应用PeriCam PSI血流灌注散斑成像仪对食蟹猴模型舌象的初探研究

目的探索运用PeriCam PSI血流灌注散斑成像仪检测食蟹猴模型舌部血液灌注量的方法并分析其可行性及应用价值。方法(1)5只雌性食蟹猴行宫颈环扎术,制备食蟹猴子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)疾病模型,1只雌性食蟹猴开腹仅观察盆腔情况。(2)分别于术前、手术当月及术后1、2、3个月运用PeriCam PSI血流灌注散斑成像仪测量所有食蟹猴舌面、舌底血液灌注量,采用与之配套的PIMSoft软件进行数据采集与分析。结果(1)成功检测6只食蟹猴在不同时间段的舌部血液灌注量,宫颈环扎组食蟹猴术后的血液灌注量均呈现显著上升或下降,差异有统计学意义。(2)术后2月轻-中度盆腔粘连的食蟹猴舌面及舌底的血液灌注量均显著高于无粘连组,差异有统计学意义。结论运用PeriCam PSI血流灌注散斑成像仪测量食蟹猴舌部血液灌注量的方法稳定可行,可能成为疾病病证结合模型舌象的量化评价方法。

食蟹猴局灶性脑缺血模型中脑组织蛋白质组学鉴定分析研究

目的探讨食蟹猴局灶性脑缺血模型中梗死区、半影边缘区及正常组织之间蛋白质组学的差异。方法成功建立灵长类动物食蟹猴脑缺血模型4 h后,提取正常区、半影区及梗死区组织,采用强型阳离子交换法在蛋白水平进行分级,随后使用纳升级超高效液相色谱串联沃特式高分辨质谱进行数据采集。后期数据经过去冗余化和分类,并进行代谢通路分析。结果在缺血组织、半影区组织、正常组织中分别鉴定得到178、133、282个非冗余蛋白。通过KEGG通路分析,在3个区域中差异性表达的蛋白质参与最多的通路包括代谢通路、免疫反应通路和转录调节通路。参与物质代谢的蛋白在3个区域中的表达个数有明显的不同。梗死组织表达了更多种类的免疫相关蛋白,而在半影区组织中则表达了更多的转录调节因子。结论与梗死区相比,边缘区的组织损伤可逆,是使用药物治疗脑缺血的重点。脑缺血4 h后,正常组织、半影区、梗死区组织的蛋白质表达以及蛋白参与的代谢通路均具有明显差异。其结果为解释脑缺血病理机制提供了信息,为疾病治疗药物的开发提供了靶标分子。

少阳主骨方对食蟹猴自然退变膝关节骨性关节炎模型p16/Rb信号通路的影响

目的根据中医"少阳主骨"理论,研究少阳主骨方延缓关节软骨细胞衰老和退变的作用机制。方法通过X线选取13只膝关节退变的老年食蟹猴作为动物模型,随机选取1只进行病理学观察,其余食蟹猴随机分为少阳主骨方组、氨糖美辛组、生理盐水组,每组4只,连续灌胃8周后处死所有食蟹猴,对关节软骨进行病理学观察,RT-q PCR、Western-blot检测关节软骨中p16、Rb基因与蛋白的表达。结果老年食蟹猴KOA模型关节软骨病理改变符合KOA病理变化特点,三组食蟹猴Mankin评分少阳主骨方组(7.5±0.53)分、氨糖美辛组(7.75±0.71)分、生理盐水组(8.25±0.46)分,少阳主骨方组与生理盐水组间具有统计学差异(P<0.05);p16基因与蛋白的表达少阳主骨方组<氨糖美辛组<生理盐水组,具有统计学差异(P<0.05);Rb基因与蛋白的表达少阳主骨方组>氨糖美辛组>生理盐水组,具有统计学差异(P<0.05)。结论少阳主骨方可以通过p16/Rb途径延缓关节软骨细胞衰老,从而延缓关节软骨退变。

少阳主骨方介导p19^(Arf)-p53-p21^(Cip1)信号通路调控食蟹猴关节软骨退变的机制

目的根据"少阳主骨"理论,研究少阳主骨方介导p19Arf-p53-p21Cip1信号通路调控关节软骨退变的机制。方法通过X线选取13只膝关节退变的老年食蟹猴,随机选取1只进行病理学观察,其余食蟹猴随机分为少阳主骨方组、氨糖美辛组、生理盐水组,每组4只,连续灌胃8周后处死所有食蟹猴,取关节软骨进行病理学观察,RT-q PCR、Western blot检测关节软骨中p19Arf、p53、p21Cip1基因与蛋白的表达。结果老年食蟹猴KOA模型关节软骨符合KOA病理变化,3组食蟹猴Mankin评分少阳主骨方组7.38±0.52分、氨糖美辛组7.88±0.83分、生理盐水组8.38±0.74分,少阳主骨方组与生理盐水组间具有统计学差异(P<0.05);p19Arf、p53、p21Cip1基因与蛋白的表达少阳主骨方组<氨糖美辛组<生理盐水组,具有统计学差异(P<0.05)。结论少阳主骨方可以延缓关节软骨退变,调控p19Arf-p53-p21Cip1表达。

灵长类动物子宫内膜异位症病证结合模型构建初探

目的 探索食蟹猴子宫内膜异位症(简称内异症)病证结合模型构建的方法。方法 (1)6只雌性食蟹猴随机分为实验组5只、对照组1只,实验组开腹行宫颈环扎术,对照组仅开腹。(2)于术前、术中及术后第1、2、3个月运用PSI测量猴舌血液灌注量。(3)术后3个月腹腔镜探查,因均未见内异症病灶,改进建模方法:将猴分为实验组4只、对照组2只,实验组月经期收集子宫内膜组织盆腔内注射,连续使用3个月免疫抑制剂,对照组不作处理。结果 (1)宫颈环扎后3个月后腹腔镜探查,两组均未见内异症病灶。(2)猴子术后2月舌部血液灌注量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)每只猴的舌面及舌底血液灌注量变化趋势一致。(4)改进建模方案后3个月腹腔镜探查示,实验组重度盆腔粘连、子宫表面血管增生并充血明显,一只猴可见内异症病灶,对照组则无。结论 收集子宫内膜盆腔内注射、加用免疫抑制剂可以构建食蟹猴内异症模型。运用PSI测量猴舌部血液灌注量的方法稳定可行,有望成为疾病病证结合模型舌象的量化评价方法。