食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1的毒性研究

目的:考察食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1后的体内毒性,探索安全剂量范围,为后续临床试验提供参考信息。方法:30只食蟹猴随机分成3组,包括溶媒对照组和低、高剂量(1.0×10^(8)、4.0×10^(8)pfu)组,每组10只,雌雄各半。采用肌肉注射给药,每周给药2次,连续给药6周,恢复期8周。试验期间,每天观察动物的临床症状和摄食量,每次给药后1~2天观察注射部位症状,每周称量体重。分别在检疫期、首次给药后、给药期结束、恢复期结束的不同时间点进行安全药理(体温、血压、心电图)测定、临床病理(血液学、血凝、血清生化、尿生化)检查、免疫学(T淋巴细胞、细胞因子、免疫原性)测定、组织病理学检查和脏器称重。结果:给药后,动物未见异常症状、注射部位刺激性、体重和摄食量改变,未见安全药理和临床病理指标有意义的变化。与溶媒对照组比较,第41天,低剂量会引起动物CD3^(+)CD4^(+)T细胞比例升高,高剂量未见明显变化。第13至97天,低、高剂量均能引起动物产生抗载体结合抗体、抗抗体,以及个别动物检出hPD-1表达产物。证明药物在体内产生免疫活性和介导免疫原性。组织病理学检查显示,给药期结束时,低、高剂量组动物注射部位极轻度至中度混合细胞浸润,高剂量组动物坐骨神经极轻度髓鞘/轴突变性;恢复期结束时注射部位病变减为极轻度,坐骨神经病变未见恢复趋势。低、高剂量组动物未见组织脏器重量改变。结论:食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1后,动物体内耐受良好,受试物未见毒性反应剂量(NOAEL)是1.0×10^(8)pfu。上述研究结果为药物开展临床试验提供了数据支持。

基于超声诊断对中老年食蟹猴心脏结构和功能的基础研究

目的 针对10岁以上中老年食蟹猴开展心脏结构和功能基础研究,为研究老年疾病动物选择提供基础数据。方法 本研究选取144只10岁以上中老年食蟹猴作为研究对象,分为10~15岁组雌性37只、雄性66只,16~20岁组雌性21只、雄性20只,通过一般指标(身体质量指数、血压、心率)、血液生化指标(血糖、血脂和离子指标)、心脏结构和功能指标比较分析,获得中老年食蟹猴心脏结构和功能相关基础数据。结果 10~15岁组和16~20岁组,一般指标比较,随着年龄增加,雌猴和雄猴血压和心率升高,雄猴血压变化具有显著性差异。两组血液生化指标比较,随着年龄增加,雌猴和雄猴血糖、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、血钙、血钠、血钾都显示升高,其中,血糖、甘油三酯(雄)、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(雄)、低密度脂蛋白胆固醇(雄)、血钙、血钠、血钾变化具有显著性差异;乳酸脱氢酶显示下降,具有显著性差异。两组心脏收缩功能比较,随着年龄增加,雌猴和雄猴左房前后内径都下降,具有显著性差异;雌猴室间隔收缩末径,左心室舒张和收缩末径显示减小,左心室舒张末容积,左心室收缩末容积,左心室质量指数下降,具有显著性差异,雄猴变化不显著。两组心脏舒张功能比较,随着年龄增加,雄猴二尖瓣舒张晚期速度下降,具有显著性差异;雌猴左室侧壁舒张早期速度升高,具有显著性差异。对雌猴和雄猴代谢指标与心脏结构和功能指标进行相关性分析,结果雌猴代谢指标与心脏结构和功能指标的相关性较弱,Γ绝对值最高不超过0.39,雄猴代谢指标与心脏结构和功能指标的相关性相对较强,Γ值绝对值最高达到0.66。结论 基于超声诊断结合代谢指标对食蟹猴心脏功能进行研究,建立中老年食蟹猴心脏结构和功能相关指标基础数据,随着年龄的增加,食蟹猴的血糖、血脂指标升高,心脏收缩和舒张功能有下降趋势,与中老年人群变化相似,为开展心脏功能相关的老年性疾病研究动物选择提供数据支撑。

磁共振细胞外容积分数联合PDFF成像在NAFLD食蟹猴模型中对早期肝脏纤维化的诊断价值

目的探讨肝脏磁共振细胞外容积分数(extracellular volume,ECV)及质子密度脂肪分数(proton density fat fraction,PDFF)在非酒精性脂肪性肝病早期肝纤维化(F1期)食蟹猴中的诊断价值｡方法纳入经肝穿病理证实的早期肝纤维化食蟹猴104只(F1期组)和10只健康对照组,对比两组肝ECV和PDFF值差异及对早期肝纤维的诊断效能｡结果F1期组ECV､PDFF值均高于对照组(P<0.001)｡ECV和PDFF与肝NAS评分呈中度相关(rECV-小叶炎症评分=0.432 P<0.001,rPDFF-脂肪变性评分=0.628 P<0.001),ECV在早期肝纤维､PDFF在脂肪定量评估中均具有良好的诊断效能(AUCECV=0.884,P<0.001,AUC-PDFF=0.991,P<0.001)｡结论MRI-ECV联合PDFF成像在NAFLD食蟹猴中对早期肝纤维化及脂肪定量评估具有巨大潜力.

成年食蟹猴视网膜结构和功能参数

目的测量成年食蟹猴视网膜结构和功能参数,探讨非人灵长类动物与正常人视网膜结构和功能参数的相似度。方法对3只5岁龄成年食蟹猴的6只眼进行彩色眼底照相、视网膜光学相干断层扫描(OCT)、视网膜电图(ERG)等在体的眼科学检查,测定猴眼视网膜黄斑中心凹区及距黄斑中心凹鼻侧、颞侧、上方、下方各1000μm、2000μm处的内外层视网膜厚度、视网膜神经纤维层(RNFL)厚度以及视盘面积、视杯面积、杯盘面积比等视盘参数和闪光ERG的生物学参数。比较不同眼别间各参数差异。参照既往已发表文献,比较各参数与正常人的相似度。结果正常成年食蟹猴的视网膜黄斑中心凹处厚度为(252.31±4.79)μm,视盘面积为(1.89±0.05)mm2,杯盘面积比为0.14±0.01,RNFL平均厚度为(103.53±0.58)μm。暗适应0.01 ERG b波振幅为(66.75±7.29)μV,暗适应3.0 ERG a、b波振幅分别为(57.15±15.01)、(122.10±25.51)μV,暗适应10.0 ERG a、b波振幅分别为(72.98±20.14)和(131.67±13.78)μV,振荡电位振幅为(49.98±10.08)μV,峰时为(30.02±5.76)ms。明适应3.0 ERG a、b波振幅分别为(9.16±2.75)和(40.43±5.57)μV。明适应闪烁光反应峰时为(26.61±1.19)ms,振幅为(24.72±5.10)μV。左、右眼各参数比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。食蟹猴中心凹区视网膜厚度、平均RNFL厚度、ERG的波形和振幅等结果与正常人的视网膜参数相近。结论成年食蟹猴视网膜结构和功能与正常人相近,其作为临床前药物研究的实验动物,可参考健康人群的视网膜参数。

新型纳米睫状神经营养因子复合物玻璃体腔注射对食蟹猴眼部的安全性——形态学评价

目的评估一种新型纳米神经营养因子复合物(NP-CNTFs)在非人灵长类动物眼内应用的安全性。方法利用纳米工艺制备包裹睫状神经营养因子(CNTF)的纳米粒。选取3只成年雄性食蟹猴,单眼玻璃体腔注射10μl NP-CNTFs(1μg/μl)作为NP-CNTFs组,对侧眼注射等体积磷酸盐缓冲液作为对照组。在注射前、注射后第3天和第7天,对食蟹猴行常规眼前节检查以评估结膜充血、前房闪辉及前房细胞等眼部症状并评分;采用彩色眼底照相观察眼底情况;采用频域光学相干断层扫描(SD-OCT)检测视网膜形态结构及厚度。结果所制备NP-CNTFs粒径为(317±3)nm,多分散性指数为0.042±0.015,Zeta电位为(-38.9±0.7)mV,具备较好的稳定性、生物利用度和生物相容性。眼前节检查显示,NP-CNTFs组在注射后第3天表现出较对照组稍明显的结膜充血、前房闪辉和前房细胞,但在注射后第7天基本恢复正常。NP-CNTFs组与对照组注射后第3天眼前节症状评分分别为(2.67±0.88)和(1.00±0.58)分,注射后第7天分别为(0.67±0.33)和(0.33±0.33)分,组间比较差异均无统计学意义(t=2.50、1.00,均P>0.05)。彩色眼底照相结果显示,NP-CNTFs组和对照组在注射后第7天眼底均正常,未见玻璃体混浊、玻璃体出血、视网膜出血或视盘水肿等异常改变。SD-OCT结果显示,NP-CNTFs组和对照组在注射后第7天均未见明显视网膜组织学改变。NP-CNTFs组和对照组视网膜神经纤维层厚度分别为(107.67±0.88)和(111.00±3.22)μm,黄斑中央凹厚度分别为(255.67±2.03)和(254.67±3.84)μm,组间比较差异均无统计学意义(t=1.43、0.50,均P>0.05)。结论新型纳米药物NP-CTNFs在食蟹猴眼内应用的安全性较好。

阿伦狄克酸对脑缺血再灌注损伤食蟹猴模型的神经保护作用

目的评价阿伦狄克酸对食蟹猴脑缺血再灌注损伤(CIRI)的治疗作用。方法9只健康雄性食蟹猴,通过阻断左侧大脑中动脉4 h后再灌注建立CIRI模型。脑梗死72 h后,随机分为模型〔20%(W∶V)Solutol HS15和10%(V∶V)PEG400〕、模型+阿伦狄克酸钙10和30 mg·kg^(-1)组,每组3只,口服给药,每天2次,连续28 d。治疗期间,通过一系列神经行为学检查,如上肢采食技能测试和笼旁行为观察,及大脑梗死体积和脑水肿体积磁共振数据评估神经损伤和恢复。结果模型组食蟹猴在CIRI后表现出自然自发性恢复。与模型组相比,模型+阿伦狄克酸钙30 mg·kg^(-1)组行为学、上肢活动和脑病变体积明显恢复(P<0.05),模型+阿伦狄克酸钙10 mg·kg^(-1)组无明显改善。结论阿伦狄克酸可缩小CIRI食蟹猴模型脑梗死面积,改善神经行为活动和骨骼肌协调功能。

单笼和配对饲养对食蟹猴血液学和血清生化、行为学和免疫应激的影响

目的 考察食蟹猴单笼和配对饲养对于动物的血液学和血生化、行为学和免疫应激指标的影响。方法 取约3岁食蟹猴,雌雄各4只,分别单笼和同性别配对饲养后,于适应期、单笼饲养第14天和第21天、配对饲养第14天和第21天采集动物血样进行血液学、血清生化和免疫应激指标检测;于单笼饲养第14~21天和配对饲养第14~21天进行行为学观察。结果 单笼和配对饲养食蟹猴的血液学和免疫应激指标均无明显差异;血清生化方面,与基础值比较食蟹猴配对饲养后的总胆红素(TBIL)有显著性降低,单笼饲养时的乳酸脱氢酶(LDH)降低明显;配对饲养后食蟹猴的正常行为和积极行为分别增加了27.93%和86.10%,异常行为减少26.31%。结论 单笼饲养和配对饲养对食蟹猴的血液学及免疫应激指标无明显影响;单笼饲养时动物LDH降低,配对饲养时动物TBIL降低,但均在正常背景值范围内;配对的饲养方式能有效改善食蟹猴的异常行为,提高动物福利。

一例笼养食蟹猴急性肾功能衰竭的诊断与治疗

急性肾功能衰竭(ARF,简称急性肾衰),是指肾小球滤过率突然或持续下降,引起氮质废物体内储留,水、电解质和酸碱平衡紊乱,所导致各系统并发症的临床综合征。本兽医团队接诊了一例食蟹猴患急性肾衰竭的病例,通过一般临床检查、血常规和生化检查,最后确诊为急性肾功能衰竭。经过兽医团队持续7d的治疗护理,该急性肾衰食蟹猴肾功能恢复正常,停药后持续跟踪观察一周,动物未见异常,已经痊愈。本文就患病猴的临床诊断、实验室诊断及相关治疗进行论述,针对治疗方法及临床用药提出建议,希望对实验猴兽急性肾衰的诊断及治疗提供参考。

昆明地区食蟹猴种群繁殖规律与繁殖率的分析

试验旨在探究目前昆明地区群体养殖条件下食蟹猴的繁殖规律与繁殖率,统计昆明地区2018—2022年食蟹猴的妊娠、出生的高低峰期及妊娠率、成活率、繁殖率。结果显示,2018—2022年间,每年下半年7~10月、12月为昆明地区食蟹猴妊娠高峰期,而每年3~5月为妊娠低谷期。2018—2022年间,每年均有连续生产,2~5月为食蟹猴出生的高峰期,6~10月为出生低谷期。昆明地区食蟹猴平均妊娠率、成活率和繁殖率分别为80.40%、90.18%和72.44%,与其他地域数据相比偏高。研究表明,每年7~12月应对雌猴更加重视,每年2~3月、5月和12月应加强对新生猴的重视。数据结果可为昆明地区食蟹猴的繁殖规律、繁殖性能和生物学的研究提供参考,并为食蟹猴养殖业的发展提供帮助。

溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1在食蟹猴体内生物分布研究

目的拟建立检测溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1在小鼠和食蟹猴各组织器官中生物分布的实时定量核酸扩增检测(q PCR)试验方法,并利用该方法对食蟹猴重复给药毒性研究中伴随生物分布(含排泄)研究收集的样本进行检测。方法针对药物的特异性基因序列,设计合成引物对和探针,摸索适宜的PCR反应条件,构建检测用标准曲线并进行方法学验证。对食蟹猴重复给药HSV-1/hPD-1长毒试验中收集的组织脏器,包括血液、性腺(睾丸/附睾或子宫/卵巢)、肾、肝脏、肺、心脏、脑、脾脏、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结、注射部位、泪腺、唾液腺、背根神经节、尿、粪进行qPCR检测,测定药物在各组织器官中拷贝数。结果成功建立标准曲线pMD18T-1093,可用于定量检测药物在小鼠或食蟹猴基因组中分布拷贝数,是通用型标准曲线。食蟹猴组织检测结果显示,药物主要分布在给药部位,少量分布至肺、脑,经过尿液排泄至体外,在其他组织脏器无分布。靶器官分布数量呈剂量依赖性增加,会伴随时间延长减少至消除,不会在体内蓄积。脑组织检出药物分布不排除与样本污染有关。结论本研究成功建立了在非临床阶段开展生物分布研究的检测技术方法。试验方法的建立过程和研究思路对于其他基因治疗药物开展生物分布研究具有一定的借鉴意义。

患腹泻症状食蟹猴寄生虫和致病菌鉴定与诊断

[目的]了解广西食蟹猴出现消瘦、腹泻、血便等症状的病因。[方法]采集20份食蟹猴粪便样本,进行寄生虫检测、分子生物学检测和细菌分离鉴定,并对分离菌进行动物致病性和药敏试验。[结果]20份粪便样本均检测出大肠杆菌,12份粪便样本检测出肺炎克雷伯氏菌,10份粪便样本检测出结肠小袋纤毛虫。10份粪便样本为三重感染,2份粪便样本为细菌二重感染。大肠杆菌和肺炎克雷伯氏菌均可导致小鼠死亡,且2种分离菌对阿米卡星、头孢他啶、头孢西丁、头孢噻呋钠均高敏。[结论]结肠小袋纤毛虫、大肠杆菌和肺炎克雷伯氏菌混合感染是引起食蟹猴消瘦、腹泻、血便的主要原因。

强直性脊柱炎食蟹猴膝关节及肠道组织病理变化分析

目的 强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis, AS)是一种免疫介导的累及中轴关节、周围关节和肠道的慢性疾病,但外周膝关节和肠道的病因病机未明。本研究旨在研究AS食蟹猴膝关节和肠道主要病理变化及机制。方法 通过组织形态学分析及免疫组化实验,研究AS外周膝关节及肠道组织的关键特征并初步分析其发病机制。结果 AS食蟹猴外周膝关节病理特征在早期主要表现为关节表面软骨侵蚀、软骨下骨暴露、关节表面呈锯齿状;晚期主要表现为软骨表层肥大软骨细胞异位增生,通过软骨成骨和纤维成骨形成骨赘,软骨基本丢失。软骨和血管中MMP-3的表达上调,引起软骨破坏并刺激血管增生。AS食蟹猴小肠绒毛严重萎缩且隐窝增生明显,空肠和回肠的黏膜肠腺中可见大量γδT细胞。结论 本研究通过对AS食蟹猴膝关节和肠道的病理分析,获得了该自发模型膝关节与肠道组织的关键特征,并提出可能的发病机制。为探讨AS的骨骼病变与外周疾病间的潜在关联,以及AS的治疗提供新的见解。

基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体在食蟹猴体内的毒性研究

目的评估基因治疗药物AAV5-脂蛋白脂酶变异体(GC304)在食蟹猴体内的毒性。方法30只食蟹猴,分为溶媒对照组(静脉注射溶媒)、GC304低剂量组(3×10^(13)vg·kg^(-1))和高剂量组(1×10^(14)vg·kg^(-1))。试验期间,所有动物进行临床症状和注射部位观察,每周进行摄食量和体重测定。在给药前后不同时间点进行免疫原性检测(包含抗AAV5结合抗体、中和抗体及抗LPL结合抗体)、血液学、血清生化、血凝和尿生化检查,并同时进行T淋巴细胞分型、细胞因子、心电、血压、体温和眼科检查。给药后4周和6个月解剖,动物进行大体观察、脏器称重和组织病理学检查,同时进行GC304的生物分布研究及表达产物测定,并在不同时间点对血液中目的基因DNA进行检测。结果受试物对食蟹猴临床症状、注射部位、体重、摄食量、眼睛各项指标、体温、血压、心电图、血凝、血清生化、T淋巴细胞分型、尿液、细胞因子、脏器重量等指标未见影响。高剂量组动物给药后4周血小板下降。与给予受试物相关的组织病理学改变为脾脏和腹股沟淋巴结生发中心活跃伴易染体巨噬细胞增多。低剂量和高剂量均可引起食蟹猴产生抗AAV5结合与中和抗体,给药后6个月2种抗体仍维持在较高的水平,但未见明显的剂量-效应关系。给予GC304后,未显著诱导食蟹猴产生抗LPL抗体。qPCR检测结果显示,受试物在食蟹猴外周血及脏器广泛分布和表达,但主要集中在肝脏。结论食蟹猴单次静脉给予GC304,动物耐受性良好,未见明显毒性反应,且主要在肝脏中分布和表达,为该药物进入临床试验提供参考。

六基因编辑猪-食蟹猴异种肾移植围手术期监测初步报道

目的探讨六基因编辑猪-非人灵长类动物异种肾移植模型的构建。方法将人源化基因编辑猪(GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD55/hCD46/hTBM)的肾脏移植给食蟹猴,观察受体存活情况及恢复血流灌注后肾脏情况。定期监测肾脏实质回声、血流变化及大小;进行血常规、肾功能检测及电解质检测;监测尿液、粪便及体质量动态变化。食蟹猴生命终点取移植肾、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、盲肠行病理学检查。结果受体术后7 d死亡。恢复血流后,肾脏灌注良好,器官质地柔软,色泽正常。受体生命终点时见肾脏腹侧有少量脓性分泌物附着,明显充血肿大,呈“大红肾”外观。术后随时间延长,肾实质回声增高,血流减少,皮质逐渐增厚,肾周及腹腔有少量积液。受体术后外周血红细胞、血红蛋白、白蛋白及血小板进行性下降,血清肌酐在术后7 d升高至308μmol/L,K^(+)变化不大。术后即有淡黄色尿液排出,术后3 h内即恢复饮食及饮水并排淡黄色成形大便1次。术后1 d内尿液颜色逐渐变淡红至恢复正常,尿常规检测结果相符。术后2 d晨起排褐色血便2次,量较多,予以奥美拉唑进行抑酸治疗,至术后4 d大便恢复正常。β2-微球蛋白在术后7 d增至0.75 mg/L。体质量增加1.7 kg。尸检病理学检查发现移植肾间质水肿出血,大量淋巴细胞和巨噬细胞浸润,小动脉壁及动脉腔内淋巴细胞浸润,有动脉炎改变;盲肠间质有淋巴细胞浸润;脾脏组织有淤血表现;其余器官未见明显异常改变。结论人源化基因编辑猪-非人灵长类动物异种肾移植模型构建获得初步成功,术后受体存活时间达1周。

贝伐珠单抗注射液对食蟹猴皮肤伤口愈合的影响

目的通过观察贝伐珠单抗注射液对食蟹猴背部皮肤伤口愈合速度及损伤皮肤组织中CD34表达的影响,验证贝伐珠单抗注射液对食蟹猴伤口愈合的延迟作用,为临床肿瘤手术患者使用贝伐珠单抗治疗时提供剂量和频次的用药参考。方法6只雄性食蟹猴采用背部全层皮肤切除术建立伤口愈合评估模型,随机选取3只食蟹猴作为生理盐水组,其余3只食蟹猴为贝伐珠单抗组。贝伐珠单抗组食蟹猴在手术后第0、4、8、11天静脉注射30 mg/kg贝伐珠单抗注射液,生理盐水组静脉注射等量生理盐水;术后进行血常规检测,并观察各组食蟹猴的伤口愈合情况,Image J软件分析伤口愈合率,用评分法对伤口状态的严重程度进行评价。4周后对6只食蟹猴伤口愈合皮肤取材,通过免疫组织化学法检查皮肤组织中CD34的表达水平。结果成功构建食蟹猴伤口愈合评估模型。术后第3天的食蟹猴血液中白细胞、中性粒细胞数量明显升高(P<0.05),第7天后白细胞数量逐渐恢复正常,而红细胞、血红蛋白、红细胞压积没有明显变化,提示动物营养状态良好。与生理盐水组相比,贝伐珠单抗组的伤口愈合率在术后7 d、28 d明显降低(P<0.01,P<0.001),愈合皮肤组织中CD34表达水平明显降低(P<0.01)。结论贝伐珠单抗注射给药可能通过抑制食蟹猴伤口新生皮肤组织中的微血管生成,延缓伤口愈合。临床中患者手术后使用贝伐珠单抗注射液时应该权衡利弊,科学合理地选择干预时间点、剂量、频次。

流式细胞术测定食蟹猴血清中抗间充质干细胞抗药抗体及其应用

目的建立一种准确、快速且灵敏度高的流式细胞法检测食蟹猴血清中抗间充质干细胞抗药抗体。方法取间充质干细胞悬液,离心、洗涤后,加入阳性质控样品溶液或待测样品溶液与间充质干细胞孵育后,加入荧光标记的Protein L-PE溶液进行孵育,洗掉未结合的Protein L-PE,流式方法检测PE平均荧光强度。结果该方法灵敏度为115.54 ng·mL^(-1),远高于非临床研究要求的250~500 ng·mL^(-1)。批内和批间的精密度<20%,其他方法验证考察项结果均符合相关接受标准。结论该方法灵敏度高,特异性强,样品操作简单,可用于快速检测食蟹猴血清中抗间充质干细胞的抗体,适用于间充质干细胞在食蟹猴体内的免疫原性研究。

BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性

目的 评价BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)在食蟹猴体内的免疫原性。方法 将食蟹猴随机分为对照组、3针组及4针组,经后肢肌肉免疫,1.0 mL/剂。3针组及4针组均接种BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗,3针组于0 d、7 d、21 d各接种1剂,4针组于0 d、3 d、7 d、14 d各接种1剂;对照组接种市售国产同类疫苗,于0 d注射2剂、7 d及21 d各1剂。初免前(0 d)及初免后7 d、14 d、28 d、35 d、49 d、63 d后肢隐静脉采血,分离血清及外周血淋巴细胞。快速荧光灶抑制实验(Rapid Fluorescent focus Inhibition Test, RFFIT)及酶联免疫斑点检测技术(Enzyme-linked Immunospot Assay, ELISPOT)分别检测血清中抗狂犬病病毒中和抗体水平和外周血淋巴细胞中细胞因子IFN-γ、IL-2的表达水平。结果 食蟹猴血清中和抗体水平于免疫前均呈阴性(抗体效价<0.5 IU/mL),3针组和对照组在初免后7~28 d呈上升趋势,于28 d达最高,4针组在14 d达最高;在初免后28 d,对照组、3针组中和抗体水平显著高于4针组;初免后35 d,3针组中和抗体水平显著高于4针组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义(P均>0.05)。3针组及4针组外周血淋巴细胞中IL-2及IFN-γ水平在7~14 d呈上升趋势,于14 d达最高,且3针组IFN-γ水平显著高于对照组,其余时间点同时间各组间差异均无统计学意义。结论 BCG-CpG-DNA佐剂人用狂犬病疫苗(MRC-5细胞)具有良好的免疫原性,具有优化狂犬病免疫接种程序的应用价值。

食蟹猴分娩行为分析

目的观察分析食蟹猴分娩行为,建立食蟹猴分娩发生的判定标准,进而结合兽医助产以提高食蟹猴活产率。方法通过对2017—2021年112只孕期140 d以上的围产期食蟹猴的监控视频进行回溯分析,观察记录分娩时食蟹猴的主要行为学表现,包括努责、摸舔产道、趴卧或躺卧、身体辗转和翻滚等行为。在此基础上建立分娩相关的行为指标的权重,详尽分析30只食蟹猴围产期的行为表现,以进行分娩判定。结果30只食蟹猴的围产期行为学验证结果显示,努责、摸舔产道、趴卧或躺卧、身体辗转和翻滚的行为指标均以不同的频次出现,其中努责和趴卧/躺卧的权重最高,权重值分别为35.5%和27.2%。可以依据这两个行为对食蟹猴的分娩发生做出精准判定。精准判定分娩发生并经兽医助产的食蟹猴平均活产率达到87.1%,明显高于无辅助自然分娩的平均活产率63.5%,二者具有显著差异(P<0.05)。结论精准的食蟹猴分娩判定结合兽医助产可显著提高实验用食蟹猴的活产率。

慢性高眼压青光眼食蟹猴巩膜及筛板生物力学特性的变化

目的探讨慢性高眼压(IOP)青光眼食蟹猴巩膜及筛板(LC)各区域生物力学特性的变化。方法选取健康雄性食蟹猴3只6眼,右眼建立慢性高IOP青光眼模型(实验组),左眼为正常对照眼(对照组)。慢性高IOP青光眼模型建模成功后获取双眼眼球并测量眼球外径,在上方、下方、鼻侧、颞侧4个象限获取视盘周围巩膜(ppSCl)组织试件并测量ppSCl厚度,对各象限ppSCl组织进行双轴拉伸、应力松弛和蠕变试验,并比较两组食蟹猴ppSCl组织弹性模量、应力松弛模量和蠕变率。获取含有巩膜的视盘组织试件并对ppSCl和LC组织进行生物纳米压痕试验,比较两组食蟹猴ppSCl和LC组织压缩模量。结果实验组食蟹猴眼球前后径和左右径均大于对照组(均为P<0.05),实验组食蟹猴ppSCl厚度小于对照组(P<0.001)。实验组食蟹猴下方象限ppSCl横向弹性模量大于轴向,上方、下方2个象限ppSCl横向瞬时模量和上方、下方、鼻侧3个象限ppSCl横向平衡模量均大于轴向(均为P<0.05)。实验组食蟹猴上方、鼻侧、颞侧3个象限ppSCl弹性模量,鼻侧、颞侧2个象限ppSCl瞬时模量,颞侧象限ppSCl平衡模量和4个象限ppSCl蠕变率,两个拉伸方向间比较差异均无统计学意义(均为P>0.05);对照组食蟹猴4个象限ppSCl横向弹性模量、瞬时模量和平衡模量均大于轴向(均为P<0.05),横向蠕变率小于轴向(P<0.05)。实验组食蟹猴ppSCl组织两个拉伸方向的弹性模量、瞬时模量和平衡模量均大于对照组(均为P<0.05),蠕变率均小于对照组(均为P<0.05)。实验组食蟹猴ppSCl组织压缩模量大于对照组(P<0.05),LC压缩模量小于对照组(P<0.05)。结论慢性高IOP青光眼改变了食蟹猴ppSCI及LC的生物力学特性,使ppSCl及LC对高IOP缓冲作用下降,导致视神经盘(ONH)对IOP抵抗力降低,最终造成ONH损伤,从生物力学角度提示为患者设定个性化目标IOP的重要性。

有关《食蟹猴缺血再灌注模型的建立及依达拉奉干预作用》一文的撤稿声明

潘梦鲜等发表于本刊2023年第2期的《食蟹猴缺血再灌注模型的建立及依达拉奉干预作用》一文(DOI:10.12300/j.issn.1674-5817.2022.165),日前被广西盛思蓝生物医药技术有限公司来信质疑部分内容不属实--未经该公司立项及伦理审批。后经三方沟通确认,作者投稿时提交的实验动物福利伦理审批件不规范。为避免潜在的版权及其他法律纠纷,本刊编辑部决定对其进行撤稿处理,并从即日起终止该文献的网络传播。