基于增强CT影像组学预测食管鳞癌淋巴血管侵犯状态的价值

目的:探讨基于增强CT影像组学预测食管鳞癌(ESCC)淋巴血管侵犯(LVI)的价值。方法:回顾性搜集行根治性切除术并经术后病理证实的224例食管鳞癌患者,其中包括66例LVI阳性和158例LVI阴性患者。所有患者均在术前2周内进行胸部增强CT扫描。将入组的患者按照7:3的比例随机分为训练集和测试集。使用3D Slicer软件逐层勾画全肿瘤感兴趣区(ROI),采用Python软件的Pyradiomics包提取肿瘤组织的影像组学特征,建立影像组学模型用于预测食管鳞癌的LVI状态并进行验证。采用受试者工作特征(ROC)曲线的曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值来评价影像组学模型的诊断效能,使用校准曲线评价影像组学模型在训练集和测试集中的拟合程度。使用决策曲线分析(DCA)评价影像组学模型的临床应用价值。结果:从全肿瘤ROI中提取了1130个组学特征,经过筛选最终保留了7个影像组学特征,并使用多因素logistic回归建立影像组学预测模型。在训练集中,影像组学模型预测LVI的AUC值为0.930,敏感度为0.851,特异度为0.919,准确度为0.899,阳性预测值为0.816,阴性预测值为0.936;在测试集中,AUC值为0.897,敏感度为0.789,特异度为0.787,准确度为0.788,阳性预测值为0.600,阴性预测值为0.902。校准曲线显示影像组学模型在训练集及测试集中的预测概率与实际概率的一致性良好。DCA曲线显示影像组学模型具有良好的临床应用价值。结论:基于增强CT构建的影像组学模型,能够在术前有效预测食管鳞癌的LVI状态。

LINC01410促进食管鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的作用及其机制研究

背景与目的:LINC01410是长度为647 bp的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA),其异常表达参与多种肿瘤的发生、发展,但其对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)的影响研究较少。本研究旨在探讨LINC01410促进ESCC细胞增殖和迁移的作用机制,以期为防治ESCC提供生物标志物及潜在治疗靶点。方法:应用基因表达谱交互分析2(Gene Expression Profiling Interactive Analysis 2,GEPIA2)在线分析LINC01410在肿瘤与癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)ESCC数据中的表达水平及与患者预后总生存期的关系;采用基因探针富集分析(Gene Set Enrichment Analysis,GSEA)LINC01410可能调控的信号转导通路。收集2020年1月—2021年12月在新乡医学院第一附属医院、平顶山市第一人民医院胸外科行根治性手术的ESCC患者新鲜肿瘤组织标本62例,并选取癌旁组织作为对照。本项目经医院伦理委员会批准(新乡医学院第一附属医院,编号:2018036;平顶山市第一人民医院,编号:2019-018)。本研究采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测LINC01410的表达水平并分析其与临床病理学参数的关系。应用LV-NC、LV-over/LINC01410转染EC109细胞并建立稳定过表达细胞株EC109/NC、EC109/OE,采用shRNA-NC、shRNA-LINC01410转染EC9706细胞并建立稳定敲降细胞株EC9706/NC、EC9706/KD;应用RTFQ-PCR检测LINC01410的相对表达量;采用噻唑蓝比色法[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]实验和克隆形成实验检测细胞增殖;采用transwell实验检测细胞迁移能力;采用双荧光素酶报告基因实验检测LINC01410对T细胞因子/淋巴增强因子1(T cell factor/lymphoid enhancer factor 1,TCF/LEF1)启动子活性的影响;采用蛋白质印迹法(Western blot)检测Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号转导通路、上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)信号转导通路相关蛋白表达水平。结果:GEPIA2分析显示,在ESCC组织中LINC01410表达水平显著高于食管正常组织,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示,高表达LINC01410的ESCC患者生存率显著低于低表达LINC01410的患者(P=0.042)。RTFQ-PCR检测结果显示,在ESCC组织中LINC01410表达水平显著高于配对癌旁组织;LINC01410高表达与肿瘤浸润程度、淋巴结转移及TNM分期显著相关(P<0.01);与食管正常上皮细胞HEEC相比,LINC01410在EC109、EC9706细胞中显著高表达(P<0.05);LINC01410在EC109/OE细胞中显著高表达(P<0.01),而在EC9706/KD细胞中显著下调(P<0.01)。MTT结果显示,EC109/OE细胞48 h时细胞活性显著高于EC109/NC细胞(P<0.01);EC9706/KD细胞48 h时细胞活性显著低于EC9706/NC(P<0.01)。细胞克隆形成实验结果显示,与EC109/NC细胞相比,EC109/OE细胞克隆数显著增多;与EC9706/NC细胞相比,EC9706/KD细胞克隆数明显减少(P<0.01)。Transwell迁移实验结果显示,EC109/OE细胞株迁移的细胞数显著多于EC109/NC细胞(P<0.01),而EC9706/KD细胞迁移的细胞数显著少于EC9706/NC细胞(P<0.01)。GSEA分析显示,Wnt/β-catenin、EMT等信号转导通路显著富集在高表达LINC01410的ESCC组织中。双荧光素酶报告基因实验结果示,EC109/OE细胞中TCF/LEF1启动子活性显著高于EC109/NC细胞,EC9706/KD细胞中TCF/LEF1启动子活性显著低于EC9706/NC细胞(P<0.01)。Western blot检测结果显示,与EC109/NC细胞相比,EC109/OE细胞中E-cadherin蛋白表达下调,而N-cadherin、β-cantenin、cyclin D1、c-Myc等蛋白显著上调;与EC9706/NC细胞相比,E-cadherin蛋白表达上调,而N-cadherin、β-cantenin、cyclin D1、c-Myc等蛋白显著下调。结论:LINC01410具有促进ESCC细胞增殖和迁移的作用,其机制可能与激活EMT、Wnt/β-catenin等信号转导通路有关。

高、低表达miR-296-5p的肿瘤细胞外泌体对食管鳞癌细胞迁移和侵袭的调控作用

目的探讨高、低表达miR-296-5p的肿瘤细胞外泌体对食管鳞癌细胞(ESCC)迁移和侵袭的调控作用及其机制。方法提取转染miR-296-5p过表达和miR-296-5p干扰及其阴性对照物(NC)后的ESCC细胞外泌体,并采用透射电镜与Western blotting法进行鉴定;将ESCC细胞分为三组,干扰组、过表达组分别加入miR-296-5p干扰或过表达细胞的外泌体培养,NC组加入NC转染细胞的外泌体培养48 h;取各组细胞,MTT法检测细胞活力、Transwell法检测细胞侵袭迁移能力,RT-PCR、Western blotting法检测细胞黏附分子3(CADM3)、CADM1、CADM4、钙黏蛋白E(E-cadherin)及血管内皮细胞生成浸润相关蛋白CD31、CD44。结果细胞活力、迁移和侵袭细胞数过表达组>NC组>干扰组(P均<0.05)。细胞中CADM1、CADM4、E-cadherin基因及蛋白表达水平干扰组>NC组>过表达组,CADM3、CD31、CD44基因及蛋白表达水平过表达组>NC组>干扰组(P均<0.05)。结论高表达miR-296-5p的肿瘤细胞外泌体可能通过调控CADM、E-cadherin、CD31、CD44等基因表达提高ESCC细胞的侵袭、迁移能力。

食管鳞癌中microRNA let-7a-3甲基化与IGF-Ⅱ的相关性

目的探讨食管鳞癌组织中microRNA let-7a-3甲基化状态与血浆中类胰岛素样生长因子2(Insulin like growth factor 2,IGF-Ⅱ)表达的相关性。方法采用甲基化特异性PCR法(Methylation specific PCR,qMSP)检测83例食管癌及相对应的癌旁正常组织中let-7a-3甲基化状态,采用酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆中IGF-Ⅱ的表达水平。结果83例食管鳞癌患者癌组织中的microRNA let-7a-3甲基化程度显著高于癌旁正常组织(P<0.001)。83例食管鳞癌患者血浆中IGF-Ⅱ的表达水平与let-7a-3基因的甲基化程度总体上呈正相关,具有统计学意义(r=0.600,P<0.001)。结论microRNA let-7a-3可能通过对下游分子的甲基化调控参与食管鳞癌的发生发展,这对了解食管鳞癌形成的机制具有重要意义,可为食管鳞癌的诊断和预后提供依据。

接受PD-1/L1抑制剂治疗的晚期食管鳞癌患者恶病质指数与疗效的关系

目的分析接受PD-1/L1抑制剂治疗的晚期食管鳞癌患者恶病质指数(CXI)与疗效的关系。方法接受PD-1/L1抑制剂治疗的晚期食管鳞癌患者91例,收集患者临床资料,基于骨骼肌指数(SMI)、中性粒细胞-淋巴细胞比率(NLR)及血清白蛋白(ALB)水平计算CXI:CXI=(SMI×ALB)/NLR。以CXI中位值为界值,将91例患者分为高CXI组和低CXI组,采用Kaplan-Meier生存分析法及多因素COX回归模型分析CXI与接受PD-1/L1抑制剂治疗晚期食管鳞癌患者疗效的关系,其中以总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)作为接受PD-1/L1抑制剂治疗疗效的评价指标。结果91例接受PD-1/L1抑制剂治疗的晚期食管鳞癌患者的CXI为314.19(47.82,1075.86)。低CXI组的中位OS为9.7个月、中位PFS为5.5个月,高CXI组的中位OS为15.7个月、中位PFS为10.0个月,两组相比,P均<0.05。多因素COX回归分析结果显示,CXI是接受PD-1/L1抑制剂治疗的晚期食管鳞癌患者OS和PFS的独立影响因素[HR(95%CI)分别为1.44(1.15~1.81)、1.46(1.16~1.83),P均<0.05]。结论CXI是接受PD-1/L1抑制剂治疗的晚期食管鳞癌患者疗效的独立影响因素,可用于接受PD-1/L1抑制剂治疗的晚期食管鳞癌患者疗效预测。

新辅助+免疫治疗对胸段食管鳞癌淋巴结转移模式和疗效的影响及相关因素分析

目的:探讨新辅助+免疫治疗对胸段食管鳞癌淋巴结转移模式及疗效的影响并对相关因素进行分析。方法:回顾性分析本院收治的90例行食管癌根治术的胸段食管鳞癌患者病例资料,根据不同治疗方式分为手术组(n=27)、手术联合新辅助化疗组(n=30)、手术联合新辅助+免疫治疗组(n=33),对比3组淋巴结转移模式、病理完全缓解(pCR)率,分析影响食管鳞癌患者pCR率的因素。结果:3组治疗后胸上段常见淋巴结转移部位的转移率未见明显差异(P>0.05)。手术联合新辅助+免疫治疗组患者的胸中段淋巴结及胸下段的隆突下淋巴结、胃左动脉旁淋巴结转移率低于手术联合新辅助化疗组及单纯手术组(P<0.05)。干预后,手术联合新辅助+免疫治疗组、手术联合新辅助化疗分期低于手术组,说明手术联合新辅助+免疫治疗及手术联合新辅助化疗有降期作用(P<0.05)。多因素分析显示,肿瘤直径小、无淋巴结转移及手术联合新辅助+免疫治疗是pCR率的独立影响因素。结论:新辅助+免疫治疗胸段食管鳞癌后可降低淋巴结转移率,改变淋巴结转移模式,且肿瘤直径、淋巴结转移和新辅助+免疫治疗是影响pCR的重要因素,临床治疗过程中还需结合淋巴结转移模式及pCR的影响因素调整淋巴结清除和术后辅助治疗方式。

铁死亡抑制基因在食管癌中的高表达分析

目的通过生物信息学分析和实验验证探讨铁死亡基因在食管鳞癌中的作用。方法从基因表达数据库(GEO)下载食管鳞癌数据集GSE161533和GSE20347,采用R软件分析获得差异基因(DEGs),将DEGs与铁死亡数据库(FerrDb)中的基因取交集获得食管癌铁死亡相关基因,将获得食管癌铁死亡相关基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析、String构建蛋白互作网络(PPI)、Cytoscape筛选铁死亡核心基因及抑制基因,筛选获得食管癌铁死亡抑制基因在癌症基因图谱(TCGA)中进行验证。应用qPCR检测食管癌铁死亡抑制基因在正常食管细胞和食管癌细胞中的表达水平,在TE1食管癌细胞系中下调6个食管癌铁死亡抑制基因,分为对照组(Control组)、siRNA阴性对照组(Negative组)和每个siRNA干扰组(包括RRM2-siRNA组、GCLC-siRNA组、TFRC-siRNA组、TXN-siRNA组、SLC7A11-siRNA组和EZH2-siRNA组),对照组不加任何转染试剂,其余各组使用Lipofectamine 2000(终浓度为3μL/mL)和siRNA(终浓度为100 nmol/L)的转染体系转染细胞,转染后分别进行流式细胞学实验、CCK8实验以验证食管癌铁死亡抑制基因对食管癌细胞功能的影响,Western blotting实验验证食管癌铁死亡抑制基因对铁死亡进程的影响。结果共获得58个食管癌铁死亡相关基因,GO分析显示其主要参与谷胱甘肽跨膜转运、铁离子输运和细胞凋亡等生物学过程,KEGG富集分析显示其主要参与铁死亡、谷胱甘肽代谢、抗叶酸抵抗等信号通路。PPI网络包含54个节点和74条边,局部聚类系数为0.522,PPI富集值为P<0.001。RRM2、TFRC、TXN、EZH2、SLC7A11、GCLC 6个食管癌铁死亡抑制基因,在TCGA数据集的食管癌组织中表达高于正常食管组织(P<0.01),与正常食管细胞系比较,这些基因在食管癌细胞系中表达升高(P<0.05)。在食管癌TE1细胞中,应用siRNA分别下调RRM2、TFRC、TXN、EZH2、SLC7A11、GCLC可抑制细胞增殖(P<0.05)、促进细胞凋亡(P<0.05),铁死亡进程标志蛋白GPX4、FIH1表达下调(P<0.05)、ACSL4表达上调(P<0.05)。结论铁死亡抑制基因在食管癌中的高表达可能阻碍了食管癌细胞的铁死亡进程,导致肿瘤发生,抑制这些基因可恢复铁死亡进程,促进细胞凋亡,铁死亡抑制基因有望成为食管癌治疗的新靶点。

抑制hsa_circRNA6448-14表达对人食管鳞状细胞癌细胞系KYSE30及KYSE150侵袭迁移的影响

目的观察抑制环状RNA(circular RNA,circRNA)hsa_circRNA6448-14表达对人食管鳞状细胞癌(ES‐CC)细胞系KYSE30及KYSE150侵袭、迁移的影响,证实hsa_circRNA6448-14在ESCC中的生物学功能。方法体外传代培养KYSE30及KYSE150细胞。随机分为KYSE30敲降组、KYSE150敲降组、KYSE30对照组及KYSE150对照组,KYSE30敲降组和KYSE150敲降组转染hsa_circRNA6448-14-siRNA干扰质粒(抑制hsa_circRNA6448-14表达),KYSE30对照组及KYSE150对照组加入siNC质粒(空白质粒)转染,培养48 h时采用qRT-PCR检测各组细胞hsa_circRNA6448-14,成功培养抑制hsa_circRNA6448-14表达的KYSE30及KYSE150细胞。培养24 h时采用Tran‐swell实验观察各组细胞侵袭情况、采用划痕实验观察各组细胞迁移情况。结果培养24 h时KYSE30敲降组、KYSE30对照组、KYSE150敲降组及KYSE150对照组穿膜细胞数分别为58.00±3.61、161.33±4.06、69.00±2.08、191.33±6.39;与对照组比较,培养24 h时敲降组细胞穿模细胞数小(t分别为19.04、18.21,P均<0.05)。培养24 h时KYSE30敲降组、KYSE30对照组、KYSE150敲降组及KYSE150对照组细胞迁移面积分别为(11.67±0.88)、(26.00±1.73)、(14.33±0.88)、(28.00±1.53)mm2;与对照组比较,培养24 h时敲降组细胞迁移面积小(t分别为7.37、7.75,P均<0.05)。结论抑制hsa_circRNA6448-14表达的KYSE30及KYSE150细胞侵袭、迁移能力降低。hsa_circRNA6448-14在ESCC的侵袭及迁移过程中发挥重要作用。

RNA结合蛋白HuR调控lncRNA DLEU2促进食管鳞癌细胞增殖、侵袭的机制

目的探讨RNA结合蛋白人抗原(Hu)R对食管鳞癌细胞增殖、侵袭的影响及其与长链非编码RNA(lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因(DLEU)2的调控关系。方法收集食管鳞癌组织样本并在体外培养正常人食管鳞状上皮细胞Het-1A及食管鳞癌细胞系KYSE30、KYSE70、KYSE270,实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)实验检测HuR mRNA与DLEU2表达水平。利用Lipofectamime2000试剂对KYSE30细胞进行转染,并随机分组为对照组、pcDNA组、pc-HuR组、sh-NC组、sh-HuR组、sh-HuR+si-NC组和sh-HuR+si-DLEU2组。CCK-8法检测各组KYSE30细胞活性;平板克隆形成实验检测各组KYSE30细胞增殖能力;荷瘤裸鼠实验观察体内肿瘤生长情况;Transwell小室检测各组KYSE30细胞侵袭能力;Western印迹检测各组KYSE30细胞中HuR蛋白表达水平;RNA免疫沉淀(RIP)实验分析HuR与DLEU2的结合关系。结果在食管鳞癌组织和细胞系中,HuR mRNA和蛋白表达及DLEU2水平均显著升高(P<0.05),其中KYSE30细胞系中HuR基因与DLEU2表达水平最高,故选择KYSE30细胞进行转染实验。转染pc-HuR的细胞中HuR蛋白表达明显上调,细胞活性、克隆形成率及细胞侵袭数均显著增加(P<0.05);转染sh-HuR的细胞中HuR蛋白表达明显下调,细胞活性、克隆形成率及细胞侵袭数均显著降低(P<0.05)。RIP实验和qRT-PCR检测发现HuR与DLEU2有相互作用关系。同时转染sh-HuR和si-DLEU2的细胞中DLEU2水平明显降低,细胞活性、克隆形成率及细胞侵袭数均比转染sh-HuR明显更低(P<0.05)。过表达HuR显著增加移植瘤体积和重量,抑制HuR明显减小移植瘤的体积和重量,而同时抑制HuR和DLEU2时移植瘤的体积和重量比单独抑制HuR时明显更小(P<0.05)。结论HuR通过与DLEU2结合,促进食管鳞癌细胞的增殖、侵袭和移植瘤的体内生长。

特瑞普利单抗联合化学治疗对局部晚期食管鳞癌患者免疫功能及预后的影响

目的探究特瑞普利单抗联合化学治疗对局部晚期食管鳞癌(ESCC)患者免疫功能及预后的影响。方法选取2019年3月至2023年3月在郑州大学第一附属医院就诊的115例局部晚期ESCC患者为研究对象,根据治疗方案不同,将其分为对照组[化学治疗(氟尿嘧啶^(+)顺铂),n=50]和观察组(特瑞普利单抗联合化学治疗,n=55),比较两组治疗前及治疗6个月后的免疫功能[免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、CD4^(+)、CD8^(+)]、血清肿瘤标志物[血管内皮生长因子(VEGF)、鳞状细胞癌相关抗原(SCC)、细胞角蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、血清可溶性PD-1(sPD-1)/PD-L1(sPD-L1)]、不良反应、近远期疗效[实体瘤疗效、无进展生存期(PFS)以及总生存时间(OS)]。结果治疗6个月后,两组患者IgA、IgM、CD4^(+)均高于治疗前,且观察组高于对照组(P<0.05);两组患者CD8^(+)、血清VEGF、SCC、CYFRA21-1、sPD-1/sPD-L1水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗6个月后,观察组患者疾病控制率(90.74%vs 75.00%)、客观缓解率(75.93%vs 52.08%)高于对照组(P<0.05);随访1年,两组患者生存率(75.93%vs 62.50%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。K-M结果显示,观察组的PFS为(9.04±1.83)个月,对照组的PFS为(7.22±1.27)个月,两组比较差异无统计学意义(P=0.412);观察组的OS为(10.94±2.04)个月,对照组的OS为(9.52±1.92)个月,两组比较差异无统计学意义(P=0.160)。结论在局部晚期ESCC患者中进行特瑞普利单抗联合氟尿嘧啶、顺铂治疗,能改善患者的免疫功能,提高近远期疗效。

清扫淋巴结数对pT1~3N0M0期胸段食管鳞癌根治术后生存的影响

目的 探讨胸段食管鳞癌单纯胸腹两野根治(R0)术后pT1~3N0M0期患者术中清扫淋巴结数对术后生存的影响。方法 收集胸段食管鳞癌单纯胸腹两野R0术后pT1-3N0M0期、术后生存≥3个月、随访资料完整患者488例。分别研究清扫淋结数量、纵隔淋巴结情况和病理分期与患者总生存率(OS)、无疾病生存率(DFS)的关系。结果 至随访期结束,全组术后3、5年OS为72.7%和62.2%,DFS为64.1%和57.4%。COX单因素及多因素分析提示清扫淋巴结数影响OS和DFS;亚组分析清扫淋巴结数以12~15枚者OS和DFS最高(P<0.05),清扫淋巴结数<12枚或>15枚OS和DFS均有降低趋势。结论 清扫淋巴结数影响pT1~3N0M0期胸段食管鳞癌术后生存,清扫淋巴结数以12~15枚者生存率最高,过少或过多均可能不利于生存,但需要进一步研究。

基于隐结构模型分析食管鳞癌证候分类及特征

目的探索食管癌证候分类及特征,为临床辨治提供参考。方法采集全国10个省份的食管癌患者四诊信息,构建数据库。运用Lantern 5.0软件构建隐结构模型,通过综合聚类提取食管癌常见证候。结果共纳入2027例食管癌患者,160个症状构建隐结构模型,得到34个隐变量,综合聚类得到6种常见证候。结论食管癌的主次病因可以概括为外邪直中是引发食管癌的主因,高龄和情志抑郁是促因。食管癌常见肝胃不和证、脾肾亏虚证、气虚阳微证、痰气互阻证、血瘀痰滞证、阴虚内热证。

尼妥珠单抗联合放射治疗改善老年食管鳞癌患者预后的效果评价

目的 探讨尼妥珠单抗联合放射治疗改善老年食管鳞癌患者预后的效果。方法 非随机选取2018年1月—2021年6月滕州市中心人民医院收治的92例老年食管鳞癌患者为研究对象。按治疗方法分为两组,每组46例。对照组给予放射治疗,观察组则联合尼妥珠单抗治疗,比较两组疗效、免疫指标、肿瘤标志物、生存率及不良反应。结果 观察组肿瘤控制率为54.35%(25/46),高于对照组的30.43%(14/46),差异有统计学意义(χ^(2)=5.386,P<0.05)。观察组免疫指标水平、肿瘤标志物指标水平优于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。两组不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组治疗后1、2年生存率均高于对照组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论 老年食管鳞癌患者应用尼妥珠单抗联合放射治疗可有助于改善免疫功能,下调肿瘤标志物指标表达水平,延长生存期,且不良反应少。

miR-140-3p靶向CXCL8对食管鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的探究miR-140-3p靶向白介素8(CXCL8)对食管鳞癌(ESCC)细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法将ESCC细胞系EC109细胞分为:miR-NC组(转染miR-NC)、miR-140-3p组(转染miR-140-3p mimic)、miR-140-3p+CXCL8-NC组(细胞共转染miR-140-3p mimic和pcDNA-NC)、miR-140-3p+CXCL8组(细胞共转染miR-140-3p mimic和pcDNA-CXCL8),未做任何处理的EC109细胞记为NC组。双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p、CXCL8的关系;qRT-PCR检测人EC109细胞和正常人食管鳞状上皮细胞系Het-1A中miR-140-3p表达;Western blot检测Het-1A、EC109细胞CXCL8蛋白以及上皮间质转化(EMT)相关蛋白水平;CCK8法检测EC109细胞活力;流式细胞术检测EC109细胞凋亡率;Transwell检测EC109细胞侵袭以及迁移细胞数量。结果在EC109细胞中CXCL8呈高表达,miR-140-3p呈低表达;与NC组、miR-NC组相比,miR-140-3p组EC109细胞OD 450值、迁移、侵袭细胞数量、神经型钙粘附蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、CXCL8蛋白水平显著下降(P<0.05),EC109细胞凋亡率、miR-140-3p水平、上皮钙粘附素(E-cadherin)蛋白水平显著升高(P<0.05),而上调CXCL8减弱了过表达miR-140-3p抑制EC109细胞增殖、迁移、侵袭、EMT及促进其凋亡的效果;miR-140-3p负向调控CXCL8表达。结论miR-140-3p通过下调CXCL8抑制ESCC细胞增殖、迁移和侵袭。

卡瑞利珠单抗联合安罗替尼对晚期食管鳞癌患者疗效及免疫功能的影响

目的分析晚期食管鳞癌患者采用卡瑞利珠单抗联合安罗替尼治疗的临床效果。方法将65例晚期食管鳞癌患者随机分为对照组(n=32)及观察组(n=33)。对照组采用替吉奥联合安罗替尼治疗,观察组采用卡瑞利珠单抗联合安罗替尼治疗,21 d为1个疗程,均连续治疗4个疗程。治疗结束后评估2组患者近期疗效、血清肿瘤标志物水平、免疫功能及不良反应发生情况。结果观察组疾病控制率(84.85%)显著高于对照组(59.38%)(P<0.05)。治疗后2组患者血清癌胚抗原(CEA)、糖抗原19-9(CA19-9)、糖抗原125(CA125)及鳞状上皮细胞癌抗原(SCC)表达下降;且观察组水平显著低于对照组(P<0.001)。治疗后2组患者CD3^(+)、CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)水平上升,CD8^(+)水平下降;且观察组水平变化与对照组相比更为显著(P<0.01)。2组患者高血压、转氨酶升高、食欲下降、乏力及毛细血管增生症发生率差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者粒细胞下降及血小板下降发生率低于对照组患者,且差异具有统计学意义(P<0.01)。结论卡瑞利珠单抗联合安罗替尼可显著降低血清肿瘤标志物水平,改善患者免疫功能,提高临床疗效,且安全性较高,值得临床推广。

IKBKE沉默对食管鳞癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨核因子(NF)κB激酶亚单位ε抑制剂(IKBKE)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其沉默对KYSE-30细胞生物学行为的影响。方法:收集自2020年6月至2023年6月开展ESCC根治术的30例患者的癌组织以及癌旁组织,并分为ESCC组(n=30)与对照组(n=30)。运用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白质印迹法(WB)检测ESCC组及对照组中的IKBKE mRNA与蛋白水平,并分析ESCC组中的IKBKE mRNA以及蛋白水平与ESCC患者临床病理特征(性别、年龄与肿瘤的TNM分期、分化、浸润深度及是否转移)的关系。将培养的ESCC细胞系KYSE-30细胞随机分为空白对照组(无任何处理)、NC-IKBKE组(转染NC-siRNA)、si-IKBKE组(转染IKBKE-siRNA)。CCK-8法检测KYSE-30细胞增殖能力;流式细胞术检测KYSE-30细胞凋亡率;划痕法检测KYSE-30细胞迁移能力;Transwell法检测KYSE-30细胞侵袭能力;采用qRT-PCR及WB检测KYSE-30细胞中IKBKE mRNA及蛋白水平;采用WB检测KYSE-30细胞中NF-κB通路关键蛋白NF-κB p65、磷酸化核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)表达水平。结果:ESCC组IKBKE的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组(t=9.769、12.960,均P=0.000);IKBKE在ESCC组的mRNA及蛋白水平与ESCC的肿瘤的分化程度、TNM分期及转移有关(t=2.070~2.829,均P<0.05),而其与性别、年龄、浸润深度无关(均P>0.05);与NC-IKBKE组相比,si-IKBKE组KYSE-30细胞中的IKBKE的mRNA以及蛋白水平均显著降低(F=77.244、78.436,均P=0.000);成功沉默IKBKE表达的KYSE-30细胞系后,与NC-IKBKE组相比,si-IKBKE组细胞的48、72 h细胞增殖能力及24、48 h细胞迁移率均显著下降(F=12.355~44.755,均P<0.05),与NC-IKBKE组比较,si-IKBKE组48 h细胞侵袭抑制率、细胞凋亡率均明显增加(F=155.436、46.360,均P=0.000);si-IKBKE组的NF-κB p65、p-IκBα的蛋白表达水平均显著低于NC-IKBKE组(F=139.206、55.551,均P=0.000)。结论:ESCC组织中的IKBKE表达水平显著高于癌旁组织,且与肿瘤的分化程度、TNM分期及转移有关,沉默IKBKE可显著抑制ESCC细胞的增殖、迁移以及侵袭能力,促进细胞凋亡,其机制可能与IKBKE调控NF-κB通路有关。

基于列线图模型的护理干预对食管鳞癌术后患者肠内营养耐受不良发生的预防作用

目的探讨基于列线图模型的护理干预对食管癌术后患者肠内营养耐受不良发生的预防作用。方法选取2022年1月至12月安阳市肿瘤医院收治的食管鳞癌术后患者158例,随机均分为对照组和观察组2组,每组79例。对照组术前予以常规护理,观察组在对照组的基础上给予基于列线图模型的护理干预。比较2组患者肠内营养耐受不良发生情况、胃肠道功能及护理满意度。结果观察组腹痛、腹泻、腹胀、恶心呕吐、肠内营养耐受不良发生率均低于对照组(χ^(2)=4.451,P=0.035;χ^(2)=9.281,P=0.002;χ^(2)=5.773,P=0.016;χ^(2)=8.913,P=0.003;χ^(2)=4.856,P=0.028)。观察组患者肠鸣音恢复时间、首次排气时间、进食时间、胃管留置时间和住院时间均短于对照组(t=25.520,P<0.001;t=32.060,P<0.001;t=33.970,P<0.001;t=27.940,P<0.001;t=7.827,P<0.001)。观察组非常不满意1例、不满意4例、一般3例、满意49例、非常满意22例,护理满意度为89.87%;对照组分别为8例、7例、14例、45例、5例、63.29%。观察组护理满意度高于对照组(χ^(2)=15.564,P<0.001)。结论基于列线图模型的护理干预可以显著降低食管癌术后患者肠内营养耐受不良发生风险,改善胃肠道功能,提高提升患者护理满意度,值得在临床上进一步推广使用。

唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的探讨免疫检查点唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素-15(Siglec-15)在食管鳞癌中的表达及意义。方法免疫组化检测食管鳞癌组织、癌旁正常食管组织中Siglec-15表达情况,并比较分析其与食管鳞癌患者临床病理特征的关系。结果Siglec-15在食管鳞癌组织中表达阳性率为60.0%(48/80),高于癌旁正常食管组织中的23.75%(19/80)(χ^(2)=21.595,P<0.001)。食管鳞癌组织中Siglec-15蛋白表达与患者肿瘤直径、T分期、TNM分期、N分期及分化程度有关(χ^(2)=7.500,P=0.006;χ^(2)=10.342,P=0.001;χ^(2)=22.547,P=0.016;χ^(2)=20.508,P<0.001;χ^(2)=12.586,P=0.002)。结论Siglec-15在食管鳞癌组织中高表达,与患者的疾病进展显著相关。

食管鳞癌中Versican、NF-κB和MMP-9的表达及其与临床病理特征的关系

目的:观察食管鳞癌组织中多功能蛋白聚糖(Versican)、核因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB)和基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproteinase-9,MMP-9)蛋白及mRNA的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化及原位杂交方法检测47例食管鳞癌组织及癌旁正常食管黏膜组织中Versican、NF-κB和MMP-9蛋白及mRNA的表达情况,并分析其与临床病理特征的关系及三者的相关性。结果:食管鳞癌组织中Versican、NFκB和MMP-9蛋白及mRNA表达的阳性率均明显高于癌旁正常食管黏膜组织中的表达(P<0.05);食管鳞癌组织中Versican、NF-κB和MMP-9蛋白及mRNA的高表达与浸润深度越深、淋巴结有转移、TNM分期越晚均有关(P<0.05),与性别、年龄、组织分级均无关;食管鳞癌组织中,Versican、NF-κB和MMP-9三者在蛋白及mRNA水平的表达均呈正相关(P<0.05)。结论:Versican、NF-κB和MMP-9在食管鳞癌中的高表达与肿瘤的生成、浸润及转移密切相关,并且三者具有相关性,为我们进一步探索食管鳞癌浸润转移的潜在机制奠定了基础。

食管鳞癌LncRNA FAL1、miR-637表达与临床病理参数及预后关系研究初探

目的检测食管鳞癌组织中的长链非编码RNA(LncRNA)FAL1与miR-637表达情况,并探讨其与患者临床特征及预后的关系。方法选取2018年1月至2021年6月在广西中医药大学附属国际壮医医院住院治疗的48例食管鳞癌患者,检测食管鳞癌组织及癌旁组织LncRNA FAL1、miR-637表达水平,并探讨其与临床特征及预后的关系。结果食管鳞癌组织中LncRNA FAL1表达量高于癌旁组织,miR-637表达量低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.01)。年龄、性别、吸烟、嗜酒情况不影响食管鳞癌组织LncRNA FAL1、miR-637表达量(P>0.05);TNM分期、淋巴结转移以及癌细胞分化程度影响食管鳞癌组织LncRNA FAL1、miR-637表达量(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示,LncRNA FAL1高表达组的3年总生存率低于LncRNA FAL1低表达组(P=0.004);miR-637高表达组和miR-637低表达组的3年总生存率比较,差异无统计学意义(P=0.542)。结论食管鳞癌组织中LncRNA FAL1表达量高于癌旁组织,miR-637表达量低于癌旁组织,二者与肿瘤TNM分期、淋巴结转移以及癌细胞分化程度有关,有望成为食管鳞癌诊断、治疗以及评估预后的新生物学指标。