Chelex100法从贮存食管拉网脱落细胞涂片中提取DNA并作PCR分析的应用和意义

目的 探讨从贮存 2 0年的食管拉网脱落细胞涂片的微量细胞中抽提DNA的方法和可行性 ;比较p5 3基因在正常食管上皮和重度不典型增生上皮中的突变差异。方法 利用螯合型离子交换树脂Chelex10 0作为介质 ,一步法从食管拉网脱落细胞中提取用作PCR分析的DNA ,共提取食管正常上皮与重度不典型增生上皮细胞涂片各 2 4例 ,采用PCR SSCP分析法进行p5 3基因第 7外显子的突变检测。结果 所有 48例标本中微量细胞的DNA抽提均获成功 ;正常食管组p5 3基因第 7外显子均未发生突变 ,重度不典型增生组 5例发生突变 ,其中 3例在 10年、12年、14年后转变为食管癌。结论 Chelex10 0法简便、高效 ,能从微量细胞中抽提DNA ,使对 2 0年前食管拉网细胞涂片进行分子水平的检测成为可能 ;p5 3基因第 7外显子的突变使食管上皮重度不典型增生细胞具有了癌变趋势。

C57BL/6小鼠食管鳞状细胞癌早期病变的形态学改变

目的:了解食管癌发生过程中的炎症改变.方法:采用100?g/mL的4NQO通过饮水作用于C57BL/6小鼠,分别通过食管拉网脱落细胞法、碘染色法及病理组织学观察第12、16、20、24周等时间段的C57BL/6小鼠食管鳞状细胞癌建模病理的改变.结果:食管拉网脱落细胞法、碘染色法均未观察到小鼠早期食管病变,在实验第12周,纵向解剖食管,通过病理组织学观察到食管上皮不典型增生,第16、20、24周分别观察到原位癌、浸润性鳞癌的发生,在整个肿瘤的发生、发展过程中伴随炎症细胞浸润.结论:食管拉网脱落细胞法、碘染色法不适用于C57BL/6小鼠食管鳞癌建模形态学观察,只能通过病理组织学才能够在不同的时间段观察到食管癌的发生、发展及其炎症改变过程.

食管脱落细胞学的研究

食管癌在我国许多地区均为多发病,对我省北部农村劳动人民威胁尤大,在中央和省领导的号召下,在河南医学院党委的指引下,我们于1959年,开始以林县为基地,进行食管癌的防治研究工作,食管脱落细胞学检查于1961年开始临床应用,至1962年底。