川西高海拔地区饲用黄芪根瘤菌的遗传多样性

为了揭示川西高海拔地区(四川甘孜藏族自治州和阿坝藏族羌族自治州)原生野生饲用黄芪根瘤菌的遗传多样性,为筛选优良菌株提供依据,采用纯培养法从该地区部分饲用黄芪植物根瘤中分离纯化根瘤菌;通过BOXAIR、16S rDNA-RFLP及PCA(principal component analysis)分析饲用黄芪根瘤菌的遗传多样性。结果表明,从川西高海拔地区7个县15个采样点获得10种饲用黄芪植物的根瘤,共分离纯化出36个根瘤菌菌株;在相似系数82.4%的16SrDNAPCR-RFLP分析中,所有供试菌株均与参比菌株完全分开,供试菌株聚成8个遗传群(SCAU509,SCAU553单独分开);在相似系数83.2%的BOX-PCR分析中,饲用黄芪根瘤菌36个供试菌株和14个参比菌株聚成10个遗传群。饲用黄芪根瘤菌16S rDNA Simpson遗传多样性指数D=0.949。研究显示川西高海拔地区(四川甘孜藏族自治州和阿坝藏族羌族自治州)饲用黄芪根瘤菌具有丰富的遗传多样性。

青藏高原横断山区饲用黄芪根瘤菌的抗逆性及系统发育分析

分离纯化青藏高原横断山区(四川甘孜藏族自治州和阿坝藏族羌族自治州)原生野生饲用黄芪根瘤菌,为优良菌株的筛选提供种质资源。采用纯培养法从该地区部分饲用黄芪植物根瘤中分离纯化根瘤菌;通过16S rDNA序列同源性分析确定菌株的系统发育地位;通过测定菌株的耐盐性、初始pH生长范围及生长温度范围来分析饲用黄芪根瘤菌的抗逆性。从青藏高原横断山区7个县15个采样点获得10种饲用黄芪植物的根瘤,共分离纯化出36个根瘤菌菌株。16S rDNA序列同源性系统发育分析表明,36个菌株分别为根瘤菌属-土壤杆菌属(Rhizobium-Agrobacterium)30株、苍白杆菌属(Ochrobactrum)5株、中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)1株,共3个群。生理性状测定试验表明,36个根瘤菌菌株中20株能在4~45℃的恒温条件下生长,15株能在4~50℃的恒温条件下生长,仅供试菌株SCAU509的最高耐受温度不能超过37℃,所有菌株能在经过60℃处理10 min后置28℃恒温条件下生长;除SCAU495只能在pH 6~8的培养基上生长,SCAU509只能在pH 5~8的范围内正常生长外,其余34株均能在pH 4~10的培养基上生长;SCAU509只能在1%NaCl以下的YMA培养基上生长外,其余供试菌株中最高能耐受1%、2%、3%、4%、5%、6%NaCl的数量分别为2、7、6、10、8和2株。本研究表明,青藏高原横断山区(四川甘孜藏族自治州和阿坝藏族羌族自治州)饲用黄芪根瘤菌中多数菌株对高盐、高温、低温及过酸过碱环境均具有较强的耐受能力。