饲鸽者血清中细胞因子及基因多态性的检测

揭示饲鸽者肺 (PBL )的细胞因子谱及其基因多态性在该病的发病机制中的作用。采取 14 9个饲鸽者的血样 ,根据临床症状以及沉淀抗体出现与否分为四组 :A组 /B组 (抗体阳性、有症状 /无症状 )、C组 /D组 (抗体阴性、有症状 /无症状 )。应用ELISA法检测各组血清细胞因子浓度。应用PCR扩增技术测定TNF α 30 8和IL 10 10 82的基因多态性。与C组 /D组相比 ,A组中Th1细胞因子 (IL 2 )、Th2细胞因子 (IL 4、IL 5、IL 6、IL 10 )和GM CSF浓度有显著的升高。B组中仅Th1细胞因子 (IL 2 )和Th2细胞因子 (IL 4、IL 6、IL 10 )浓度有显著的升高。除个别细胞因子外 ,A组与B组、C组与D组之间细胞因子的表达无显著性差异。各临床组间TNF α 30 8、IL 10 10 82基因型的分布以及不同的基因型间血清TNF α和IL 10的浓度无显著性差异。PBL血浆中IL 2、IL 4、IL 5、IL 6、IL 10和GM CSF的量显著增加 ,细胞因子与抗体相关 ,尤以Th2细胞因子更为显著。在TNF α和IL 10的基因多态性与PBL易感性之间未发现统计学上的关联。

Notch信号通路调控巨噬细胞极化在大鼠纤维化型饲鸽者肺的作用

目的探讨Notch信号通路调控巨噬细胞极化方向与大鼠纤维化型饲鸽者肺的关系。方法选取正常SD大鼠(Ctrl组),通过观察病理、CT,检测纤维化标记物构建纤维化型过敏性肺炎大鼠模型(M组),予以γ分泌酶(DAPT)抑制Notch信号通路(M+DAPT组),通过荧光定量PCR技术检测阻断Notch信号通路对巨噬细胞极化方向的影响。结果正常大鼠气道内滴注致敏原冻干粉20周后,病理及CT可见纤维化形成,且α-SMA、TGF-β1表达水平增高,证实造模成功;M组与Ctrl组比较:纤维化型过敏性肺炎大鼠肺组织Notch信号通路关键蛋白配体,DLL1、DLL4、JAG1、JAG2及受体Notch1、Notch2的蛋白表达水平增高;应用DAPT抑制Notch信号通路后DLL4、JAG1、JAG2及受体Notch1均下降(P<0.05);M组较Ctrl组比较:M1型巨噬细胞标记基因肿瘤坏死因子(TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达量下降;M2型巨噬细胞标记基因甘露糖受体C2(Mrc2)、重组人精氨酸酶1(Arg-1)mRNA表达量升高(P<0.05),应用DAPT抑制剂后TNF-α、iNOS基因mRNA的相对表达量升高,Mrc2、Arg-1基因mRNA的相对表达量降低(P<0.05)。结论Notch信号通路调控巨噬细胞极化方向,给予DAPT抑制剂后,抑制巨噬细胞向M2型极化,有效延缓纤维化形成。

维吾尔族饲鸽者肺血清总IgE及蛋白电泳分析

目的了解维吾尔族饲鸽者肺患者血清总Ig E、蛋白电泳谱的情况及临床意义。方法病例分析新疆省人民医院确诊的20例维吾尔族饲鸽者肺患者和同期20例维吾尔族健康体检者血清总Ig E及蛋白电泳谱情况。结果两组比较血清总Ig E差异无统计学意义(P>0.05);维吾尔族饲鸽者肺患者血清蛋白电泳特征为白蛋白比例减少,γ球蛋白比例增高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清总Ig E及蛋白电泳检测对维吾尔族饲鸽者肺病临床诊断,可提供一定的参考价值。

饲鸽者肺的研究进展

饲鸽者肺（pigeon breeder＇s disease,PBD）是敏感个体反复长期吸入鸽子的分泌排泄物后引起远端支气管及肺泡发生超敏反应而形成的一种外源性过敏性肺泡炎（extrinsic allergic alveolitis EAA）或过敏性肺炎（hypersensitivity pneumonitis,HP）[1]。EAA是指敏感个体反复吸入某种抗原所致的远端支气管和肺泡的肉芽肿性炎,包括PBD,农民肺,蘑菇肺,化学工人肺等。

饲鸽者肺5例临床分析

外源性过敏性肺泡炎（Extrinsic Allergic Alveolitis,EAA）,又称为过敏性肺炎（Hypersensitivity Pneumonitis,HP）,它是由于人体吸入各种抗原性有机物质而引起的一种间质性肺病。

1例罕见的饲鸽者侵袭性肺曲霉菌感染的病例报告

本文通过1例临床药师在一线临床工作中遇到的饲鸽者侵袭性肺曲霉菌感染的病例,着重介绍了饲养鸽子与侵袭性肺曲霉菌感染的关联性,而此关联性在临床诊断中常常被忽略,因为国内尚无类似病例的报道。并且详尽介绍了目前各指南推荐的侵袭性肺曲霉病治疗方法以及疗程。该病例患者经医师和临床药师协作治疗,后情况好转,治疗有效。

饲鸽者肺患者发生肺纤维化与外周血Th1/Th2失衡关系分析

目的 探讨饲鸽者肺慢性期肺纤维化患者与Th1/Th2失衡的关系.方法 收集2017年6月-2018年3月在喀什地区调查时确诊的20例饲鸽者肺伴肺纤维化患者为病例组I,同期确诊的20例急性期、亚急性期无纤维化的饲鸽者肺患者为病例组II,20例饲养鸽子未发病者为阴性对照组,20例未饲养鸽子健康体检者为正常对照组,收集资料并抽取外周血标本,用Elisa研究饲鸽者肺患者的IFN-γ 和IL-4、IL-10表达及Th1/Th2失衡.结果 Elisa法检测INF-γ 病例组II明显高于其余三组(P<0.01),而其余三组间差异无统计学意义(P>0.05);IL-4在病例组I中较其余三组增高,病例组II较其余三组降低,差异有统计学意义(P<0.05);IL-10在病例组I的表达明显高于其余三组间,差异有统计学意义(P<0.05),其余三组间差异无统计学意义.结论 饲鸽者肺患者慢性期发生肺纤维化后炎症类型由Th1优势转变为Th2优势,在疾病演变过程中Th2型炎症因子IL-10先于IL-4增高,可能与某些分泌IL-10的细胞有关参.

维吾尔族饲鸽者肺患者外周血Notch4基因甲基化分析

目的通过检测维吾尔族饲鸽者肺外周血Notch4基因甲基化程度探讨其临床意义。方法根据纳入及排除标准连续收集2015-2016年在新疆喀什病例资料及血样标本(总纳入60例,其中20例确诊维吾尔族饲鸽者肺患者为病例组,同期20例维吾尔族饲养鸽子未发病者为阴性对照组,同期20例维吾尔族未饲养鸽子健康体检者为正常对照组。对所收集血样标本进行常规提取DNA,亚硫酸氢盐转化,PCR扩增,体外转录和RNase A特异性酶切,并行基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术检测Notch4基因甲基化情况。结果检测Notch4片段的Cp G位点总数6个(Cp G_1,Cp G_2/3,Cp G_4,Cp G_5,Cp G_6),Cp G_1,Cp G_4,Cp G_5,Cp G_6在三组样本中的甲基化率分布差异无统计学意义(P>0.05)。Cp G_2/3在三组样本甲基化率分布差异具有统计学意义(P<0.05)。病例组Cp G_2/3甲基化率高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),病例组与阴性对照组Cp G_2/3甲基化率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Notch4基因甲基化通过炎症反应及信号通路调控肺纤维的发生发展。

饲鸽者肺的最新研究进展

过敏性肺炎(Hypersensitivity Pneumonitis,HP)是敏感个体吸入环境中各类抗原后诱发的炎症反应性疾病。饲鸽者肺(Pigeon breeders’lung,PBL)是一种最常见的过敏性肺炎,约占60%[1]。PBL是敏感个体反复吸入鸽子羽毛、皮屑、粪便等脱落物蛋白后[2,3],远端支气管及肺泡发生的过度免疫应答[4],一项针对爱鸽俱乐部人员的调查显示饲养鸽子者过敏性肺炎的患病率约8~30%[5]。敏感个体经常因“气喘、气短、咳嗽”等症状反复在当地就诊,误诊为“哮喘、结核”等疾病,久治不愈,出现肺间质纤维化、呼吸衰竭、肺心病[6],导致患者失去劳动能力甚至生活自理能力,严重影响患者的健康,给家庭带来极大负担。研究结果表明,我们目前对PBL的认识远远不足。近年来,国际间质病专家提出,PBL诊断应结合临床、影像学、功能性和生物学标准等结果综合评估,来提高PBL的诊断率及改善患者预后[7]。本文总结最新相关研究,做一综述,为进一步研究饲鸽者肺的发病机制及诊治提供新的思路。

饲鸽者肺SD大鼠模型的建立及病理表现研究

目的:建立饲鸽者肺SD大鼠模型,比较不同时期饲鸽者肺模型的病理表现。方法:选用清洁级健康SD大鼠36只,随机分为两组,对照组12只,实验组24只。对照组给予0.9%氯化钠溶液雾化吸入,实验组给予鸽子粪便、羽毛、皮屑等脱落物制备冻干粉溶液雾化吸入,2 h/d,共16周。造模第1、2、4、12、14周,实验组随机选取3只大鼠取组织标本。第16周处死全部大鼠。结果:造模第1周出现急性期表现,第2~14周均为亚急性期表现,第16周开始出现慢性期表现,实验组和对照组病理表现比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论:鸽子粪便、羽毛、皮屑等脱落物的蛋白提取物可以构建不同病理分期的饲鸽者肺SD大鼠动物模型,可根据需求选择不同的时间造模。

1例饲鸽者肺的护理

女，16岁，因反复低热20d，咳嗽1周于2003年7月入院。检查：体温38．5℃，咽充血，双肺呼吸音粗糙。可闻及少许干湿性罗音。血常规及胸透均正常。入院初步诊断为支气管炎。入院后经多种抗生素及时对症治疗2周，患者持续发热（38-38．9℃），仍咳白色粘痰，伴轻度呼吸困难及口唇发绀，肺部闻及湿罗音，实验室检查：OT及PPD试验阴性，痰液中未发现结核菌，血沉及嗜酸性粒细胞计数正常有中度贫血及肝功能异常；胸片示两肺粟粒状阴影。此期间，观察发现患者经常请假回家休息，但每次从家中返回医院时症状加重伴鼻塞，流鼻涕，喷嚏。再次详细追问病史，家中饲养20多只信鸽，患者与鸽子近期有密切接触史。

鸽舍气溶胶与饲鸽者肺功能变化相关性分析

目的探讨鸽舍气溶胶的大小和浓度对饲鸽者肺功能产生的影响。方法2021年12月~2022年1月从新疆维吾尔自治区吐鲁番市3个村庄居家饲养环境随机抽取的150位饲鸽者纳入接触组,同村未接触鸽子的健康体检者150例纳入对照组,详细询问和记录研究对象的相关信息,完善肺功能检查,并对周围环境气溶胶的浓度及大小进行了检测,分析不同浓度及大小的鸽舍气溶胶对饲鸽者肺功能(FEV 1、FVC、FEV 1%、FVC%、FEV 1/FVC)产生的影响,并分析肺功能与饲养鸽子年限、饲养数量、每日接触时间之间的相关性。结果接触组鸽舍气溶胶浓度高于对照组,接触组与对照组肺功能进行比较,可发现接触组FVC、FEV 1%、FVC%等肺功能指标均低于对照组,且组间比较差异有统计学意义(P<0.05);气溶胶浓度与FEV 1、FVC、FEV 1%、FVC%、FEV 1/FVC等肺功能指标呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05)。每日和鸽子接触时间与肺功能各指标呈负相关,差异有统计学意义。饲养年限与FEV 1呈负相关,差异有统计学意义。结论鸽舍气溶胶浓度越高,饲养年限、每日与鸽子接触时间越长,饲鸽者肺功能相关指标下降越明显。

维吾尔族饲鸽者肺与补体C5含量的关系研究

目的探讨血清补体C5含量在维吾尔族饲鸽者肺中的变化及意义。方法根据纳入及排除标准收集受试对象资料及血清标本92例(病例组纳入在2012年1月至2013年12月期间由新疆维吾尔自治区人民医院呼吸与危重症医学科确诊的维吾尔族饲鸽者肺患者32例,阴性对照组收集同期饲养鸽子未患病者30例,正常对照组为未饲养鸽子的健康体检者30例),对所有对象取全血标本,对全血标本进行酶联免疫分析(ELISA)法测定血清补体C5的含量。结果 (1)病例组和阴性对照组与正常对照组比较:血清中补体C5明显增高(P<0.05);(2)病例组中血清补体C5水平比阴性对照组高(P<0.05)。结论本文检测了血清补体C5含量与维吾尔族饲鸽者肺的相关性。发现血清补体C5含量在维吾尔族饲鸽者肺患者中较阴性对照组和健康对照组均升高,表明C5在PFL的发病机制中有一定的免疫反应调节作用。

HLA-A基因甲基多态性与维吾尔族饲鸽者肺发生风险的关系

目的研究南疆维吾尔族饲鸽者肺发生风险与人类白细胞抗原(HLA)基因甲基多态性的关系。方法选择2019年1月至2021年10月在南疆地区养殖鸟禽类1年以上的维吾尔族饲鸽者,其中维吾尔族患饲鸽者肺的30例作为患病组,30例维吾尔族饲养鸽子未患病为阴性对照组,同时选择维吾尔族健康体检者30例作为正常对照组。抽取空腹静脉血4 ml,离心收集血浆和全血细胞并保存待用。应用Sequenom Mass ARRAY Methylation方法对cg1408363基因甲基化水平进行检测。结果从抗原暴露情况分析,发病患者在抗原中有着较长时间暴露,这表明伴随抗原暴露时间越长,饲养鸽子数量越多,出现饲鸽者肺的可能性越大。患病组CpG岛甲基化位点为10的人数、CpG岛甲基化率20%~40%人数明显高于阴性对照组、正常对照组(P<0.05),不同性别及不同年龄段研究对象的HLA-A基因甲基化状态无明显差异(P>0.05)。对3组HLA-A基因11个CpG位点单位差异进行研究,结果显示HLA-A基因CpG5基因位点上存在差异(Z=-2.102,P=0.028)。结论饲鸽者肺患者HLA-A基因CpG5位点甲基化水平异常降低,HLA-A基因甲基化水平与饲鸽者肺发生有着密切联系。

维吾尔族饲鸽者肺IFN-γ及IL-4基因多态性研究

目的：探讨IFN-γ（rs2069705）及IL-4（rs2070874）基因单核苷酸多态性与维吾尔族饲鸽者肺的关系。方法：根据纳入及排除标准收集病例资料及血标本（总纳入92例,其中患病组32例,阴性对照组30例,正常对照组30例）,对纳入者的全血标本进行DNA提取,根据UCSC数据库中SNP位点附件的序列信息,利用Mass ARRAY技术平台设计引物、PCR扩增、SAP、单碱基延伸、点样质谱检测IFN-γ及IL-4基因进行多态性分析,采用SPSS18.0软件进行统计分析,基因型及等位基因分布频率的比较采用X2检验。结果：IFN-γ（rs2069705）基因存在CC、CT、TT三种基因型,IL-4（rs2070874）基因存在CC、CT、TT三种基因型,IFN-γ（rs2069705）CC、CT、TT基因型在患病组、未患病组、对照组中分布频数以及C、T等位基因在各组中分布频率比较均无明显差异（X2=2.607,P=0.626;X2=2.244,P=0.326）;并进行基因型分布频率的组间两两比较均无明显差异（X2=1.144,P=0.564;X2=0.534,P=0.766;X2=2.0,P=0.368）。IL-4（rs2070874）CC、CT、TT三种基因型在患病组、未患病组、对照组中分布频数以及C、T等位基因在各组中分布频率比较均无明显差异（X2=6.614,P=0.158;X2=5.408,P=0.067）;但进行基因型分布频率组间两两比较发现患病组与未患病组中比较差异有统计学意义（X2=6.67,P=0.036）;患病组中纯合子TT数量较纯合子CC及杂合子CT数量相比较,纯合子TT发生PBL的相对危险度OR（95%CI）分别为0.11（0.02~0.68）、0.16（0.03~0.79）,P值分别为0.018、0.025,差异有统计学意义;纯合子CC与杂合子CT比较差异无统计学意义（P=0.402;P=0.134）。结论：IFN-γ（rs2069727）基因多态性可能参与维吾尔族PBL的发生发展,但未在PBL发病机制中起作用,需要加大样本量进一步证实。而IL-4（rs2070874）基因多态性可能参与维吾尔族饲鸽者肺（Pigeon Breeder＇s Lung,PBL）的发生发展,IL-4（rs2070874）的携带纯合子TT可能是维吾尔族PBL易感的一个危险因素,可能会增加维吾尔族饲养鸽子者发生PBL的风险,需要增加样本量进一步验证。

维吾尔族饲鸽者肺外周血小窝蛋白-2甲基化分析

目的研究维吾尔族饲鸽者肺患者的外周血小窝蛋白(CAV)-2基因的甲基化状态,同时探讨CAV-2甲基化的意义。方法收集2015年4月1日至2016年12月31日新疆维吾尔自治区人民医院研究对象共60例,其中20例维吾尔族饲养鸽子后患病者为病例组;20例维吾尔族饲养鸽子但未患病者为病例对照组;20例未饲养鸽子的维吾尔族健康体检者为健康对照组。从留取的外周血标本中提取DNA,然后进行亚硫酸氢盐转化,随后行聚合酶链式反应(PCR)扩增、体外转录及RNase A特异性酶切,最后利用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析技术检测CAV-2的甲基化。结果检测CAV-2片段的CpG位点(CpG_1,CpG_2~4,CpG_5,CpG_6~8,CpG_9,CpG_10,CpG_11),实际检测到的CpG位点数(CpG_1,CpG_2~4,CpG_5,CpG_6~8,CpG_11),三组中各个位点的甲基化率分布比较差异无统计学意义(P>0.05);三组间各个位点甲基化率行两两比较,差异亦无统计学意义(P>0.05)。结论CAV-2基因甲基化对维吾尔族饲鸽者肺的发病及肺纤维化过程有无影响有待进一步研究。