饱和磷脂脂质体的室温下制备及其性质的研究

目的 考察室温下用饱和磷脂制备脂质体的新方法 (加入特殊的附加剂 )及其对以蛋白多肽类为主药的包封情况 ,并研究了脂质体的体外性质。方法 通过加入特殊的附加剂 ,用反相蒸发 超声分散法制备脂质体 ,并初步考察了其室温放置的稳定性 ;以尿激酶为例 ,考察所得脂质体的粒度分布和形态 ;对不同的蛋白多肽类药物进行包封 ;以阿霉素为模型药物 ,考察脂质体在PBS和小牛血清中的泄漏。结果 附加剂DSPE PEG 2 0 0 0只需 1%的用量(占磷脂的摩尔比 ) ,即可用饱和磷脂在室温下超声 1min制得脂质体 ;所得脂质体平均粒径在 10 0nm以下 ,形态圆整 ,室温放置稳定 ;对胰岛素和水蛭素的包封率与普通脂质体相近 (2 3%) ,对尿激酶包封率高达 (6 5 4± 2 6 ) %;体外泄漏缓慢。结论 提出的制备方法条件温和 ,产品稳定性好 ,非常适合高分子量蛋白类药物 ,并可获得较高的包封率 ,是一种很有前景的脂质体制备方法。

磷脂多不饱和脂肪酸抑制兔耳增生性瘢痕

背景:多不饱和脂肪酸有抑制细胞炎症反应及免疫功能的作用,增生性瘢痕的形成与炎症、细胞免疫、细胞因子有着密切关系,但目前尚无应用多不饱和脂肪酸防治增生性瘢痕的实验研究。目的:探讨磷脂多不饱和脂肪酸对兔耳增生性瘢痕的抑制作用。方法:在9只新西兰大白兔兔耳腹侧做直径1cm的圆形全层皮肤缺损创面,每侧6个,共108个,其中形成增生性瘢痕92个,瘢痕形成率为85%。实验分3组:每只兔耳靠前3个创面涂磷脂多不饱和脂肪酸霜,右耳靠后3个创面涂多磺酸黏多糖乳膏,创面上皮化后立即涂药,每日1次,左耳靠后3个创面自然愈合。分别在术后28,42,63,90d,观察创面的愈合情况;显微镜下观察瘢痕组织的厚度、胶原纤维和成纤维细胞密度;免疫组织化学染色检测胶原纤维的表达。结果与结论:涂抹磷脂多不饱和脂肪酸霜和多磺酸黏多糖乳膏可使增生性瘢痕体积缩小、厚度变薄、成纤维细胞密度减小、胶原纤维表达减少。尤以磷脂多不饱和脂肪酸霜的效果最为明显。说明磷脂多不饱和脂肪酸可抑制兔耳增生性瘢痕的形成,减轻瘢痕的增生程度。

羊水磷脂酰甘油及饱和卵磷脂测定的意义

目的 了解羊水中磷脂酰甘油 (PG)及饱和卵磷脂 (SPC)对新生儿呼吸窘迫综合征 (RDS)的预测价值。方法 对 12 3例 30～ 40孕周的产妇 ,测定羊水PG和SPC ,并跟踪随访新生儿情况。结果 两者对新生儿呼吸窘迫综合征的敏感性及特异性均相似。结论 两者均为预测新生儿呼吸窘迫综合征的较好方法 ,但PG测定更简便实用、易推广。

光化学反应-串联质谱法鉴定细胞中不饱和卵磷脂双键的位置

以二苯甲酮(Benzophenone,BP)为光化学反应的反应物,建立了乳腺细胞中不饱和卵磷脂双键位置和双键异构体相对含量的在线光化学反应-脉冲直流电喷雾串联质谱(PB-pulsed-dc-ESI-MS/MS)的检测方法。通过三相萃取法提取细胞中的脂类,在254 nm紫外光的照射下,使不饱和卵磷脂中的CC和BP中的羰基发生特异性的环加成反应(Paternó-Bǜchi,PB反应),将反应后的PB产物通过非接触式的脉冲直流电喷雾(Pulsed directed current electrospray,pulsed-dc-ESI)方式电离,并进行低能碰撞裂解得到二级串联质谱(MS/MS),从得到的二级谱图的子离子中可以获得双键位置以及双键异构体相对含量的信息。检测了癌细胞MCF-7和正常细胞MCF-10A中8种不饱和卵磷脂中的双键位置,且对其中4种双键异构体的相对含量进行分析,发现PC 16∶0_18∶1中Δ9异构体的含量在两种细胞中差异不明显,PC 18∶0_18∶1和PC 18∶1_18∶1中Δ9异构体的含量略有差异,LPC 18∶1中Δ9异构体的含量在癌细胞和正常两种细胞中差异比较明显(56.0%±1.3%vs.71.7%±6.8%)。本方法快速简易,可用于分析双键位置及双键异构体相对含量,有望对不同细胞状态以及不同疾病状态进行鉴别。

姜黄素类成分富集部位对高脂血症小鼠血清多不饱和鞘磷脂的改善作用

目的 研究姜黄素类成分对高脂血症小鼠血清中多不饱和鞘磷脂的改善作用。方法 整合利用高分辨飞行时间液质联用仪(LC-QTOF-MS/MS)和三重四级杆线性离子阱液质联用仪(LC-QTRAP-MS/MS)建立小鼠血清中多不饱和鞘磷脂的定性和定量分析方法;采用高脂饲料喂养4周诱发小鼠高脂血症模型;以10和20 g·kg^(-1)·d^(-1)(按生药材量计算)富含姜黄素类成分的部位提取物连续灌胃给药4周,观察高脂血症模型小鼠血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的变化;检测给药后小鼠血清中多不饱和鞘磷脂相对含量的变化。结果 姜黄素类成分能够显著降低由高脂饲料诱发的高脂血症小鼠血清TC、LDL-C水平;与正常小鼠比较,高脂血症模型小鼠血清中多不饱和鞘磷脂相对含量显著下降,而姜黄素类成分给药能够显著上升小鼠血清多不饱和鞘磷脂类成分。结论 姜黄素类成分对高脂血症小鼠血清中多不饱和鞘磷脂的回调作用可能涉及姜黄调节脂代谢紊乱的药效作用机制。

不同蜂花粉中磷脂成分的比较

采用薄层色谱、高效液相色谱分离测定蜂花粉中磷脂,并分析磷脂中不饱和脂肪酸的含量。结果表明:茶花、葵花、玫瑰、籽瓜、益母草蜂花粉中富含磷脂,其中茶花蜂花粉中总磷脂含量最高,主要由磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱及溶血卵磷脂组成;脂肪酸组成分析表明,蜂花粉中磷脂多不饱和脂肪酸含有较高含量的亚油酸和亚麻酸,5种蜂花粉磷脂中多不饱和脂肪酸含量均在50%以上,其中茶花蜂花粉磷脂中亚麻酸在脂肪酸含量中最高达56.0%。蜂花粉中多元不饱和磷脂具有广阔的开发前景。

儿童分泌性中耳炎患者咽鼓管及鼻咽部表面活性物质检测

目的检测并分析分泌性中耳炎(secretory otitis media,SOM)患儿咽鼓管和鼻咽部表面活性物质。探讨表面活性物质与SOM发病机制的关系。方法收集28例分泌性中耳炎患儿(SOM组)和32例非分泌性中耳炎患儿(非SOM组)咽鼓管及鼻咽部灌洗液,Mason法检测饱和磷脂酰胆碱、Pyrogallol法检测总蛋白,对结果进行分析。结果 SOM组鼻咽部及咽鼓管中饱和磷脂酰胆碱含量为5.500 4±2.798mg/L,总蛋白含量为3.542±0.764 5mg/L,非SOM组饱和磷脂酰胆碱含量为13.081±1.409 3mg/L,总蛋白含量为9.043 6±3.078 7mg/L,SOM组表面活性物质含量显著低于非SOM组(均为P<0.01)。结论分泌性中耳炎患儿咽鼓管及鼻咽部表面活性物质含量降低,表面活性物质含量降低可能参与了分泌性中耳炎的发病机制。

羊水中饱和卵磷脂测定的意义

应用改良Ｔｓａｉ法测定５０例正常妊娠晚期及２１例临产妇女羊水中饱和卵磷脂（ＳＰＣ）的含量。结果：羊水中ＳＰＣ随孕周增加而增加，临产后增加更明显。提示：羊水ＳＰＣ测定是一种特异性、敏感性、准确性较高的方法，能在妊娠晚期预测新生儿呼吸窘迫综合征。

雾化氟碳化合物对急性肺损伤兔肺表面活性物质的影响

目的探讨雾化PFC通气对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)兔肺表面活性物质的影响。方法24只健康日本大白兔随机分为3组,每组8只:正常对照机械通气组(C组);LPS肺损伤机械通气组(MV组);LPS肺损伤雾化PFC通气组(PFC组)。经中心静脉导管滴注LPS2mg/kg诱导ALI模型,检测基础值、肺损伤及治疗后1h、2h、4h动脉血气,期间用多导生理监测仪连续描记血压和心率的变化。通气结束后行支气管灌洗,测量灌洗液内双饱和二棕榈酸磷脂酰胆碱(DPPC)、大小聚集体比值(LA/SA值)及灌洗液和血清内肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)的浓度。结果PFC组经雾化PFC通气后,PaO2明显提高(P<0.01),各时点PaO2高于MV组;与MV组相比,PFC组灌洗液内的SP-A、DPPC浓度和LA/SA值明显增高(P<0.01),而血清内SP-A的浓度降低(P<0.01)。结论雾化PFC通气可改善LPS诱导的ALI兔的肺功能,这可能同雾化PFC可促进肺表面活性物质的分泌有关。

冠心病患者血清磷脂多不饱和脂肪酸谱与炎症关系

目的探讨冠心病患者血清磷脂多不饱和脂肪酸谱与炎症关系。方法选择2016年6月至2018年6月在郑州中心医院接受治疗的100例冠心病患者(观察组)及100例同期健康体检者(对照组)进行研究。受试者均经禁食12 h后抽取空腹外周静脉血5 mL,进行炎症因子、血清饱和脂肪酸与不饱和脂肪酸检测。结果观察组超敏C反应蛋白(hs?CRP)、白细胞介素?6(IL?6)、肿瘤坏死因子α(TNF?α)水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血清磷脂中饱和和单不饱和脂肪酸的组成差异无统计学意义(P>0.05)。与健康对照组相比,观察组患者亚油酸(LA)浓度和n?6/n?3比值高于对照组,观察组患者的EPA水平、n?3 PUFA总量和EPA/AA比值低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析结果显示LA浓度,n?6/n?3比值与各炎症因子均呈显著正相关,差异有统计学意义(r>0,P<0.05),EPA水平、n?3 PUFA总量、EPA/AA比值与各炎症因子水平均呈显著负相关,差异有统计学意义(r<0,P<0.05)。结论冠心病患者LA浓度,n?6/n?3比值与各炎症因子均呈显著正相关,EPA水平、n?3PUFA总量、EPA/AA比值与各炎症因子水平均呈显著负相关。

苦丁茶对高胆固醇脂血症小鼠血清多不饱和溶血磷脂酰胆碱的改善作用

目的:研究苦丁茶水提取物对高胆固醇脂血症小鼠血清中多不饱和溶血磷脂酰胆碱的改善作用。方法:采用LCQTOF-MS/MS和LC-QTRAP-MS/MS建立小鼠血清中多不饱和溶血磷脂的液质联用定性和定量分析方法;采用高脂饲料喂养30 d诱发小鼠高胆固醇脂血症模型;以5,10,15 g·kg^(-1)·d^(-1)(按生药材量计算)苦丁茶水提取物连续灌胃给药4周,观察高胆固醇脂血症小鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的变化;观察小鼠肝脏油红O染色后的病理切片;同时,利用上述建立的液-质联用分析方法检测给药后小鼠血清中多不饱和溶血磷脂酰胆碱相对含量的变化。结果:苦丁茶水提取物能够显著降低由高脂饲料诱发的胆固醇脂血症小鼠血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇;对小鼠肝脏的脂肪堆积具有明细的抑制作用;同时,与正常小鼠相比,模型小鼠血清中的多不饱和溶血磷脂酰胆碱的相对含量显著下降,而苦丁茶水提取物对该类脂质成分具有显著的回调作用。结论:苦丁茶水提取物对高胆固醇脂血症小鼠血清中多不饱和溶血磷脂的回调作用可能涉及苦丁茶降血脂的药效作用机制,值得深入研究。

幼猪机械通气中异氟醚或七氟醚混合一氧化氮吸入的安全性

目的研究吸入异氟醚或七氟醚混合一氧化氮(NO)在幼猪机械通气中的安全性。方法36头幼猪随机分为6组:Ⅰ组(对照组):单纯机械通气;Ⅱ组(NO组):吸入20ppmNO;Ⅲ组(异氟醚组):吸入1.3MAC异氟醚;Ⅳ组(异氟醚+NO组):吸入1.3MAC异氟醚及20ppmNO;Ⅴ组(七氟醚组)吸入1.3MAC七氟醚;Ⅵ组(七氟醚+NO组)吸入1.3MAC七氟醚及20ppmNO。用麻醉机行间歇正压通气4h,测定各组机械通气前、机械通气1、2、3、4h(T0、T1、T2、T3、T4)的呼吸频率(RR)、呼吸系统总顺应性(Crs)、气道压力(Paw)、潮气量(VT)、分钟通气量(MV)以及呼末二氧化碳分压(PETCO2);测定T0、T2、T4时点动脉血高铁血红蛋白(MetHb)和亚硝酸根(NO2-/NO3-)水平;处死动物后比较各组肺组织湿/干重比、支气管肺泡灌洗液(BALF)中饱和磷脂/总磷脂(DSPC/TPL)及饱和磷脂,总蛋白(DSPC/TP)、肺表面张力和白细胞计数,并行肺组织损伤评分。结果Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组BALF中DSPC/TP及肺表面张力较Ⅰ组下降(P<0.05),通气结束时Crs较通气前下降(P<0.05),而Ⅱ组无显著性变化(P>0.05);与通气前比较,各组通气结束时MetHb与:NO2-/NO3-水平无变化,各组BALF中白细胞计数、肺组织损伤评分、肺泡扩张度和湿/干重比之间比较差异无统计学意义。结论1.

甲基强的松龙对瓦斯爆炸致伤大鼠肺泡表面活性物质的影响

目的探讨瓦斯爆炸损伤伤大鼠肺泡表面活性物质(PS)系统的机制以及甲基强的松龙(MP)的影响。方法制备瓦斯爆炸伤大鼠动物模型,伤后给予MP腹腔注射,观察电镜下动物模型肺脏的形态学超微结构以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中PS组分的变化,检测其血清及BALF中肿瘤坏死因子α(TNFα)水平。结果瓦斯爆炸伤后大鼠肺泡Ⅱ型细胞变性、脱落,出现核固缩,胞质局灶性溶解(第1天最明显);BALF中饱和卵磷脂、总磷脂、饱和卵磷脂与总蛋白的比值明显下降(第1天最明显);血清及BALF中TNFα水平呈逐渐升高趋势。MP可增加BALF中饱和卵磷脂、总磷脂、饱和卵磷脂与总蛋白的比值,同时降低血清及BALF中TNFα水平。结论瓦斯爆炸伤致动物肺部PS系统异常,TNFα参与了瓦斯爆炸所致肺损伤的病理生理过程并损害了肺PS系统。MP可降低血清及BALF中TNFα水平并改善肺PS系统的损伤。