变。检测到的5例突变中,其中有3例分别在10年、12年和14年后转变为食管癌。结论:Chelex100法能从微量细胞涂片中提取DNA,使对20年前食管拉网细胞涂片标本进行分子水平的检测成为可能。为食管癌前期病变的研究提供一种新的方法。p53基因的突变使食管上皮癌前期病变细胞具有了癌变趋势。

食管癌放疗后存活18年原部位复发一例

患者，女，７３岁。１９７６年３月因吞咽食物时胸背痛入林县肿瘤医院，食管钡透发现食管平主动脉弓处有约５ｃｍ长的充盈缺损，扩张度较差。经食管拉网检查，发现鳞癌细胞。患者因惧怕手术，给予６０Ｃｏ常规４野治疗，ＤＴ量达６０Ｇｙ后回家休息。半年后随访无异常。１...