蛋白质半胱氨酸棕榈酰化在食管肿瘤免疫中的作用

蛋白质半胱氨酸棕榈酰化,或称为S-棕榈酰化,是蛋白质翻译后修饰的一种,近年来受到越来越多的关注。人体有数千种被修饰过的蛋白质,由于修饰的蛋白质数量众多,更加凸显了S-棕榈酰化的重要性。本文主要从食管肿瘤免疫学的角度介绍S-棕榈酰化的作用,讨论了几个重要的免疫信号传导通路,包括S-棕榈酰化对蛋白质的作用、吞噬调节作用、细胞因子受体介导的信号传导、凋亡信号的调控等。本文着重强调了棕榈酰化在调节食管肿瘤免疫信号传导中的通用性,同时也是对于靶向棕榈酰化治疗食管肿瘤潜力的探讨。

L-精氨酸联合整蛋白复方制剂对食管癌根治术后患者免疫功能及肿瘤标志物水平的影响

【目的】探讨L-精氨酸联合整蛋白复方制剂对食管癌根治术后患者免疫功能及肿瘤标志物水平的影响。【方法】在本院行食管癌根治术的98例患者,随机分为观察组与对照组,每组各49例。观察组患者在术后接受L-精氨酸联合整蛋白复方制剂治疗,对照组患者在术后给予葡萄糖盐水肠内营养。比较两组患者治疗前后的T淋巴细胞亚群(CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)、糖类抗原125(CA125)、细胞角蛋白19血清片段21-1(CYFRA21-1)、白蛋白(ALB)、前白蛋白(PA)、转铁蛋白(TRF)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、丙氨酰氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)水平。【结果】两组治疗后CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著高于治疗前,CD8^(+)显著低于治疗前(P<0.05),观察组治疗后CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著高于对照组,CD8^(+)显著低于对照组(P<0.05);两组治疗后CEA、CA19-9、CYFRA21-1、CA125显著低于治疗前,且观察组显著低于对照组(P<0.05);两组治疗后ALB、PA、TRF显著高于治疗前,且观察组显著高于对照组(P<0.05);两组治疗前、治疗后及治疗前后BUN、Scr、ALT、AST比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。【结论】L-精氨酸联合整蛋白复方制剂可改善食管癌根治术后患者的营养状态和免疫功能,降低肿瘤标志物水平。

含不同脂肪乳剂全肠外营养对食管癌患者术后免疫功能的影响

目的:探讨含克林诺脂肪乳剂的全肠外营养(TPN)及含中长链脂肪乳剂的TPN对食管癌患者术后免疫功能的影响。方法:43例食管癌手术患者随机分成两组,一组术后给予7d以上的含脂肪乳剂克林诺的TPN,另外一组则给予7d以上含中长链脂肪乳剂中长链脂肪乳的TPN。检测各患者术前1d,术后1d,术后8d免疫球蛋白5项及淋巴细胞计数及亚群,采用t检验或秩和检验进行统计学分析。结果:两组患者术后第1d的淋巴细胞、IgA、IgG、IgM、CD8+等较术前1d均有明显下降;术后8d的IgA、IgG、IgM、C3等较术后1d均有明显上升;术后8d和术后1d的变化两组间相比,克林诺组IgG升高更明显;术后8d和术前1d的变化两组间相比,克林诺组的IgG,IgM较术前升高更明显。结论:手术明显降低食管癌患者机体的细胞免疫和体液免疫功能;行7d的含脂肪乳剂的TPN可明显的促进食管癌患者体液免疫功能恢复,而对细胞免疫无影响;与中长链脂肪乳相比,含克林诺的TPN可能更有利于促进食管癌患者术后机体免疫功能的恢复。

术后肠内外营养支持对食管癌患者免疫力与炎性反应的影响

目的探讨在食管癌术后采用肠内外营养支持对患者免疫力与炎性反应的影响。方法将106例食管癌术后患者按照随机数字表法随机分为对照组与观察组,每组各53例,对照组给予单纯肠内营养支持,观察组给予肠内外营养支持措施,比较两组营养支持前和支持后营养、免疫和炎性指标变化情况。结果观察组术后7 d转铁蛋白(transferrin,TRF)与前白蛋白(prealbumin,PAB)水平均高于对照组,白介素-6(interleukin-6,IL-6)、C反应蛋白(C reactive protein,CRP)与肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)均低于对照组(均P<0.05)。观察组术后7 d、14 d与3个月的免疫球蛋白A(immunoglobulin A,IgA)、 IgM、 IgG、 CD_3^+、 CD_4^+与CD_4^+/CD_8^+均高于对照组(均P<0.05)。观察组术后恶心、腹泻、肺不张、睡眠障碍与低钾血症发生率均低于对照组(均P<0.05)。结论肠内外营养支持方式有利于改善食管癌手术患者的营养状态,提高机体免疫功能,并降低炎性反应。

早期空肠管饲营养对食管癌术后患者机体免疫功能的影响

目的：研究食管癌术后早期空肠管饲营养对机体免疫功能及炎症反应的影响。方法：58例食管癌患者随机分为早期空肠管饲营养（EJTN）组和传统肠内营养（TEN）组，每组29例。EJTN组在术后6h行营养支持，TEN组按传统方法，术后禁食，待肛门排气后经口腔进食。分别于术前1d及术后第1天和第8天取外周血检测IgA、IgG,IgM、CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋、NK细胞活性等免疫指标及炎症介质TNF—α和IL-2。结果：术后8d EJTN组IgA、IgG,IgM及CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋、NK细胞活性明显回升，CD8^＋则回落至正常水平，而TEN组CD8^＋仍处于高水平，其余指标处于较低水平，两组间有显著差异（P〈0．05～0．01）。炎症介质TNF-α在术后第8天明显低于TEN组（P〈0．05），而IL-2两组间无显著差异（P〉0．05）。结论：早期空肠管饲营养可提高食管癌术后患者机体免疫功能并减轻炎症反应的程度。

食管癌组织STRBP8基因克隆及其生物信息学分析

目的:克隆食管癌组织核基质蛋白类视网膜母细胞瘤结合蛋白8(STRBP8)CDS编码序列,为建立其免疫学检测技术奠定基础。方法:从GenBank中获取STRBP8的基因序列,并根据其CDS区序列设计全长引物。利用Trizol法从食管癌组织中提取总RNA,通过逆转录获取STRBP8的cDNA,再利用梯度升温PCR方法对目标基因进行扩增。结果:本实验成功从食管癌组织中克隆出STRBP8的CDS序列。结论:STRBP8在食管癌组织均存在表达,为下一步建立其免疫学检测技术打下基础。

佛波酯对食管癌EC9706细胞NDRG_1表达及细胞增殖影响的研究

目的:探讨12-氧-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA)作用于食管癌细胞EC9706后,对NDRG1mRNA表达、细胞增殖、细胞周期的影响。方法:采用50nmol/L的TPA作用于EC9706细胞,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期的变化,原位杂交法检测NDRG1mRNA水平。结果:TPA能上调NDRG1mRNA水平,抑制EC9706细胞增殖,细胞周期发生G1→S期阻滞。结论:TPA可能通过上调NDRG1mRNA的表达而抑制EC9706增殖,促进其分化。

CD133在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的:研究食管鳞状细胞癌组织中CD133的表达与肿瘤细胞增殖及侵袭转移的关系。方法:取40例食管鳞状细胞癌患者的组织石蜡标本,用免疫组化方法检测CD133的表达,同时检测Ki67的表达,分析探讨CD133表达与食管鳞状细胞癌临床病理因素的相关性。结果:肿瘤组织中CD133及Ki67的表达率均较癌旁组织高,且CD133的表达与肿瘤的侵润深度、淋巴结转移情况及分化程度呈正相关,同时CD133的表达与患者术后远期生存率具有相关性。但CD133与Ki67的表达情况无显著相关性。结论:食管鳞状细胞癌组织中,CD133的表达与肿瘤细胞的增殖、侵袭及转移具有相关性,可以成为评价食管癌鳞状细胞癌肿瘤生物学特性及判断预后的的指标。

食管鳞癌组织sPLA2-Ⅱa基因的表达及其与临床病理因素的关系

目的:探讨sPLA 2-Ⅱa基因在食管鳞癌中的表达及其与鳞癌的发生、发展、转移之间的关系。方法:采用免疫组化SP法及RT-PCR法检测56例正常食管粘膜组织、20例癌旁不典型增生组织及56例食管鳞癌组织中sPLA 2-Ⅱa蛋白的表达及mRNA的相对含量。结果:在正常食管粘膜组织、癌旁不典型增生组织及食管鳞癌组织中sPLA 2-Ⅱa蛋白的阳性表达率及mRNA相对表达量逐次升高,分别为23.2%、55.0%、85.7%及0.303±0.020、0.534±0.015、0.766±0.045,其差异均具有统计学意义。不同性别的食管鳞癌之间蛋白的表达率及mRNA相对表达量分别为67.6%、86.3%及0.706±0.012、0.773±0.035,其差异均无统计学意义。不同临床分级的食管鳞癌之间蛋白的表达率及mRNA相对表达量分别为83.3%、85.7%、87.5%及0.758±0.043、0.763±0.035、0.774±0.031,差异无统计学意义。有淋巴转移组与无淋巴转移组的食管鳞癌之间蛋白表达率及mRNA相对表达量分别为86.4%,88.2%及0.751±0.025,0.763±0.037,差异无统计学意义。结论:食管鳞癌组织中sPLA 2-Ⅱa表达量升高,其高表达可能与食管鳞癌的发生有关。

KAI1基因在食管癌组织中的表达及其意义

目的:探讨KA I l基因的表达与食管癌发生及浸润转移的关系。方法:采用RT-PCR及免疫组化方法,检测食管癌组织及其正常粘膜中KA I lmRNA及蛋白的表达。结果:KA I lmRNA的表达在食管癌组织和其正常粘膜中未见显著性差异,且与肿瘤的分化程度、浸润深度及淋巴结转移无关;KA I l蛋白在癌组织中的表达明显低于其正常粘膜,在有淋巴结转移病例中的表达明显低于无淋巴结转移病例,但与肿瘤的分化程度、浸润深度无关。结论:食管癌癌变和转移可能与KM I1蛋白的低表达有关,但与KA I lmRNA的表达无关,推测这可能是由于翻译后修饰所致。

Cathepsin B反义寡核苷酸对食管癌EC9706细胞中CB mRNA表达的影响

目的:探讨组织蛋白酶B(CB)反义寡核苷酸(ASODN)对CB mRNA表达的影响。方法:将食管癌EC9706细胞分5组培养,5组分别用设计合成的3条封闭CB不同基因位点的反义寡核苷酸(ASODN1、ASODN2、ASODN3)及1条无关寡核苷酸(N-ODN)转染,另1组不转染(空白对照组)。采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中CB mRNA表达情况。结果:3条CB ASODNs转染的EC9706细胞中CB mRNA表达均下调,差异无统计学意义,但均明显低于N-ODN组及空白对照组。结论:CB ASODN可抑制食管癌EC9706细胞中CB mRNA表达,为临床预防食管癌等恶性肿瘤浸润转移奠定理论了基础。

乙酰肝素酶、碱性成纤维细胞生长因子与食管癌血管生成及转移的关系

目的:探讨乙酰肝素酶(Heparanase,Hps)、碱性成纤维细胞生长因子(Basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)在食管癌中的表达及其意义。方法:应用免疫组化S-P法检测51例食管癌组织及12例癌旁组织中Hps及bFGF的表达及间质微血管密度(microvesseldensity,MVD)。结果:Hps,bFGF食管癌中的表达高于正常食管组织(P<0.05),且Hps,bFGF的表达与食管癌的浸润深度、淋巴结转移情况及临床分期显著相关(P<0.05)。结论:本研究结果表明Hps,bFGF协同表达对血管生成、食管癌的侵入转移起到关键性的作用、其作为食管癌治疗中的一个新靶点对治疗及预后有相当好的理论价值。

食管癌术前大剂量短程放疗的临床应用

目的观察分析在食管癌术前施以大剂量、短程放疗所产生的治疗作用．方法在食管癌术前，采用60Co为照射源，以瘤体中心为基准，沿食管长轴设15cm×8cm两对穿野，每野给以1000cGy～1500cGy／5次，其肿瘤量在1200cGy～1700cGy之间，放疗期间不间断，放疗结束后施以手术治疗．放疗前后检测患者体内sIL2R,α-TNF，T细胞正群、NK细胞等各项免疫指标，术后取患者瘤体做肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）分析，并做术后病理切片分析，同时设对照组以对照观察．结果通过对比分析观察，放疗对患者症状改善不明显，但患者血清中sIL－2R含量上升，α－TNF含量下降均较明显．放疗组患者术后TIL细胞获得数明显高于对照组，且CD4／CD8比值增高，病理切片上亦发现放疗使瘤体内有核细胞浸润明显增加．结论术前大剂量短程放疗，可以让患者在术前短时间内接受到大剂量的放射治疗，起到减少瘤体外侵，提高根治水平的作用，在不影响手术的前提下，改善患者体内免疫条件，为术后过继免疫治疗提供良好的细胞来源，以达到提高术后生存率的目的．

胸腹腔镜联合根治术治疗老年食管癌患者的临床疗效及对免疫功能的影响

目的探索胸腹腔镜联合根治术治疗老年食管癌患者的临床疗效及对免疫功能的影响。方法回顾性分析自2013年8月至2015年5月北京中医药大学东直门医院收治的老年食管癌患者102例，按照手术方式将患者分为对照组和观察组，每组51例。对照组患者行传统食管癌根治手术，观察组患者行胸腹腔镜联合根治术。观察两组患者术中及术后的各项指标，并于患者出院后1年进行随访，统计分析患者生存率、并发症发生率、复发率及生活质量。应用流式细胞术检测患者外周血T细胞群（CD4＋、CD8＋）及NK细胞含量。结果观察组患者手术时间、术中失血量及切口总长度均明显低于对照组患者（P〈0.05）；观察组患者清扫淋巴结数量多于对照组，但差异无统计学意义（P〉0.05）。观察组患者术后胸腔引流量、术后镇痛时间、术后拔管时间、住院时间明显优于对照组（P〈0.05）；观察组患者的生存率及生活质量评分显著高于对照组（P〈0.05），而并发症发生率及复发率明显低于对照组（P〈0.05）。两组患者术前T细胞亚群及NK细胞之间的差异无统计学意义（P〉0.05）；术后7 d两组患者的CD4＋、CD4＋/CD8＋及NK细胞含量均明显低于术前，且观察组患者的CD4＋、CD4＋/CD8＋及NK细胞含量明显高于对照组，差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论相比传统手术，胸腹腔镜联合根治术治疗老年食管癌具有良好的临床疗效，有利于患者术后的恢复，并降低并发症的发生率，提高患者的生活质量，另外还可以降低对免疫系统的抑制作用，值得临床推广应用。

右美托咪定对颈吻食管癌手术患者应激反应及免疫功能的影响

目的探讨右美托咪定对颈吻食管癌手术患者应激反应及免疫功能的影响,分析其可能的作用机制。方法选择2015年1月至2015年12月本院收治的颈吻食管癌手术患者86例为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组各43例,对照组给予咪达唑仑麻醉诱导与维持,观察组给予右美托咪定麻醉诱导与维持,比较两组麻醉相关指标、应激反应指标、细胞免疫功能。结果观察组清醒时间、拔管时间、芬太尼用量、术后吗啡用量明显少于对照组(P<0.05);术毕(T_1)、术后24 h(T_2),观察组血清丙二醛(MDA)水平明显低于对照组,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)水平明显高于对照组(P<0.05),CD3^+、CD4^+、CD4/CD8明显高于对照组,CD8^+水平明显低于对照组(P<0.05)。结论右美托咪定有助于减轻颈吻食管癌手术患者疼痛程度,可能与缓解应激反应、降低免疫功能抑制等因素有关。

食管、贲门癌患者术前术后细胞免疫变化及意义

目的 探讨食管癌贲门癌术前,术后免疫指标变化及其临床意义.方法 用流式细胞术定量检测55例患者外周血T淋巴细胞亚群,NK细胞及WBC术前,术后不同时期动态变化,并进行统计学分析.结果 (1)术后第8天患者T淋巴细胞亚群有所恢复,CD3、CD4、CD4/CD8增加,CD8减少,NK细胞增高(P<0.01);(2)术后2 d WBC值与术后8 d CD3、CD4、CD8值有相关性;(3)中晚期患者较早期患者CD3、CD4、CD4/CD8减少,CD8、NK增加(P<0.05);(4)有淋巴结转移患者较无淋巴结转移患者CD3、CD4、CD4/CD8减少,NK增加(P<0.05).结论 (1)术后患者免疫功能有所恢复.(2)术后炎症感染对患者免疫功能有刺激作用,可能为患者免疫功能增强起一定作用.(3)中晚期患者较早期患者免疫功能有明显下降.(4)有淋巴结转移患者较无淋巴结转移患者免疫功能有明下降.(5)手术是治疗食管癌贲门癌有效措施.

Expression of G3BP and RhoC in esophageal squamous carcinoma and their effect on prognosis

AIM: To investigate the expression and significance of G3BP and RhoC proteins in esophageal squamous carcinoma (ESC). METHODS: The expression of G3BP and Rhoc proteins in 80 cases of ESC was detected by immunohistochemistry. The relationship was studied between the expression of the two proteins and tumor size, differentiation degree, TNM stage, lymph node metastasis and prognosis of ESC. RESULTS: The positive expression rate of G3BP in ESC was 71.25%; and the rate in the lymph node metastasis group was significantly higher than that in the non- lymph node metastasis group (Z = -2.283, P = 0.022), but no relations were found between G3BP expression and tumor size, differentiation degree and TNM stage (P > 0.05). The group with G3BP positive expression had shorter survival time than the group with G3BP negative expression (P = 0.000). The positive expression rate of RhoC in ESC was 66.25%; and the rate in the lymph node metastasis group was significantly higher than that in the non-lymph node metastasis group (Z = -2.115, P < 0.05), but no relations were found between RhoC expression and tumor size, differentiation degree and TNM stage (P > 0.05). The RhoC positive expression group had a shorter survival time than the RhoC negative expression group (P < 0.001. The expression of G3BP protein correlated positively with the expression of RhoC in ESC tissues (rs = 0.656, P < 0.001). CONCLUSION: The expression of G3BP and RhoC protein is closely related to the lymph node metastasis and survival in ESC patients. G3BP and RhoC proteins can be considered as predictors of prognosis in ESC patients.

热休克凋亡食管癌细胞负载自体树突状细胞制备及其表型特征的分析

目的:建立自体热休克凋亡食管癌细胞抗原制备、树突状细胞(DC)体外诱导以及抗原负载方法,为DC肿瘤疫苗的临床应用提供技术基础。方法:采用酶消化法从手术切除的食管癌新鲜组织获得单细胞悬液,热休克后用桦脂酸诱导其凋亡制备成细胞抗原;采用人工肝素抗凝采集外周静脉血,分离单个核细胞(PBMC),贴壁法获得单核细胞,经GM-CSF与IL-4体外诱导成未成熟树突状细胞(imDC);负载细胞抗原后制备成DC肿瘤疫苗,并对DC疫苗的形态、数量及表型特征进行分析。结果:肿瘤细胞抗原每克组织得率(9.89±2.46)×106,平均凋亡率(67.60±3.23)%。imDC活率>95%,imDC表型分析为CD11c+HLA-DR+、CD11c+CD80+、CD11c+CD83+和CD11c+CD86+,表达率分别为(88.30±3.59)%(、1.25±0.55)%、(6.13±1.79)%和(72.90±5.01)%。DC疫苗活率>95%,DC疫苗表型为CD11c+HLA-DR+、CD11c+CD80+、CD11c+CD83+和CD11c+CD86+,表达率分别为(89.60±3.91)%、(34.20±3.85)%、(64.90±8.05)%和(86.10±6.22)%。负载自体抗原DC诱导CTL杀伤自体肿瘤细胞的杀伤率为(65.90±6.25)%,明显高于杀伤食管癌肿瘤细胞株的杀伤率〔(32.56±2.68)%〕,P<0.01。结论:本方法稳定、安全及可靠,可制备出在体外诱导特异性CTL的DC肿瘤疫苗。

食管癌根治术患者围术期疼痛应激指标及T细胞亚群的变化研究

目的探讨食管癌根治术患者围术期疼痛应激指标及T细胞亚群的变化。方法选取进行食管癌根治术治疗的285例食管癌患者作为观察组,选取同期体检的300例健康志愿者作为对照组,检测观察组患者围术期P物质(SP)、β-内啡肽(β-EP)、神经肽Y(NPY)、降钙素基因相关肽(CGRP)及T细胞亚群的变化并与对照组进行比较分析。结果观察组各时点的SP、NPY、CGRP均高于对照组,β-EP均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组术后1、3 d的SP、NPY、CGRP高于术前(P <0. 05),β-EP低于术前(P <0. 05);观察组术后7 d的SP、β-EP、NPY、CGRP均与术前差异无统计学意义(P> 0. 05)。观察组各时点的CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+均低于对照组,差异有统计学意义(P <0. 05);观察组术后1、3 d的CD3^+、CD4^+、CD4^+/CD8^+均低于术前(P <0. 05),观察组术后7 d的T细胞亚群水平与术前比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论食管癌根治术患者围术期存在不同程度的疼痛应激及免疫抑制现象,应加强围术期疼痛应激指标及免疫功能的监测。